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廣東宏基因組測序原理

來源: 發(fā)布時間:2022-09-20

宏基因組(也稱微生物環(huán)境基因組或元基因組)是1998年提出的新名詞,其定義為“thegenomesofthetotalmicrobiotafoundinnature”,即生境中全部微小生物遺傳物質的總和。它包含了可培養(yǎng)的和未可培養(yǎng)的微生物的基因,目前主要指環(huán)境樣品中的細菌和的基因組總和。而所謂宏基因組學(或元基因組學,metagenomics)就是一種以環(huán)境樣品中的微生物群體基因組為研究對象,以功能基因篩選和/或測序分析為研究手段,以微生物多樣性、種群結構、進化關系、功能活性、相互協(xié)作關系及與環(huán)境之間的關系為研究目的的新的微生物研究方法。一般包括從環(huán)境樣品中提取基因組DNA,進行高通量測序分析,或克隆DNA到合適的載體,導入宿主菌體,篩選目的轉化子等工作。微生物檢測中含有一種以上的微生物培養(yǎng)物稱為混和培養(yǎng)物。廣東宏基因組測序原理

病毒宏基因組學:是在宏基因組學理論的基礎上,結合現(xiàn)有的病毒分子生物學檢測技術而興起的一個新的學科分支,是某類樣本中所有病毒(virus)或病毒類似物(virus-like-particle)及其所攜帶遺傳信息的總稱。宏病毒組直接以環(huán)境中所有病毒的遺傳物質為研究對象,能夠快速準確的鑒定出環(huán)境中所有的病毒組成,在病毒發(fā)現(xiàn)、病毒溯源、微生物預警等研究方面具有重要作用。宏病毒研究可應用于人或動物腸道或者血液樣本、海洋、土壤等的研究,用以挖掘潛在的對人類和環(huán)境的危害。水體微生物分析技術病毒宏基因組測序可直接對樣本中的核酸進行高通量測序。

宏基因組應用:特定生物種基因組研究使人們的認識單元實現(xiàn)了從單一基因到聚合基因的轉變,宏基因組研究將使人們擺脫物種界限,揭示更高更復雜層次上的生命運動規(guī)律。在目前的基因結構功能認識和基因操作技術背景下,細菌宏基因組成為研究和開發(fā)的主要對象。細菌宏基因組細菌人工染色體文庫篩選和基因系統(tǒng)學分析使研究者能更有效地開發(fā)細菌基因資源,更深入地洞察細菌多樣性。如宏基因組成為生物催化劑的新來源。病毒宏基因組測序是指通過高通量測序對整個環(huán)境中的病毒進行研究,以獲得單個樣品的飽和數據量,可進行病毒群體的物種分類、復雜度分析、群體結構分析、功能注釋、樣品間的病毒種類或基因差異分析。宏基因組測序研究擺脫了對病毒分離培養(yǎng)的限制,為環(huán)境中各種病毒的研究提供了有效工具,并可以通過宏基因組深度測序挖掘具有應用價值的基因資源。

病毒宏基因組測序又稱宏病毒組(Virome),是在宏基因組學理論的基礎上,結合現(xiàn)有的病毒分子生物學檢測技術而興起的一個新的學科分支。而所謂宏基因組學(metagenomics)就是一種以環(huán)境樣品中的微生物群體基因組為研究對象,以功能基因篩選和測序分析為研究手段,以微生物多樣性、種群結構、進化關系、功能活性、相互協(xié)作關系及與環(huán)境之間的關系為研究目的的新的微生物研究方法。一般包括從環(huán)境樣品中提取基因組DNA,克隆DNA到合適的載體,導入宿主菌體,篩選目的轉化子等工作。全基因組預測的意義揭示了人類生、老、病和死的奧秘。

病原宏基因組測序(mNGS)可與實時熒光定量PCR(RT-PCR)技術聯(lián)合使用,實現(xiàn)優(yōu)勢互補?!癛T-PCR由于其檢測速度快、操作流程簡單、成本較低的原因,更適用于大規(guī)模的篩查中,以便快速獲得是否為核酸陽性的初步證據,而對于RT-PCR檢測陰性、但臨床表型高度疑似的患者,利用mNGS進一步確認可有效提高檢測結果的可靠性,并獲得是否有其他病原體傳染的信息?!睂τ赗T-PCR檢測陽性的樣本,也可以進一步利用mNGS進行病毒全序列的分析,從而幫助獲得病毒是否發(fā)生變異的信息,為疫苗、藥物研發(fā)等方面提供可靠證據。除了利用病毒的致病性定量檢測病毒外,還可應用物理方法。病毒多樣性測序分析檢測

在探普生物進行病毒基因組測序的流程是怎么樣的?廣東宏基因組測序原理

宏基因組測序:宏基因組測序是對人體樣本或特定環(huán)境樣品中的總核酸(DNA或RNA)進行高通量測序,通過比對數據庫,得到傳染病原體的信息,能夠檢測出新發(fā)和罕見病原體,特別是在未知病原檢測中發(fā)揮了難以替代的作用,當然宏基因組檢測方法也面臨不少挑戰(zhàn),檢測結果的靈敏度受宿主及其他微生物背景核酸的影響。高通量測序技術能夠提供準確而科學的基因測序分析結果,為防控提供有力技術保障??茖W家通過對病毒進行全基因組測序,可以了解不同傳播階段的變異情況,推測病毒對人的傳染力的變化及傳播情況。廣東宏基因組測序原理

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