血清是血液凝固后的液體部分,不含血細胞、纖維蛋白及凝集因子等,含有多種對細胞生長必需的營養(yǎng)因子及大分子物質。血清白蛋白是胎牛血清的主要成分。此外,重要的是,胎牛血清中含有大量對細胞生長必需的生長因子 [1, 2] 。 胎牛血清也含有一些小分子物質,如氨基酸、糖類、脂類及類物質。胎牛血清應用在哺乳動物細胞培養(yǎng)中;因此,胎牛血清應用很較廣。比如,胎牛血清能夠用在科研、工業(yè)生產、疫苗生產的質量控制及生物技術藥物的質量控制領域。相對于新生動物血清或成體動物血清來說,胚胎期動物血清有什么優(yōu)點?與其它類型血清相比,胚胎期動物血清含有更多的生長因子,及較少的gamma球蛋白含量。血清與血漿的區(qū)別:血清是由血液凝固后的上清液制備的;而血漿中含有抗凝劑,所以血漿中含有血液凝固相關的蛋白。血清可提供結合蛋白:結合蛋白作用是攜帶重要的低分子量物質。無錫不含外泌體血清哪里有賣
添加胎牛血清的時候要注意避免把沉淀加入培養(yǎng)液,因為如果培養(yǎng)液有沉淀的存在,會使得其中培養(yǎng)的細胞產生大量的黑點,除此之外,細胞的表面還很可能會覆蓋一層油狀物質,總之出現這樣的情況會極其不利于細胞的正常生長。那么為了較為大程度減少血清的損失,可以把所有有沉淀的血清進行收集并做離心處理,之后便可將上清液加入培養(yǎng)液中使用。注意解凍的方法:再高質量的胎牛血清也要在使用的時候堅持謹慎的原則,因此在解凍血清的時候,要細心地考慮到其解凍時體積一般會增大的特點,事先為血清預留出能夠容納膨脹體積的空間。如此一來,便不會發(fā)生污染或者容器凍裂的情況。另外較為好采用國際通用的解方式解凍血清。鎮(zhèn)江進口血清哪家好血清的保存應該注意:熱滅活是指56℃,30分鐘加熱已完全解凍的血清。
血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養(yǎng)條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、、無機物等,這些物質對促進細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的。胎牛血清的細菌內有毒的 ≤5(EU/ml);牛腹瀉病毒:陰性;大腸桿菌噬菌體:陰性;支持細胞增殖(Sp2/0-Ag14) 生長曲線(接種濃度)較為大增殖濃度≥2.5×106 個/ml;細胞倍增時間 ≤15h;克隆率 ≥85%。
血清的保存應該注意:需要長期保存的血清必須儲存于-20℃-70℃低溫冰箱中。4℃冰箱中保存時間切勿超過1個月,由于血清結冰時體積會增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前,必須預留一定體積空間,否則易發(fā)生污染或玻璃瓶凍裂。瓶裝血清解凍需采用逐步解凍法:-20℃至-70℃ 低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天。然后移入室溫,待全部溶解后再分裝。在溶解過程中需不斷輕輕搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沉淀的發(fā)生。切勿直接將血清從-20℃進入37℃解凍,這樣因溫度改變太大,容易造成蛋白質凝集而出現沉淀。每100ml人血清含有蛋白質6-8g,其中主要是白蛋白和球蛋白。
除了對血清進行檢測,有何更直觀的方式分辨血清質量?目測法,我們可根據血清的顏色,沉淀,澄清度等進行區(qū)分。顏色:顏色根據血清蛋白含量的不同,可表現出黃色或者紅色。進口血清質量較為好的呈現出淡黃、微紅色,較差質量呈現出橘紅色或鮮紅色。熱滅清或保存不當的,由于血紅蛋白的破壞氧化,會呈現出暗紅色,甚至咖啡色。沉淀:血清中的沉淀主要是有纖維蛋白的凝聚產生。沉淀產生的原因很多,使用時反復凍融會增加沉淀。進口血清過濾分裝前很少反復凍融,因此成品清澈。澄清度:進口血清是由于蛋白和脂類等物質含量低,表現為稀薄、清淡。國產血清絕大多數為新生牛血清,相對而言更加粘稠,顏色略深。胎牛血清的無菌檢驗:陰性;支原體檢驗: 陰性;細菌內有毒的 ≤5(EU/ml)。鎮(zhèn)江進口血清哪家好
血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養(yǎng)條件不同而異。無錫不含外泌體血清哪里有賣
血清的保存應該注意:熱滅活是指56℃,30分鐘加熱已完全解凍的血清。加熱過程中須規(guī)則搖晃均勻,此熱處理的目的是使血清中的補體成分(complement)滅活,除非必須,一般不建議作此熱處理,因為熱處理會造成血清沉淀物明顯增多,而且還會影響血清的質量,補體參與反應有:細胞毒作用,平滑肌細胞收縮,肥大細胞和血小板釋放組胺,增強吞噬作用,促進淋巴細胞和巨噬細胞發(fā)生化學趨化和活化。一般廠商提供的血清為無菌,無需再過濾除菌,如發(fā)現血清有懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)液內一起過濾,切勿直接過濾血清。無錫不含外泌體血清哪里有賣