蛋白純化儀蛋白純化方法之離子交換技術(shù)：案例介紹，離子交換是蛋白純化中的重要手段，即可以用于捕獲階段，也可以用于精純階段。預(yù)處理和裝柱1.將超純水與沉降膠按1:3比例懸浮，輕輕攪勻；2.將色譜柱固定到設(shè)備支架上，鏈接出口管道，從柱底端進(jìn)口反向泵入超純水，排除管道及篩板中的氣泡，停泵，然后從出口端放出部分超純水，保留1~2cm高度超純水，封死出口端，然后正向沖洗進(jìn)口端管道和適配器，排除篩板和管道中氣泡；3.通過玻璃棒引流將懸浮膠導(dǎo)入色譜柱，在柱上端補(bǔ)充部分超純水，攪勻，裝上適配器；4.將柱出口端與色譜設(shè)備連接，以0.2MPa恒壓裝柱，裝填至恒定的柱床高度，標(biāo)記柱床膠面位置，關(guān)閉泵，松開適配器，降低適配器至膠面下2mm處，繼續(xù)裝填，待柱床高度穩(wěn)定后，標(biāo)記柱床膠面位置，降低適配器至柱上標(biāo)記柱床位置下2mm。固定適配器，繼續(xù)裝填2~3柱體積；5.確定柱體積，測量柱高，計(jì)算柱體積及記錄裝柱時(shí)的比較大流速；快速純化從微克到克水平的蛋白、肽和核酸等目標(biāo)產(chǎn)物的蛋白純化儀。山東官方授權(quán)經(jīng)銷蛋白純化儀廠家批發(fā)價(jià)
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蛋白純化儀，蛋白純化方法之凝膠過濾色譜：2.凝膠介質(zhì)的預(yù)處理凝膠在使用前應(yīng)用水充分溶脹（膠：水=1：10），自然溶脹的耗時(shí)較長，可采用加熱的方法使溶脹加速，即在沸水浴中將凝膠升溫至沸，1~2h即可達(dá)到溶脹。在燒杯中將干燥凝膠加水或緩沖液，攪拌，靜置，傾去上層混懸液，除去上清液中的凝膠碎塊，重復(fù)數(shù)次，直到上清澄清為止。3.色譜柱的選擇色譜柱的體積和高徑比與色譜分離效果密切相關(guān)，凝膠柱床的體積、柱長和柱的直徑以及柱比的選擇必須根據(jù)樣品的數(shù)量，性質(zhì)和分離目的進(jìn)行確定。組別分離時(shí)，大多采用2~30cm長的色譜柱，柱床體積為樣品溶液體積的5倍以上，柱比一般在5~10之間；而分級(jí)分離一般需要100cm左右的色譜柱，并要求柱床體積大于樣品體積25倍以上，柱比在20~100之間。
AutoPure 蛋白純化儀系統(tǒng)：產(chǎn)品特點(diǎn)及優(yōu)勢(shì)： – 低脈動(dòng)高精度雙柱塞輸液泵 ，保證***的分離重現(xiàn)性 ;– 全系統(tǒng)與液體接觸的地方均由生物兼容性材料組成、符合FDA、USP VI等相關(guān)法規(guī)要求 ;– DAD全譜直讀檢測器，避免了傳統(tǒng)的機(jī)械切換式檢測器所帶來的不穩(wěn)定性及高故障率 ;– 固定波長檢測器燈為長壽命LED等，壽命大于8000小時(shí)，降低維護(hù)成本 ;– **技術(shù)紫外檢測器流通池，低死體積、低峰拓展，提高了色譜分離度 ;– 高靈敏度在線pH、電導(dǎo)率、紫外檢測器，低死體積、低峰拓展，提高了色譜分離度 ;– 集中了buffer選擇閥，自動(dòng)進(jìn)樣閥、柱位閥等自動(dòng)化組件，提高了純化的自動(dòng)化程度 ;– 具有柱前、柱后、壓差報(bào)警，氣泡傳感器檢測等功能，極大的保護(hù)了系統(tǒng)及層析柱的安全性 ;蛋白純化儀工作原理。
蛋白純化儀蛋白純化方法之離子交換技術(shù)：流動(dòng)相的選擇離子交換色譜的流動(dòng)相必需是有一定離子強(qiáng)度的并對(duì)pH有一定緩沖能力的溶液。為了避免目的蛋白失活，使用緩沖液可穩(wěn)定流動(dòng)相的pH，使之在色譜過程中不發(fā)生明顯變化，同時(shí)可穩(wěn)定目的分子上的電荷量，保證色譜結(jié)果的重要性。選擇緩沖液一般按照以下原則：陽離子交換劑應(yīng)選用陰離子緩沖液，可用檸檬酸鹽、磷酸鹽、醋酸鹽、甘氨酸鹽等；陰離子交換劑應(yīng)選用陽離子緩沖液，可用烷基胺、Tris、氨基乙醇胺、乙二胺、咪唑等；起始緩沖液的濃度應(yīng)盡可能低（<100mmol/L）這樣可以使色譜柱上更多的吸附分離物質(zhì)；緩沖液應(yīng)不含會(huì)影響被分離物質(zhì)活性和溶解度成分，洗脫時(shí)盡量不采用pH梯度洗脫，色譜柱的選擇，離子交換色譜通常選用粗短柱，即高徑比小的色譜柱。典型的離子交換柱高度在5~20cm，高徑比一般小于5。如果需要增加離子交換劑的體積，只能從增加柱的直徑而不能增加其高度。如果是連續(xù)梯度洗脫，可以適當(dāng)增加柱的長度。英賽斯Unique AutoPure?蛋白純化儀質(zhì)量怎么樣？河南蛋白純化儀廠家批發(fā)價(jià)
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上海楚知生物蛋白純化儀，蛋白純化方法之凝膠過濾色譜：6.洗脫與收集凝膠過濾色譜的緩沖液用單一緩沖液或含鹽緩沖液作為洗脫液即可，主要考慮倆個(gè)方面的原因：蛋白的溶解性和穩(wěn)定性。所用的緩沖液要保證蛋白質(zhì)樣品在其中不會(huì)變性或沉淀，PH應(yīng)選在樣品較穩(wěn)定、溶解性良好的范圍之內(nèi)，同時(shí)緩沖液中要含有一定的鹽（NaCL），對(duì)蛋白質(zhì)起穩(wěn)定和保護(hù)作用。洗脫過程中始終保持一定的操作壓，流速不可過高，保持在0.5~3.0mL/min即可。實(shí)驗(yàn)方案設(shè)計(jì)UniqueAutopure蛋白純化系統(tǒng)山東官方授權(quán)經(jīng)銷蛋白純化儀廠家批發(fā)價(jià)
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