蛋白純化試劑ChelatingBeads6FF是以高度交聯(lián)的6%瓊脂糖凝膠為基質(zhì),配體為亞氨基二乙酸(IDA),結(jié)構(gòu)如圖1所示。ChelatingBeads6FF可以用于螯合各種金屬離子,如Cu2+,Zn2+,Co2+,Ni2+和Fe3+,可根據(jù)金屬離子對(duì)標(biāo)簽蛋白的結(jié)合力來選擇需要螯合的金屬離子。通常優(yōu)先Ni2+,因?yàn)殒囯x子螯合填料可以很好的從各種表達(dá)體系中一步純化his標(biāo)簽蛋白。Cu2+,Zn2+,結(jié)合力很強(qiáng),可以用于純化結(jié)合力弱的蛋白。Co2+和Fe3+對(duì)標(biāo)簽蛋白的特異性更強(qiáng),純度更高。用于生物源蛋白類產(chǎn)品中內(nèi)du素的去除。湖北離子交換試劑怎么樣
上海楚知生物蛋白純化試劑,DYKDDDDK(Flag)標(biāo)簽是由8個(gè)氨基酸組成的短肽,親水性強(qiáng),不會(huì)占據(jù)其他表位與結(jié)合域,因此更易與抗體結(jié)合。Anti-DYKDDDDKAntibody為小鼠IgG2B重組單克隆抗體,能特異性識(shí)別融合蛋白N端、C端的DYKDDDDK標(biāo)簽,***用于融合蛋白的純化、檢測(cè)和鑒定。抗體來源:小鼠交叉反應(yīng):DYKDDDDK標(biāo)簽融合蛋白克隆類型:單克隆抗體亞型:IgG2B來源:293細(xì)胞表達(dá)的重組抗體純化方式:rProteinA親和純化產(chǎn)品純度:≥95%,SDS-PAGE檢測(cè)儲(chǔ)存緩沖液:1×PBS(pH7.4),0.02%疊氮鈉,50%甘油儲(chǔ)存條件:干冰運(yùn)輸,-20℃可保存一年,避免反復(fù)凍融湖南離子交換試劑生產(chǎn)商預(yù)活化填料哪家有賣的?
磁珠法口腔拭子基因組提取試劑盒可以快速地從口腔拭子中提取高質(zhì)量DNA。提取出的基因組 DNA A260/A280 典型的比值達(dá) 1.7-1.9,產(chǎn)物可用于PCR、載體構(gòu)建、核酸雜交等下游實(shí)驗(yàn)。
磁珠法口腔拭子基因組提取試劑盒組成
試劑名稱 50T 200T
Buffer A 5ml 20ml
Buffer B 10ml 40ml
蛋白酶K 500μl 2ml
磁珠 10ml 40ml
Wash Buffer 125ml 100ml
Elution Buffer 5ml 20m
l2.問題及解決方案
提不到DNA或產(chǎn)量很低取樣量少:取樣前半小時(shí)漱口。樣品保存不當(dāng):確保樣品新鮮有效。可能沒加入ProteinaseK,或加入量不足,導(dǎo)致細(xì)胞裂解不完全,或者65℃孵育時(shí)間過短。 2.DNA未完全回收:減少上樣量或增加磁珠量,確保樣品充分吸附。確保磁珠與樣品充分混勻,吸附時(shí)磁珠一直保持懸浮狀態(tài)。3洗脫液中無/很少DNA:確保Washbuffer中加入相應(yīng)的乙醇,用完后要密封保存,防止揮發(fā)。確保洗脫液中的鹽濃度和pH。洗脫液用量不當(dāng):調(diào)整洗脫液體積。磁珠風(fēng)干時(shí)間太長,磁珠未完全分散。4,DNA純度不高,有污染RNA污染:檢查RNase是否有問題,適當(dāng)增加RNase的用量。洗雜不充分,含有雜質(zhì)。若用去離子水洗脫DNA,A260/280比值會(huì)偏低,但并不表示純度低。
rProteinA/GBeads4FF是將rProteinA/G高密度定向偶聯(lián)到高度交聯(lián)的瓊脂糖凝膠微球表面,該產(chǎn)品具有更高的抗體結(jié)合能力和較低的蛋白非特異吸附率,洗脫條件更均一,一步純化即可從血清樣品中分離出純度大于90%的抗體。產(chǎn)品性能見表1。本產(chǎn)品主要用于免疫沉淀(IP)以及免疫共沉淀(Co-IP)研究,也可用于抗體固定及其它相關(guān)研究。用戶可根據(jù)目標(biāo)抗體的種屬來源及亞型選擇微球的類別,純化流程本產(chǎn)品主要應(yīng)用于免疫沉淀(IP)以及免疫共沉淀(Co-IP)研究。2.1緩沖液的準(zhǔn)備所用水和緩沖液在使用之前建議用0.22μm或0.45μm濾膜過濾。平衡/洗雜液:0.15MNaCl,20mMNa2HPO4,pH7.0洗脫液:0.1M甘氨酸,pH3.0中和液:1MTris-HCl,pH8.5交聯(lián)液:0.2M三乙醇胺,pH8.2交聯(lián)劑:DMP(dimetylpimelimidatedihydrochloride)終止液:50mMTris,pH7.5質(zhì)粒抽提試劑盒Plasmid Purification MaxiPrep Kit。
試劑篇:GST親和純化原理GST親和層析是利用GST融合蛋白與固定的谷胱甘肽(GSH)通過硫鍵共價(jià)親和,通過GSH交換洗脫的原理來進(jìn)行純化。該純化柱中,凝膠手臂上通過硫鍵結(jié)合一個(gè)谷胱甘肽。然后利用谷胱甘肽與谷胱甘肽巰基轉(zhuǎn)移酶(即GST-tag(26KDa))之間酶和底物的特異性作用力,使得帶GST標(biāo)簽的融合蛋白能夠與凝膠上的手臂谷胱甘肽結(jié)合,從而將帶標(biāo)簽的蛋白與其他蛋白分離開。谷胱甘肽通常有氧化型GSSG和還原型GSH,當(dāng)我們使用GSH洗脫時(shí),GSH會(huì)與凝膠上的谷胱甘肽競爭結(jié)合融合蛋白,從而將目標(biāo)蛋白洗脫。GST標(biāo)簽蛋白可直接從細(xì)菌裂解液中利用含有還原型谷胱甘肽瓊脂糖凝膠(Glutathionesepharose)親和樹脂進(jìn)行純化。GST標(biāo)簽蛋白可在溫和、非變性條件下洗脫,因此保留了蛋白的抗原性和生物活性。GST在變性條件下會(huì)失去對(duì)谷胱甘肽樹脂的結(jié)合能力,因此不能在純化緩沖液中加入強(qiáng)變性劑如:鹽酸胍或尿素等。如果蛋白表達(dá)在包涵體中,可復(fù)性后再純化。此外要去除GST標(biāo)簽,可用位點(diǎn)特異性蛋白酶切除。一步純化鏈霉親和素。湖南蛋白檢測(cè)試劑怎么樣
分子生物酶的種類。作用。湖北離子交換試劑怎么樣
生物試劑(Biochemicalreagent)是指有關(guān)生命科學(xué)研究的生物材料或有機(jī)化合物,以及臨床診斷、醫(yī)學(xué)研究用的試劑。由于生命科學(xué)面廣、發(fā)展快,因此該類試劑品種繁多、性質(zhì)復(fù)雜。主要有電泳試劑、色譜試劑、離心分離試劑、免疫試劑、標(biāo)記試劑、組織化學(xué)試劑、透變劑和致*物質(zhì)、殺蟲劑、培養(yǎng)劑、緩沖劑、電鏡試劑、蛋白質(zhì)和核酸沉淀劑、縮合劑、超濾膜、臨床診斷試劑、染色劑、抗氧化劑、防霉劑、去垢劑和表面活性劑、生化標(biāo)準(zhǔn)品試劑、生化質(zhì)控品試劑、分離材料等等。我國的試劑規(guī)格基本上按純度(雜質(zhì)含量的多少)劃分,共有高純、光譜純、基準(zhǔn)、分光純、優(yōu)級(jí)純、分析和化學(xué)純等7種。國家和主管部門頒布質(zhì)量指標(biāo)的主要優(yōu)級(jí)純、分級(jí)純和化學(xué)純3種。(1)優(yōu)級(jí)純(GR:Guaranteedreagent),又稱一級(jí)品或保證試劑,,這種試劑純度比較高,雜質(zhì)含量比較低,適合于重要精密的分析工作和科學(xué)研究工作,使用綠色瓶簽。(2)分析純(AR),又稱二級(jí)試劑,純度很高,,略次于優(yōu)級(jí)純,適合于重要分析及一般研究工作,使用紅色瓶簽。(3)化學(xué)純(CP),又稱三級(jí)試劑,≥,純度與分析純相差較大,適用于工礦、學(xué)校一般分析工作。使用藍(lán)色(深藍(lán)色)標(biāo)簽。湖北離子交換試劑怎么樣
上海楚知生物科技有限公司屬于機(jī)械及行業(yè)設(shè)備的高新企業(yè),技術(shù)力量雄厚。是一家有限責(zé)任公司企業(yè),隨著市場(chǎng)的發(fā)展和生產(chǎn)的需求,與多家企業(yè)合作研究,在原有產(chǎn)品的基礎(chǔ)上經(jīng)過不斷改進(jìn),追求新型,在強(qiáng)化內(nèi)部管理,完善結(jié)構(gòu)調(diào)整的同時(shí),良好的質(zhì)量、合理的價(jià)格、完善的服務(wù),在業(yè)界受到寬泛好評(píng)。公司始終堅(jiān)持客戶需求優(yōu)先的原則,致力于提供高質(zhì)量的知楚搖床,博旅發(fā)酵罐,小動(dòng)物發(fā)光成像,ATS高壓均質(zhì)機(jī)。上海楚知生物自成立以來,一直堅(jiān)持走正規(guī)化、專業(yè)化路線,得到了廣大客戶及社會(huì)各界的普遍認(rèn)可與大力支持。