目前對(duì)我國(guó)首例輸入性裂谷熱病例病毒進(jìn)行全基因組測(cè)定,分析其進(jìn)化來源及潛在變異.方法提取樣本核酸,非特異性反轉(zhuǎn)錄擴(kuò)增病毒基因組RNA,使用IonTorrent二代測(cè)序儀進(jìn)行病毒全基因組測(cè)定.對(duì)獲得的基因組數(shù)據(jù)進(jìn)行序列拼接、比對(duì)、進(jìn)化樹構(gòu)建和關(guān)鍵位點(diǎn)分析.結(jié)果通過測(cè)定獲得了病毒全基因組11979nt,該測(cè)定病毒屬E基因分支,序列與先前南非分離株Kakamas相似度較高(＞98％)。病毒Gn蛋白C端信號(hào)肽區(qū)存在1個(gè)氨基酸突變.結(jié)論本研究分析測(cè)定的裂谷熱病毒全基因組與目前非洲流行株高度相似,病毒基因特征未出現(xiàn)明顯變異。

病毒全基因組進(jìn)行測(cè)序在輔助流調(diào)溯源、快速確定傳播關(guān)系起到了非常關(guān)鍵的作用。國(guó)內(nèi)深度測(cè)序進(jìn)化分析服務(wù)

病毒全基因組測(cè)序定：探普生物對(duì)病毒的全基因組進(jìn)行測(cè)序的實(shí)驗(yàn)基于二代測(cè)序技術(shù)。樣本經(jīng)過核酸純化-文庫(kù)構(gòu)建-生物信息學(xué)分析這3大基本流程后轉(zhuǎn)換成了序列數(shù)據(jù)。先，在核酸純化環(huán)節(jié)，探普提供專門針對(duì)性的核酸純化樣本指南，以提高目的物種的核酸純度和得率，與此同時(shí)探普生物也提供核酸純化服務(wù)。第二，文庫(kù)構(gòu)建環(huán)節(jié)，樣本的核酸具備濃度低，總量少的特點(diǎn)。探普生物專門針對(duì)這一點(diǎn)開發(fā)了超微量核酸文庫(kù)構(gòu)建，可以將0.01ng/μl甚至更低濃度的核酸構(gòu)建成測(cè)序文庫(kù)。第三，生物信息學(xué)分析環(huán)節(jié)。生存環(huán)境和狀態(tài)決定了對(duì)病毒的全基因組進(jìn)行測(cè)序的下機(jī)數(shù)據(jù)一般都伴隨大量的宿主和其他微生物的數(shù)據(jù)。探普生物基于該特點(diǎn)，優(yōu)化了自有數(shù)據(jù)庫(kù)，搭載了專門用的的生物信息學(xué)分析流程，可處理復(fù)雜背景下的目標(biāo)物種序列。

廣州高通量測(cè)序進(jìn)化分析服務(wù)公司二代測(cè)序單次運(yùn)行可以獲得海量的數(shù)據(jù)量，因此也稱為高通量測(cè)序。

病毒的蛋白組成的特點(diǎn)是什么？ （1）結(jié)構(gòu)蛋白由病毒的基因組編碼，結(jié)構(gòu)蛋白組成病毒體的蛋白成分如病毒體的衣殼蛋白、基質(zhì)蛋白和包膜蛋白。?? （2）非結(jié)構(gòu)蛋白由病毒的基因組編碼，但非結(jié)構(gòu)蛋白不參與病毒體構(gòu)成的蛋白成分。非結(jié)構(gòu)蛋白可存在于病毒體內(nèi)，如病毒的酶就屬于非結(jié)構(gòu)蛋白，也可存在于侵染細(xì)胞。?? 病毒結(jié)構(gòu)蛋白有以下幾種功能：①病毒結(jié)構(gòu)蛋白可保護(hù)病毒核酸，避免環(huán)境中的核酸酶和其他理化因素對(duì)病毒核酸造成破壞；②病毒結(jié)構(gòu)蛋白可參與病毒的侵染過程，衣殼蛋白和包膜上的蛋白突起能吸附至易感細(xì)胞受體，引起侵染；③具有抗原***毒基因編碼的衣殼蛋白和包膜蛋白具有良好的抗原性，能刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫反應(yīng)。

高通量測(cè)序在病毒準(zhǔn)種研究中如何應(yīng)用 在采用高通量測(cè)序技術(shù)研究準(zhǔn)種耐藥性方面，人類免疫缺陷病毒(HIV)較為突出。人類免疫缺陷病毒的逆轉(zhuǎn)錄酶有非常大的錯(cuò)配傾向，造成幾乎每復(fù)制1輪出現(xiàn)1個(gè)堿基對(duì)替換突變。被侵染的個(gè)體中存在非常巨大的病毒群，每天有1010個(gè)病毒粒子產(chǎn)生和死亡，在侵染后這種行為導(dǎo)致病毒快速形成一個(gè)多樣性的群，即準(zhǔn)種。高通量測(cè)序是研究大群體中序列突變體特征的先進(jìn)方法，它的一種應(yīng)用是對(duì)個(gè)體抗病毒治療失敗時(shí)產(chǎn)生的數(shù)量很少的耐藥突變的定量研究。測(cè)序覆蓋度是反映測(cè)序隨機(jī)性的指標(biāo)之一。

病毒全基因組測(cè)序定在探普生物長(zhǎng)時(shí)間運(yùn)行過程中，我們接觸到的對(duì)病毒的全基因組進(jìn)行測(cè)序項(xiàng)目有比較豐富的應(yīng)用場(chǎng)景。先，從事基因進(jìn)化/疫苗/藥品/抗體研制方向的研究的研究者一定會(huì)用到測(cè)序。這種場(chǎng)景一般是用密集的sanger測(cè)序監(jiān)測(cè)某幾個(gè)關(guān)鍵基因，搭載一定頻率的全基因組測(cè)序。這樣的組合省時(shí)省力省經(jīng)費(fèi)，同時(shí)能達(dá)到研究目的。此外，有的單位需要對(duì)傳染病的病原進(jìn)行流行病學(xué)監(jiān)測(cè)和研究，如疾控/疫控中心、醫(yī)院的傳染病科室以及一些高校和研究所的相應(yīng)課題組，可能需要對(duì)病毒的全基因組進(jìn)行測(cè)序以后，結(jié)合其他上下游的研究數(shù)據(jù)，達(dá)到研究或者監(jiān)測(cè)疫病的目的。

高通量測(cè)序技術(shù)正式啟用之后，研究者可以將樣品處理至標(biāo)準(zhǔn)濃度和體積后進(jìn)行測(cè)序和分析.河南高通量測(cè)序分析方法

想要通過高通量測(cè)序獲得病毒全序列，需要經(jīng)歷:核酸純化-文庫(kù)構(gòu)建-生物信息學(xué)分析這三大基本流程.國(guó)內(nèi)深度測(cè)序進(jìn)化分析服務(wù)

病毒基因組的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)有哪些？ 病毒基因組大小相差較大。 病毒基因組可以由DNA組成，也可以由RNA組成。 多數(shù)RNA病毒的基因組是由連續(xù)的核糖核酸鏈組成，還沒有發(fā)現(xiàn)有節(jié)段性的DNA分子構(gòu)成的病毒基因組。 病毒基因組的大部分是用來編碼蛋白質(zhì)的。 病毒基因組DNA序列能上相關(guān)的蛋白質(zhì)的基因或rRNA的基因往往叢集在基因組的一個(gè)或幾個(gè)特定的部位,形成一個(gè)功能單位或轉(zhuǎn)錄單元。 除了反轉(zhuǎn)錄病毒以外一切病毒基因組都是單倍體，每個(gè)基因在病毒顆粒中只出現(xiàn)一次。 噬菌體（細(xì)菌病毒）的基因是連續(xù)的；而真核細(xì)胞病毒的基因是不連續(xù)的，具有內(nèi)含子。國(guó)內(nèi)深度測(cè)序進(jìn)化分析服務(wù)