使用后用0.1M NaOH泡24h,然后20%乙醇浸泡保存。這個(gè)我是聽老板們說的,的確乙醇泡完后孔徑會增大,基本就是5-10KD較大,也就是說如果你的蛋白在21KD以上,應(yīng)該沒問題。或者可以不用乙醇泡,用NaOH洗之后直接用無菌水保存,每周換一下液體,應(yīng)該沒有問題??纯凑f明書不就結(jié)了!我原來在CRO的時(shí)候一直是重復(fù)用的,也沒見什么不好??!短期會用的話,用20%的乙醇泡著,回頭拼命用millipore的水充干凈,然后在用樣品緩沖液平衡一下就好,至于有些人說的改變孔徑,也沒那么大影響的,你至少跟目的蛋白分子量差別3倍的截留分子量才安全的不是嗎?1個(gè)月以內(nèi)不用的話,建議用100mM的NaOH保存!更長時(shí)間的話加0.02%的疊氮鈉,但那個(gè)東西強(qiáng)致疾病物,不建議使用。理論上截留目標(biāo)物,孔徑應(yīng)選1/3~1/5的膜;透過目標(biāo)物,孔徑應(yīng)選5-10倍的膜。超濾離心管適用于從細(xì)胞培養(yǎng)基、血漿、尿液等樣品中提取蛋白質(zhì)、核酸、多糖等大分子化合物。嘉興超濾離心管價(jià)錢多少
離心過濾器具有快速超過濾功能,能夠達(dá)到較高的濃縮系數(shù),易于從稀釋液和復(fù)雜的樣本組合進(jìn)行濃縮液回收。其豎式設(shè)計(jì)以及可用的濾膜表面積能提供快速的樣本處理和較高的樣本回收率(通常大于90%稀薄的初始溶液),并能進(jìn)行80倍濃縮。典型的處理時(shí)間為15至60分鐘,這取決于標(biāo)稱分子量限值(NMWL)。豎式設(shè)計(jì)將溶質(zhì)極化和之后造成的濾膜結(jié)垢降至較低,過濾裝置中的物理止濾點(diǎn)防止過濾器旋轉(zhuǎn)過度使樣本干燥和造成樣本損失。濃縮液用移液管從過濾器的樣本槽中收集,而超過濾濾出液則收集到所提供的離心管中。該裝置可在擺桶或定角轉(zhuǎn)子中旋轉(zhuǎn)。裝置未經(jīng)消毒,只供—次使用。遼寧蛋白分離離心管在哪買使用超濾離心管時(shí)應(yīng)注意避免過度壓力造成膜堵塞或損壞,并影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
以下是處理超濾管,重復(fù)利用超濾管的步驟。倒出超濾管里的水,用milliQ水輕輕潤洗幾次,【若管底有可見的蛋白沉淀,可以先加入水,然后用設(shè)備頭吹打,注意不要碰到膜,吹打至沉淀懸起,然后倒掉,不可用自來水猛沖】然后加入0.2M的NaOH溶液,室溫放置20min,期間平衡超濾管。再離心10min。倒出殘留的NaOH溶液,將管芯浸入MilliQ水的燒杯(1或2L)中,放置幾個(gè)小時(shí),再換新的水,放置幾個(gè)小時(shí),不斷稀釋NaOH濃度。50ml管和蓋子用自來水洗,內(nèi)壁再用MilliQ水洗干凈。取出浸沒的管芯,加至接近滿的MilliQ水,50ml管也加滿MilliQ水,將管芯慢慢放入50ml。離心管,排出部分水,然后蓋上蓋子,放4度保存,直到下次使用。一般來說,按照上述步驟和注意事項(xiàng),每根管用三四年不會壞。
超濾離心管的常見問題與解答,一:超濾離心管的膜材質(zhì)是什么?超濾離心管的膜材質(zhì)為特有的Ultracel再生纖維素膜,生產(chǎn)工藝嚴(yán)格,截留分子量明確而,蛋白吸附損失較小。二:如果要用超濾離心管的方法分離兩種蛋白,那么這兩個(gè)蛋白的大小需要相差多少?按照經(jīng)驗(yàn),建議兩個(gè)蛋白的分子量要相差一個(gè)數(shù)量級(10倍)。不保證超濾離心管不包含RNA酶,建議用0.1%DEPC在37度浸泡2小時(shí),以完全滅活RNA酶;殘留的DEPC可以用Milli-Q超純水洗滌除去。去污劑因其獨(dú)特的性質(zhì),當(dāng)濃度大于臨界微團(tuán)濃度(Critical Micelle Concentration、CMC)時(shí),去污劑分子會聚集形成微團(tuán)而改變分子構(gòu)象,這有可能會影響去污劑的去除效果,具體的操作步驟請垂詢我們。超濾離心管可以有效地去除混合物中的低分子量化合物,從而提高目標(biāo)化合物的純度。
一提起蛋白質(zhì)濃縮、更換緩沖液,我們都會想起超濾。這是一種我們都很熟悉的膜分離技術(shù)。它可用來分離溶液中極小的顆粒和溶解的分子。這種方法的較大特點(diǎn)是操作簡便,只需要濃縮離心管和離心機(jī),即可圓滿完成我們的任務(wù)。與層析、透析等方法相比,超濾對被處理的分子更加溫和。它不需要有機(jī)萃取,就不會導(dǎo)致蛋白變性。這種方法非常高效,可同時(shí)濃縮和純化分子。操作可在低溫(比如冷庫)下進(jìn)行。另外,快速、便宜,也是許多人青睞它的原因。濃縮離心管的操作很簡單。選擇適當(dāng)?shù)臐饪s離心管,加入待處理的樣本,按照離心管的指示進(jìn)行離心操作,之后回收截留的樣本。在離心力的作用下,溶液中的小分子溶質(zhì)和溶劑透過超濾膜,被收集在濾過液收集瓶中,而大分子溶質(zhì)被超濾膜截留在濃縮離心管中。這種分離的主要依據(jù)是分子大小,但分子形狀和電荷等其他因素也會有影響。使用超濾離心管時(shí)應(yīng)注意遵循正確的操作程序和安全規(guī)定,以避免意外傷害或污染。遼寧蛋白分離離心管在哪買
超濾離心管能夠去除混合物中的雜質(zhì)和低分子量化合物,得到高純度的目標(biāo)化合物。嘉興超濾離心管價(jià)錢多少
超濾離心管使用的是再生纖維素膜,這種材質(zhì)是蛋白吸附較低的超濾膜。但是對于一些疏水性蛋白或非極性蛋白,它們和膜的非特異吸附可能會增強(qiáng),對于這種情況,可以嘗試在實(shí)驗(yàn)前對超濾管進(jìn)行封閉處理,也可以嘗試換成Amicon Ultra0.5或2來進(jìn)行實(shí)驗(yàn),通過減小膜面積來降低非特異性吸附。超濾膜含有微量甘油。如果此成分干擾分析,可用緩沖液或Milli-Q水預(yù)清洗。如果干擾仍存在,用0.1N NaOH清洗,然后用緩沖液或Milli-Q水再次清洗后甩干。嘉興超濾離心管價(jià)錢多少
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