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抗原通常是由多個抗原決定簇組成的,由一種抗原決定簇刺激機體,由一個B淋巴細胞接受該抗原刺激所產(chǎn)生的抗體稱之為單克隆抗體(MonoclonalAntibody)。由多種抗原決定簇刺激機體,相應(yīng)地就產(chǎn)生各種各樣的單克隆抗體,這些單克隆抗體混雜在一起就是多克隆抗體,機體內(nèi)所產(chǎn)生的抗體就是多克隆抗體;除了抗原決定簇的多樣性以外,同樣一種抗原決定簇,也可刺激機體產(chǎn)生IgG、IgM、IgA、IgE和IgD等五類抗體。抗原刺激機體,產(chǎn)生免疫學(xué)反應(yīng),由機體的漿細胞合成并分泌的與抗原有特異性結(jié)合能力的一組球蛋白,這就是免疫球蛋白,這種與抗原有特異性結(jié)合能力的免疫球蛋白就是抗體??贵w療法是一種利用人工合成的抗體來調(diào)理疾病的新興療法。杭州異種抗體研發(fā)團隊
多克隆抗體免疫動物:免疫劑量與注射途徑有關(guān),一般而言,靜脈注射劑量大于皮下注射,而皮下注射又比掌內(nèi)和跖內(nèi)皮下注射劑量大,也可采用淋巴結(jié)內(nèi)注射法。加佐劑比不加佐劑的注射劑量要小,對家兔而言,采用弗氏完全佐劑,則需注射 0.5mg~1mg/kg./次,如采用弗氏不完全佐劑則注射劑量應(yīng)大10 倍以上。如要制備高度特異性的抗血清,可選用低劑量抗原短程免疫法。如需要獲得高效價的抗血清,宜采用大劑量長程免疫法。免疫周期長者,可少量多次。免疫周期短者,應(yīng)大量少次。 兩次注射的間隔時間應(yīng)長短適宜,太短起不到再次反應(yīng)的效果太長則失去了前一次激發(fā)的敏感作用。一般間隔時間應(yīng)為 5~7 天,加佐劑者應(yīng)為 2 周左右。 注射的 Ig 純度高,則一般不易引起過敏反應(yīng),如注射血清,即使是少量,在再次免疫時,極易引起過敏反應(yīng),所以一定要采取措施。上海Prestige Antibodies抗體研發(fā)制造抗體在疫苗接種后的產(chǎn)生是一種主動免疫應(yīng)答,提供長期的保護作用。
抗體特性和功能:IgG于出生后3個月開始合成,3~5歲接近成人水平。IgG是血清和體液中含量很高的抗體,占血清總Ig的75%~80%。人lgG有4個亞類,根據(jù)其在血清中濃度的高低排序,分別為IgG1、IgG2、IgG3、IgG4。IgG的半衰期為20~23天,是再次免疫應(yīng)答產(chǎn)生的主要抗體,其親和力高,在體內(nèi)分布普遍,具有重要的免疫效應(yīng),是機體抗傳染的“主力軍”。IgG1、IgG2和IgG3可以穿過胎盤屏障,在新生兒抗傳染免疫中起重要作用。IgG1、lgG2和IgG3能通過經(jīng)典途徑活化補體,并可與巨噬細胞、NK細胞表面Fc受體結(jié)合,發(fā)揮調(diào)理作用、ADCC作用等;人IgGl、IgG2和IgG4可通過其Fc段與葡萄球菌蛋白A(SPA)結(jié)合,借此可純化抗體,并用于免疫診斷。某些自身抗體如抗甲狀腺球蛋白抗體、抗核抗體,以及引起Ⅱ、Ⅲ型超敏反應(yīng)的抗體也屬于IgG。
多克隆抗體乳化作用:根據(jù)抗原的性質(zhì)、免疫原性和動物的免疫反應(yīng)性來決定免疫途徑、免疫次數(shù)和間隔時間等。 免疫途徑包括皮下注射、皮內(nèi)注射、肌肉注射、靜脈注射、腹腔注射以及淋巴結(jié)內(nèi)注射等??乖可?,則一般多采用加佐劑,淋巴結(jié)內(nèi)或淋巴結(jié)周圍、或足掌、或皮內(nèi)、皮下多點注射,如抗原量多,則可采用皮下、肌肉、以至靜脈注射。 注射間隔時間 帶佐劑的皮內(nèi)、皮下注射,一般為間隔 2~4 周免疫一次。不帶佐劑的皮下或肌肉注射,一般為 1~2 周間隔時間;肌肉或靜脈免疫的,可 5 天左右的間隔時間。 可以把各種注射途徑聯(lián)合起來應(yīng)用,然后以達到效價要求為目的??贵w對于病毒傳染的控制尤為重要,如針對HIV的中和抗體研究具有重要意義。
抗體的多樣性:人血清中的抗體多種多樣,B淋巴細胞可產(chǎn)生的抗體種類在108以上,可與眾多不同抗原發(fā)生特異性結(jié)合。抗體多樣性的原因主要有兩方面:1.外源性因素環(huán)境中抗原種類甚多,每種大分子抗原又有多種抗原表位,每種抗原表位均可選擇啟動體內(nèi)一個B細胞克隆,產(chǎn)生一種特異性抗體。2.內(nèi)源性因素抗體多樣性的另一個原因是由基因的結(jié)構(gòu)及功能特征所決定的。編碼人Ig重鏈及κ、λ型輕鏈的基因分別位于第14、2、22號染色體上。其中編碼Ig重鏈的基因包括編碼可變區(qū)的V、D、J及編碼恒定區(qū)的C基因;編碼Ig輕鏈的基因包括編碼可變區(qū)的V、J及編碼恒定區(qū)的C基因??贵w可以區(qū)分自身抗原和外來抗原,避免免疫系統(tǒng)攻擊自身組織。湖北免疫抗體補給公司
抗體的生產(chǎn)通常需要利用動物模型或體外細胞培養(yǎng)技術(shù)。杭州異種抗體研發(fā)團隊
多克隆抗體乳化作用:將抗原與佐劑混合的過程稱為乳化。乳化的方法很多,可采用研缽乳化;可直接在旋渦振蕩器上乳化;可用組織搗碎器乳化。少量時,特別是弗氏佐劑與抗原乳化時,常采用注射器乳化,用兩個注射器,一個吸入抗原液,一個吸入佐劑,兩注射器頭以膠管連接,注意一定扎緊,然后來回抽吸。當(dāng)大量乳化時,可采用膠體磨進行。乳化好的標(biāo)志是取一滴乳化劑滴入水中呈現(xiàn)球形而不分散。如出現(xiàn)平展擴散即為未乳化好。乳化過的物質(zhì)放置一段時間(在保存期內(nèi))出現(xiàn)油水分層也是未乳化好的表現(xiàn)。 杭州異種抗體研發(fā)團隊
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