胎牛血清的處理方法主要有以下幾種:1.活性炭處理,活性炭可以與親脂性分子結(jié)合,因此已用于從FBS中去除Hormone,例如雄雌二醇、孕酮、皮質(zhì)醇、睪酮、三碘甲狀腺原氨酸(T3)和甲狀腺素(T4)。這些血清脂質(zhì)Hormone傾向于干擾免疫測定系統(tǒng)和胰島素測定方法。2.透析,透析可以從FBS中去除所有分子量小于10,000MW的分子。這包括極性和非極性分子。去除細胞因子、葡萄糖、氨基酸和許多其他物質(zhì)。透析還可以去除FBS中的Antibiotic和其他外源性分子。胎牛血清提供對維持細胞指數(shù)生長的Hormone。衢州OriCell血清廠家
胎牛血清的生產(chǎn)工藝:透析胎牛血清,顧名思義,需經(jīng)過透析。它是在4°C下用特定的透析膜對血清在0.15MNaCl中透析。由于該透析膜只允許10kDa以下的小分子穿過,在滲透壓的作用下,這些小分子便從血清中滲析到透析膜外的NaCl溶液中。10kDa以下的小分子有化學(xué)小分子、核苷酸、某些鹽、低分子量蛋白質(zhì)、氨基酸、細胞因子、葡萄糖、殘留Antibiotic和其他外源分子。那么透析的效果如何?以及透析到何時呢?由于不可能監(jiān)測全部小分子,因此常選用葡萄糖為體現(xiàn)。血清中葡萄糖<5mg/dL,即可以停止透析了。透析過程中,除監(jiān)測葡萄糖濃度外(可采用葡萄糖氧化酶方法測定),還需仔細監(jiān)測pH值和滲透壓。衢州OriCell血清廠家胎牛血清在存儲的時候要在零下濕度的溫度下進行保存。
血清中絮狀沉淀,它們是什么,怎么處理?1.將冷凍保存的血清取出后,置4℃冰箱靜止過夜;2.待血清融化后,上下顛倒,輕輕混勻,繼續(xù)4℃2-3小時;3.輕輕吸取上層血清,分裝,余底下50ml左右;4.低速離心5分鐘,去掉沉淀。若解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn),該怎么處理?胎牛血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多種原因,但較普遍的原因是由于胎牛血清中脂蛋白的變性所造成,而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在胎牛血清解凍后,也會存在于胎牛血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之一。但這些絮狀沉淀物,并不影響胎牛血清本身的質(zhì)量。若欲去除這些絮狀沉淀物,可以將胎牛血清分裝至無菌離心管內(nèi),以400g稍微離心,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾。我們不建議您以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,因為它可能會阻塞您的過濾膜。
胎牛血清的處理方法有:熱滅活,F(xiàn)BS的常見處理方法是熱滅活,其中將FBS在56°C的水浴中加熱30分鐘,偶爾搖晃。目的是滅活FBS中存在的補體系統(tǒng)的任何成分,以及其他潛在的未知細胞生長抑制劑。以前熱滅活也是為了去除支原體污染,這不再是一個問題,因為現(xiàn)在所有的血清產(chǎn)品都通過小到足以去除支原體的孔徑進行過濾。必須注意的是,熱滅活也可能產(chǎn)生不良影響,例如降低培養(yǎng)細胞附著在表面上的能力。熱滅活過程必須小心進行,因為溫度過高或長時間加熱會使生長因子失活,并產(chǎn)生沉淀物。胎牛血清在細胞培養(yǎng)方面通常優(yōu)于其他類型的血清。
胎牛血清-血清的主要成分:血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養(yǎng)條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、無機物等,這些物質(zhì)對促進細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的。胎牛血清在存儲的時候要在零下濕度的溫度下進行保存,并且需要避免陽光的照射,需要用恒溫冰箱來進行保存。胎牛血清含有多種對細胞生長必需的營養(yǎng)因子及大分子物質(zhì)。連云港OriCell血清報價
透析胎牛血清主要用于可能需要關(guān)注小分子濃度的特殊研究。衢州OriCell血清廠家
胎牛血清的功能:胎牛血清是細胞培養(yǎng)中用量較大的天然培養(yǎng)基,含有豐富的細胞生長必須的營養(yǎng)成份,常用于動物細胞的體外培養(yǎng),具有極為重要的功能。1.提供對維持細胞指數(shù)生長的Hormone,基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,以及主要的低分子營養(yǎng)物。2.提供結(jié)合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他Hormone等,能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。3.有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,起到釋放毒性作用。4.是細胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來源。5.起酸堿度緩沖液作用。6.提供蛋白酶抑制劑,使在細胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活,保護細胞不受傷害。衢州OriCell血清廠家
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