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RNA病毒全基因組測序分析診斷

來源: 發(fā)布時(shí)間:2021-11-13

病毒全基因組測序相關(guān)知識(shí):病毒全基因組測序,基因測序技術(shù)能鎖定個(gè)人病變基因,提前預(yù)防和調(diào)整。自上世紀(jì)90年代初,學(xué)界開始涉足“人類基因組計(jì)劃”。而傳統(tǒng)的測序方式是利用光學(xué)測序技術(shù)。用不同顏色的熒光標(biāo)記四種不同的堿基,然后用激光光源去捕捉熒光信號(hào)從而獲得待測基因的序列信息。雖然這種方法檢測可靠,但是價(jià)格不菲也是有目共睹的,一臺(tái)儀器的價(jià)格大約在50萬到75萬美元,而檢測一次的費(fèi)用也高達(dá)5千到1萬美元。新的基因測序儀中,芯片代替了傳統(tǒng)激光鏡頭、熒光染色劑等,芯片就是測序儀。高通量測序技術(shù)正式啟用之后,研究者可以將樣品處理至標(biāo)準(zhǔn)濃度和體積后進(jìn)行測序和分析。RNA病毒全基因組測序分析診斷

發(fā)現(xiàn)病例的要盡快對(duì)病毒進(jìn)行全基因組測序的原因是:通過對(duì)病毒全基因組高通量測序可以在較短時(shí)間內(nèi)獲取病毒的全部基因信息,解釋病毒的來源、傳播、變異演化等科學(xué)問題,為后續(xù)流行病學(xué)調(diào)查指明方向,為相關(guān)病例的追蹤溯源提供重要依據(jù),目前對(duì)病毒溯源分型主要檢測手段就是高通量測序技術(shù)。高通量測序技術(shù)如何進(jìn)行病毒溯源?先對(duì)獲得的早期病例標(biāo)本開展病毒全基因組高通量序列測定,通過與本地流行病毒及全球其他地區(qū)測定過序列的病毒比較,如果該病例傳染的病毒在基因組上和北美流行株更接近,比如在全長接近3萬個(gè)堿基的序列上,兩者只相差幾個(gè)堿基,相似度為99%以上,這就是為我們推斷該病例攜帶病毒為北美流行株提供依據(jù)。RNA病毒全基因組測序分析診斷DNA病毒基因組測序:一種指定DNA病毒盡量完整的序列。

病毒是由一種核酸分子(DNA或RNA)與蛋白質(zhì)(Protein)構(gòu)成或只由蛋白質(zhì)構(gòu)成(如朊病毒)。根據(jù)遺傳物質(zhì)的組成,可分為單鏈DNA病毒(ssDNA)、雙鏈DNA病毒(dsDNA)、單鏈RNA病毒(ssRNA)、雙鏈RNA病毒(dsRNA)和蛋白質(zhì)病毒(如朊病毒)。根據(jù)宿主類型的不同,可以分為噬菌體(細(xì)菌病毒)、植物病毒(煙花葉病毒)和動(dòng)物病毒(如禽流感病毒、天花病毒和HIV等)。病毒全基因組測序(VirusWholeGenomeSequencing,VWGS),是指基于第二代高通量測序技術(shù),對(duì)病毒全基因組進(jìn)行測序,利用生物信息分析手段,得到病毒的全基因組序列,解析編碼信息,并獲得相應(yīng)的變異信息。

第二代測序技術(shù)的發(fā)展:第二代測序技術(shù)(nextgene-rationsequencing,NGS)發(fā)展迅猛,與Sanger測序技術(shù)相比,NGS是一種能一次對(duì)幾十萬到幾百萬的DNA分子進(jìn)行序列測定的高通量的測序技術(shù),這種高通量測序使得對(duì)一個(gè)物種的轉(zhuǎn)錄組和基因組進(jìn)行細(xì)致全貌地分析成為可能,因此又被稱為深度測序(deepsequencing).相比傳統(tǒng)的個(gè)體基因組測序,NGS使得測序價(jià)格日益廉價(jià),并且在生物信息學(xué)軟件的輔助下,可以將大量不同基因片段的信息連接起來進(jìn)行基因組組裝,完成生物的基因組測序,這種新的測序技術(shù)革新了植物病毒的診斷方法,對(duì)于病毒的流行病學(xué)和生態(tài)學(xué)研究起到了非常重要的推動(dòng)作用。高通量測序技術(shù)本身并不是以病毒為目標(biāo)開發(fā)的。

全基因組測序要注意的事項(xiàng):全基因組測序是對(duì)未知基因組序列的物種進(jìn)行個(gè)體的基因組測序。技術(shù)路線:提取基因組DNA,然后隨機(jī)打斷,電泳回收所需長度的DNA的片段(0.2~5Kb),加上接頭,進(jìn)行DNA簇(Cluster)制備,后利用Paired-End(Solexa)或者M(jìn)ate-Pair(SOLiD)的方法對(duì)插入片段進(jìn)行測序。然后對(duì)測得的序列組裝成Contig,通過Paired-End的距離可進(jìn)一步組裝成Scaffold,進(jìn)而可組裝成染色體等。組裝效果與測序深度與覆蓋度、測序質(zhì)量等有關(guān)。常用的組裝有:SOAPdenovo、Trimity、Abyss等。測序深度(Sequencingdepth)是指測序得到的堿基總量(bp)與基因組大小的比值,它是評(píng)價(jià)測序量的指標(biāo)之一。測序深度與基因組覆蓋度之間是一個(gè)正相關(guān)的關(guān)系,測序帶來的錯(cuò)誤率或假陽性結(jié)果會(huì)隨著測序深度的提升而下降。測序的個(gè)體,如果采用的是雙末端或Mate-Pair方案,當(dāng)測序深度在50X~100X以上時(shí),基因組覆蓋度和測序錯(cuò)誤率控制均得以保證,后續(xù)序列組裝成染色體才能變得更容易與準(zhǔn)確。病毒全基因組測序是針對(duì)疑難報(bào)告,由**進(jìn)行深度解析。RNA全基因組病毒二代測序分析要多久

病毒全基因組測序具有的特點(diǎn):無需培養(yǎng)和特異性擴(kuò)增,對(duì)采集臨床樣本直接檢測。RNA病毒全基因組測序分析診斷

目前全球銷售產(chǎn)業(yè)發(fā)展主要有美國波士頓—?jiǎng)虻尼t(yī)藥產(chǎn)業(yè)集聚區(qū)、德國圖特林根的醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)集聚區(qū)、日本富山縣的醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)集聚區(qū)、印度班加羅爾的仿制藥產(chǎn)業(yè)集聚區(qū)等九大發(fā)展模式。而我國仍以醫(yī)藥服務(wù)和醫(yī)藥商品為主,整體收入規(guī)模偏小。如行家預(yù)判,服務(wù)型發(fā)展即將步入黃金時(shí)代,眾多企業(yè)圍繞醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)、商業(yè)領(lǐng)域及新興的互聯(lián)網(wǎng)醫(yī)藥等領(lǐng)域正在進(jìn)行廝殺。在我國政策的支持下,在社會(huì)資本的推動(dòng)下以及技術(shù)升級(jí)的帶動(dòng)下,互聯(lián)網(wǎng)巨頭、科技巨頭、地產(chǎn)巨頭等企業(yè)紛紛跨界進(jìn)入服務(wù)型。醫(yī)藥健康方面人才培養(yǎng)體制貧乏,經(jīng)調(diào)查,中國的大學(xué)中把物流管理與醫(yī)藥知識(shí)結(jié)合的專業(yè)少之又少,單方面精通的人才對(duì)于醫(yī)藥冷鏈物流無法完全勝任,通過調(diào)研冷鏈物流企業(yè),了解到培養(yǎng)物流人員有關(guān)冷鏈物流的相關(guān)知識(shí)來勝任冷鏈物流工作的計(jì)劃進(jìn)展緩慢,使得人才成為完善醫(yī)藥健康的重要制約因素。以病毒測序,病毒全基因組測序,病毒宏基因組測序,未知病原鑒定為例,主打運(yùn)動(dòng)健康A(chǔ)PP停留在工具層面,缺少完整的消費(fèi)場景閉環(huán),較強(qiáng)的工具屬性停留在實(shí)現(xiàn)用戶**基礎(chǔ)的功能需求,并未涉及足夠高的用戶使用價(jià)值實(shí)現(xiàn),同時(shí)缺乏數(shù)字化運(yùn)營的效能也是運(yùn)動(dòng)健康A(chǔ)PP發(fā)展的明顯桎梏,經(jīng)營模式有待進(jìn)一步探索。RNA病毒全基因組測序分析診斷

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