胎牛血清作為動物細胞培養(yǎng)基中的關鍵組分之一,在動物細胞培養(yǎng)中占據(jù)重要地位。胎牛血清是在封閉的屠宰機構(gòu)對未發(fā)育完全的胎牛的心臟穿刺取血而獲取的牛血清制品,牛血清制品隨著取血對象的年齡變化可分為胎牛血清,新生牛血清以及(成年)牛血清,血清的成分及含量會隨年齡變化。而胎牛血清由于血清采集時間早,其胎球蛋白較多,并富含多種生長因子。同時,由于未接觸外界環(huán)境,胎牛血清所含的內(nèi)有毒的、補體等細胞有害成分和抗體水平均是較低的。因此,胎牛血清從細胞培養(yǎng)的效果來看是較為很好的牛血清制品,在細胞培養(yǎng)的應用較為較廣。血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養(yǎng)條件不同而異。南京優(yōu)等胎牛血清哪家好
多數(shù)細胞培養(yǎng)中血清的熱滅活并不是必要的。很多場合下,熱滅活并不會改善細胞的生長,卻降低了支持細胞生長的能力。即使在少數(shù)有促進的情況下,其促進的比率也是微不足道的。另外,血清的熱滅活導致的沉淀常常被認為是微生物的污染,從而給用戶和供應商都帶來不必要的麻煩。所以胎牛血清不推薦熱滅活。熱滅活一般是指在做免疫相關的試驗中,通過加熱滅活掉血清中的補體,以避免對免疫試驗的影響。在胎牛血清中,由于胎齡原因,尚未形成完整的補體系統(tǒng),因此,胎牛血清不會真正干預免疫試驗。故不需滅活。并且,熱滅活反而可能導致胎牛血清中部分重要的生長因子的活性衰減,進而影響細胞培養(yǎng)效果。湖州標準血清價格熱滅活:一般是以56℃,30分鐘來處理已解凍的血清,因為此加熱步驟,可以使補體去活化。
可能你會覺得,你從一些渠道購買的大品牌的血清,價格便宜,細胞養(yǎng)的還挺好。所以也不在乎。因為你的細胞不是你想象的那么難養(yǎng),有些假血清也確實可以養(yǎng),但是質(zhì)量,穩(wěn)定性確實不一樣,批間差異大,甚至同一批的血清都不穩(wěn)定,直接影響到你的實驗結(jié)果的可重復性和數(shù)據(jù)的真實性。之前爆出某品牌在血清大量添加細胞因子和生長因子,細胞瘋長,就是一做細胞功能性實驗,結(jié)果慘不忍睹。目前品牌已經(jīng)被美國所取締,但這種情況在國內(nèi)時有發(fā)生。至于其他如進口血清和國產(chǎn)血清1:1的比兌啦,血清和培養(yǎng)基混合啦,花樣多的要命。大家小心上當!總之,買血清,要求高的直接找大品牌的公司或是正規(guī)代理商,要求不是特別高的,可以找一些小品牌的廠家和代理,千萬別買偽的血清,因為價格便宜,質(zhì)量又好又穩(wěn)定,還是子的可能性太低了!
較為低血清試驗的要求。內(nèi)有毒的檢測:內(nèi)有毒的,又叫脂多糖(LPS)或脂寡糖(LOS),存在于革蘭氏陰性菌的細胞外膜。臨床上,內(nèi)有毒的作為一些革蘭氏陰性菌的診斷提示,如腦膜炎球菌。動物體內(nèi),內(nèi)有毒的能夠?qū)е掳l(fā)熱或者誘導炎癥反應;細胞培養(yǎng)中,內(nèi)有毒的能夠誘導細胞反應異常。通常,采用鱟阿米巴樣細胞裂解實驗(LAL檢測)檢測內(nèi)有毒的水平。LAL是從美洲鱟的血液中制備的,對內(nèi)有毒的非常靈敏,在微量內(nèi)有毒的存在情況下就凝結(jié)。阿米巴樣細胞相當于哺乳動物的白細胞。特異性血清及其加工方式,熱鈍化:胎牛血清的常規(guī)處理方式是熱鈍化,即放在56°水浴30分鐘;其目的是使血清中的補體成分及一些未知的細胞生長抑制分子失活。與胎牛血清的其它加工方式一樣,熱鈍化處理過程必須小心謹慎,因為血清中的生長因子容易在較高溫度或者較長時間加熱條件下失活,甚至產(chǎn)生沉淀。胎牛血清提供對維持細胞指數(shù)生長的,基礎培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,以及主要的低分子營養(yǎng)物。
除了對血清進行檢測,有何更直觀的方式分辨血清質(zhì)量?目測法,我們可根據(jù)血清的顏色,沉淀,澄清度等進行區(qū)分。顏色:顏色根據(jù)血清蛋白含量的不同,可表現(xiàn)出黃色或者紅色。進口血清質(zhì)量較為好的呈現(xiàn)出淡黃、微紅色,較差質(zhì)量呈現(xiàn)出橘紅色或鮮紅色。熱滅清或保存不當?shù)模捎谘t蛋白的破壞氧化,會呈現(xiàn)出暗紅色,甚至咖啡色。沉淀:血清中的沉淀主要是有纖維蛋白的凝聚產(chǎn)生。沉淀產(chǎn)生的原因很多,使用時反復凍融會增加沉淀。進口血清過濾分裝前很少反復凍融,因此成品清澈。澄清度:進口血清是由于蛋白和脂類等物質(zhì)含量低,表現(xiàn)為稀薄、清淡。國產(chǎn)血清絕大多數(shù)為新生牛血清,相對而言更加粘稠,顏色略深。胎牛血清是一種性狀、外觀 淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體。揚州細胞培養(yǎng)用胎牛血清哪家好
血清在溶解過程中必須規(guī)則地搖晃均勻。南京優(yōu)等胎牛血清哪家好
很好的胎牛血清:免疫球蛋白,國產(chǎn)血清的只是定性檢測,結(jié)果也很不準確,進口胎牛血清大多定量檢測。免疫球蛋白的數(shù)值能完全體現(xiàn)出的時的牛齡情況,國產(chǎn)血清,基本都是新生牛的,血清中容易產(chǎn)生IgM,IgG的含量也偏高,進口胎牛血清,不含IgM,IgG的含量也較低。含量,此外,的使用也是要考慮在內(nèi)的。國內(nèi)外的血清,都不對進行測試(無四環(huán)素胎牛血消除外)。其中,由于國外使用較為嚴格,用量有限,同時每頭奶牛的產(chǎn)品包括血清都可以追溯源頭,所以國外胎牛血清不含或者含量極低。但是國內(nèi)由于使用普遍,血清中殘留量很高,導致國產(chǎn)血清質(zhì)量很差,不利于細胞培養(yǎng)。南京優(yōu)等胎牛血清哪家好