血清是由血漿去除纖維蛋白原而形成的一種很復(fù)雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血?jiǎng)游锏男詣e、年齡、生理?xiàng)l件和營養(yǎng)條件不同而異。血清是血漿中不含纖維蛋白原的膠狀液體,具有維持血液的正常粘度、酸堿度、滲透壓等作用。它主要由水和各種化學(xué)成分組成,這些化學(xué)成分包括白蛋白,α1、α2、β、γ-球蛋白,甘油三酯,總膽固醇,谷丙轉(zhuǎn)氨酶等。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長(zhǎng)因子、、無機(jī)物等,這些物質(zhì)對(duì)促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)或抑制生長(zhǎng)活性是達(dá)到生理平衡的。血清中的沉淀物、絮狀物:主要是血清中的脂蛋白變性及解凍后血清中纖維蛋白造成。紹興優(yōu)級(jí)胎牛血清供應(yīng)商
非正規(guī)胎牛血清的產(chǎn)品會(huì)存在很多的問題:疫區(qū)來源,無合格質(zhì)檢使胎牛血清存在生物學(xué)污染:支原體、噬菌體、病毒、原蟲等,會(huì)直接影響實(shí)驗(yàn)的結(jié)果和穩(wěn)定。工藝不規(guī)范,導(dǎo)致采集的原血放置時(shí)間過長(zhǎng)或操作不當(dāng)導(dǎo)致溶血,血液中血細(xì)胞裂解,血清顏色呈紅色或暗紅色,這樣的血清含有許多胞內(nèi)產(chǎn)物,里面很多物質(zhì)都會(huì)對(duì)細(xì)胞有刺激作用,影響實(shí)驗(yàn)的穩(wěn)定性和數(shù)據(jù)的真實(shí)性。血清批次不穩(wěn)定,添加來補(bǔ)?很多不法商販拿到低廉的疫區(qū)原料血清進(jìn)行加工生產(chǎn),為了保障血清的培養(yǎng)效果會(huì)對(duì)血清進(jìn)行處理,較為常見的是添加、轉(zhuǎn)鐵蛋白、BSA、生長(zhǎng)因子等,還有的會(huì)和新生牛血清、培養(yǎng)基等勾兌,更有甚者用的根本就不是牛血清,此類操作對(duì)所有生物學(xué)實(shí)驗(yàn)都有巨大的影響。紹興優(yōu)級(jí)胎牛血清供應(yīng)商胎牛血清常用于動(dòng)物細(xì)胞的體外培養(yǎng),具有極為重要的功能。
胎牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)重要的培養(yǎng)基且不可替代,它是采自5-8個(gè)月胎齡牛胚胎中的胎血。此時(shí)胎牛各臟器正處生長(zhǎng)分化階段,血中含有豐富的生長(zhǎng)發(fā)育因子,非常適合各種細(xì)胞的培養(yǎng)。因此,如何在使用過程中保護(hù)這些因子的活性,達(dá)到較為大的細(xì)胞培養(yǎng)效果,就需要正確地使用胎牛血清。正確地使用胎牛血清可分為以下四個(gè)方面:正確儲(chǔ)存,避免反復(fù)凍融:血清在-20°C凍存。血清避免反復(fù)凍融,以免降低因子活性。如一次用不完,應(yīng)進(jìn)行分裝。血清和培養(yǎng)基應(yīng)盡可能“現(xiàn)用現(xiàn)配”,配好的培養(yǎng)液,應(yīng)于一周內(nèi)用完。血清避免在4°C或更高溫度靜置過久,否則會(huì)破壞血清中有效活性成分,影響血清品質(zhì)。
國際上流行的【血清融化三步法】可較為大限度地保存血清中因子的活性,不會(huì)產(chǎn)生沉淀,同時(shí)能縮短血清融化時(shí)間。關(guān)于胎牛血清的滅活:真正的胎牛血清因?yàn)樘ヅ]有形成有效補(bǔ)體,如果針對(duì)補(bǔ)體滅活的話,就不需要。其他情況根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)來決定。胎牛血清的濃度:胎牛血清通常是以2%~20%的比例加到基礎(chǔ)培養(yǎng)基中,混合后配成完全培養(yǎng)基。曾有文獻(xiàn)報(bào)道,不同胎牛血清濃度對(duì)細(xì)胞存在一定的影響,尤其是干細(xì)胞和原代細(xì)胞。具體很好濃度需要用戶根據(jù)自己的實(shí)驗(yàn)來確定,以既保證培養(yǎng)的效果,又避免血清的浪費(fèi)。經(jīng)過熱處理過的血清,沉淀物的形成會(huì)明顯增多。
多數(shù)細(xì)胞培養(yǎng)中血清的熱滅活并不是必要的。很多場(chǎng)合下,熱滅活并不會(huì)改善細(xì)胞的生長(zhǎng),卻降低了支持細(xì)胞生長(zhǎng)的能力。即使在少數(shù)有促進(jìn)的情況下,其促進(jìn)的比率也是微不足道的。另外,血清的熱滅活導(dǎo)致的沉淀常常被認(rèn)為是微生物的污染,從而給用戶和供應(yīng)商都帶來不必要的麻煩。所以胎牛血清不推薦熱滅活。熱滅活一般是指在做免疫相關(guān)的試驗(yàn)中,通過加熱滅活掉血清中的補(bǔ)體,以避免對(duì)免疫試驗(yàn)的影響。在胎牛血清中,由于胎齡原因,尚未形成完整的補(bǔ)體系統(tǒng),因此,胎牛血清不會(huì)真正干預(yù)免疫試驗(yàn)。故不需滅活。并且,熱滅活反而可能導(dǎo)致胎牛血清中部分重要的生長(zhǎng)因子的活性衰減,進(jìn)而影響細(xì)胞培養(yǎng)效果。胎牛血清的牛腹瀉病毒:陰性;大腸桿菌噬菌體:陰性。寧波賽業(yè)胎牛血清供應(yīng)商
牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量較為大的天然培養(yǎng)基,含有豐富的細(xì)胞生長(zhǎng)必須的營養(yǎng)成份。紹興優(yōu)級(jí)胎牛血清供應(yīng)商
胎牛血清:八月齡胎牛心臟穿刺取血;新生牛血清:出生12-24小時(shí)新生牛靜脈;又可細(xì)分為:a.高級(jí)新生牛血清:后靜置自然析出的血清;b.標(biāo)準(zhǔn)新生牛血清:c.經(jīng)離心分離的血清;d.普通新生牛血清:融血或微融血的血清;小牛血清:出生三月齡小牛動(dòng)脈分離血清;血清是血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血?jiǎng)游锏男詣e、年齡、生理?xiàng)l件和營養(yǎng)條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長(zhǎng)因子、、無機(jī)物等,這些物質(zhì)對(duì)促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)或抑制生長(zhǎng)活性是達(dá)到生理平衡的。對(duì)血清的成分和作用的研究雖有很大進(jìn)展,但仍存在一些問題。胎牛血清是品質(zhì)較為高的,因?yàn)樘ヅ_€未接觸外界,血清中所含的抗體、補(bǔ)體等對(duì)細(xì)胞有害的成分較為少。紹興優(yōu)級(jí)胎牛血清供應(yīng)商