蛋白純化儀蛋白純化方法之離子交換技術(shù):實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)介質(zhì)的選擇離子交換介質(zhì)首先要考慮目的分子的大小,因?yàn)槟康姆肿訒?huì)影響其接近介質(zhì)上的帶電功能集團(tuán),因此也會(huì)影響介質(zhì)對(duì)目的分子的動(dòng)力載量,從而影響其分離。對(duì)于大多數(shù)純化步驟來(lái)說,建議從開始的階段使用強(qiáng)離子交換柱,可在摸索方法的過程中有一個(gè)寬的pH范圍。對(duì)于已知等電點(diǎn)的蛋白質(zhì),可根據(jù)其等電點(diǎn)來(lái)選擇。而未知等電點(diǎn)的蛋白質(zhì),在實(shí)際操作中常采用這樣的方法,先選擇一個(gè)陰離子交換劑,再選擇一個(gè)中性的pH緩沖液,將蛋白質(zhì)樣品透析至pH7.0,然后過陰離子交換柱。根據(jù)過柱后的結(jié)果確定下一個(gè)使用的緩沖液pH。蛋白純化儀的應(yīng)用范圍。四川類似AKTA蛋白純化儀代理廠家
蛋白純化儀,高壓制備液相色譜,蛋白質(zhì)的產(chǎn)率和純度是衡量純化是否成功的重要指標(biāo)。除有效的色譜分離外,配置良好、可靠的儀器也能影響純化的成功。制備型反相液相色譜由于具有**離能力,經(jīng)常被用做多肽和小分子親水蛋白純化流程的***一步。雖然大家都知道反相液相色譜所用的溶劑條件會(huì)使蛋白結(jié)構(gòu)變性,但也能通過調(diào)節(jié)適當(dāng)?shù)臈l件再使其復(fù)性,特別是小分子蛋白,Unique AutoPrep高壓制備液相色譜可以自動(dòng)化完成樣品進(jìn)樣、分離純化、目標(biāo)組分收集的操作,Unique CDSystem色譜工作站軟件可執(zhí)行儀器控制,純化方法編輯及自動(dòng)運(yùn)行,自動(dòng)進(jìn)樣、自動(dòng)組分收集,數(shù)據(jù)采集、保存和管理等功能。陜西蛋白純化儀代理銷售價(jià)格手動(dòng)收集、全自動(dòng)組分收集以及大體積收集模式樣品的蛋白純化儀。
蛋白純化儀,蛋白純化方法之凝膠過濾色譜1.凝膠介質(zhì)的選擇凝膠介質(zhì)的選擇主要是根據(jù)待分離的蛋白和雜蛋白的分子量選擇具有相應(yīng)分離范圍的凝膠,同時(shí)還需要考慮到分辨率和穩(wěn)定性的因素。比如,如果是要將目的蛋白和小分子物質(zhì)分開,可以根據(jù)他們分配系數(shù)的差異,選用SephadexG-25和G-50;對(duì)于小肽和低分子量物質(zhì)的脫鹽,則可以選用SephadexG-10、G-15以及Bio-GelP-2或P-4;如果是分子量相近的蛋白質(zhì),一般選用排阻限度略大于樣品中**高分子量物質(zhì)的凝膠。具體凝膠過濾色譜介質(zhì)應(yīng)用
蛋白純化儀,純化方法之凝膠過濾色譜:3、分辨率不高提高裝柱質(zhì)量,使色譜柱裝填勻?qū)?;提高柱床高度;控制上樣體積,比較大上樣體積不超過柱床體積5%;控制樣品黏度與洗脫溶液黏度保持一致;根據(jù)樣品特點(diǎn)選擇合適的洗脫溶液,調(diào)節(jié)洗脫溶液的離子強(qiáng)度或親水性;選擇合適的凝膠柱(如何選擇請(qǐng)參照上文)4、色譜峰對(duì)稱性差?提高裝柱質(zhì)量,裝柱勻?qū)崱糁b的太松,容易引起拖尾,裝的太緊,會(huì)引起前沿;?柱較臟,再生色譜柱5、峰出現(xiàn)的原因及解決方法?柱床松動(dòng),重新裝柱或反向沖洗柱?柱篩板堵塞,超聲清洗篩板?柱干裂,重新裝柱蛋白純化儀哪個(gè)廠家可靠?
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