多克隆抗體是由異源抗原(大分子抗原、半抗原偶聯(lián)物)刺激機體產(chǎn)生免疫反應(yīng),有機體漿細(xì)胞分泌的一組免疫球蛋白。多克隆抗體由于其可識別多個抗原表位、可引起沉淀反應(yīng),制備時間短,成本低的原因廣泛應(yīng)用于研究和診斷方面。可以作為抗原的物質(zhì)有很多種,一般的科研實驗中,經(jīng)常使用的抗原有:偶聯(lián)多肽、偶聯(lián)的小分子或化合物、天然或重組蛋白等等。對可溶性抗原而言,為了增強其免疫原性或改變免疫反應(yīng)的類型、節(jié)約抗原等目的,常采用加佐劑的方法以刺激機體產(chǎn)生較強的免疫應(yīng)答。抗體也可以通過與細(xì)胞表面的Fc受體結(jié)合,啟動免疫細(xì)胞,如巨噬細(xì)胞和NK細(xì)胞,增強病原體的去除。合肥異嗜性抗體價格
多克隆抗體抗血清凍存:抗血清收獲后,加 1/萬硫柳汞或 1/萬的疊氮鈉防腐,或加入等量的中性甘油,分裝小瓶,置-20℃以下的低溫保存,數(shù)月至數(shù)年內(nèi)抗體效價無明顯變化。注意避免反復(fù)凍融。也可將抗血清冷凍干燥后保存。多克隆抗體的制備一般包括以下幾個步驟:1、制備抗原。2、選擇實驗動物。3、動物免疫。4、試取血進(jìn)行測試,看看是否成功免疫。5、如果成功免疫,殺死實驗動物,采集全部血清。6、純化出抗體。7、鑒定抗體。包括純度以及特異性。具體操作與制備原理參見中國免疫學(xué)實驗網(wǎng)。北京單克隆抗體研發(fā)制造抗體是免疫系統(tǒng)產(chǎn)生的一種蛋白質(zhì),能夠識別并中和入侵機體的病原體。
抗體水解片段:在一定條件下,Ig分子肽鏈的某些部分易被蛋白酶水解為不同片段。木瓜蛋白酶(papain)和胃蛋白酶(pepsin)是很常用的兩種Ig蛋白水解酶,并可籍此研究Ig的結(jié)構(gòu)和功能,分離和純化特定的12多肽片段。抗體的功能與其結(jié)構(gòu)密切相關(guān)。同一抗體的V區(qū)和C區(qū)的氨基酸組成和順序的不同,決定了其功能上的差異。不同抗體的V區(qū)和C區(qū)在結(jié)構(gòu)變化上具有一定的規(guī)律,又使得其在功能上存在共性。V區(qū)和C區(qū)的組成和結(jié)構(gòu),決定了抗體的生物學(xué)功能。
隨后,經(jīng)1968年和1972年的世界衛(wèi)生組織和國際免疫學(xué)會聯(lián)合會討論決定,將具有抗體活性或化學(xué)結(jié)構(gòu)與抗體相似的球蛋白統(tǒng)一命名為免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)。Ig可分為分泌型Ig(secreted Ig,SIg)和膜型Ig(membrane Ig,mIg)。SIg主要存在于血液和組織液中,行使抗體的各種功能;mIg主要構(gòu)成B細(xì)胞膜表面的抗原受體?;窘Y(jié)構(gòu):經(jīng)x線晶體衍射結(jié)構(gòu)分析發(fā)現(xiàn),Ig由四條多肽鏈組成,各肽鏈之間由數(shù)量不等的鏈間二硫鍵連接。Ig可形成“Y”字型結(jié)構(gòu),稱為Ig單體,是構(gòu)成抗體的基本單位??贵w的結(jié)構(gòu)包括兩個重鏈和兩個輕鏈,形成Y形分子,每一個Y形分子具有兩個抗原結(jié)合位點。
1975年,Kohler和Milstein建立了單克隆抗體(monoclonai antibody,mAb)技術(shù),使規(guī)?;苽涓咛禺愋浴⒕|(zhì)性抗體成為可能。然而,鼠源性mAb在人體反復(fù)免疫后出現(xiàn)的人抗鼠抗體(human anti-mouseantibody,HAMA)很大程度上限制了mAb的臨床應(yīng)用。近年來,隨著分子生物學(xué)的發(fā)展,人們已經(jīng)可以通過抗體工程技術(shù)制備人一鼠嵌合抗體、人源化抗體或人源抗體。天然的抗原分子中常含有多種不同的抗原表位,以該抗原刺激機體的免疫系統(tǒng)可同時啟動多種B細(xì)胞克隆,產(chǎn)生的抗體中會含有多種針對不同抗原表位的抗體,因此稱之為多克隆抗體。抗體的親和力決定了其與抗原結(jié)合的強度,高親和力的抗體能更有效地中和病原體。杭州異種抗體怎么購買
抗體的產(chǎn)生主要由B細(xì)胞負(fù)責(zé),它們可以識別并生成特異性的抗體以應(yīng)對傳染。合肥異嗜性抗體價格
多克隆抗體免疫動物:抗原的免疫劑量是依照給予動物的種類、免疫周期以及所要求的抗體特性等不同而不同。劑量過低,不能引起足夠強的免疫刺激,免疫劑量過多,有可能引起免疫耐受。在一定的范圍內(nèi),抗體的效價是隨注射劑量的增加而增高。蛋白質(zhì)抗原的免疫劑量比多糖類抗原寬。一般而言,小鼠的初次免疫劑量為 50μg~400μg/次, 大鼠為100μg~1 000μg/次, 兔為 200μg~1 000μg/2次。加強劑量為初次劑量的 1/5~2/5。免疫劑量與注射途徑有關(guān),一般而言,靜脈注射劑量大于皮下注射,而皮下注射又比掌內(nèi)和跖內(nèi)皮下注射劑量大,也可采用淋巴結(jié)內(nèi)注射法。合肥異嗜性抗體價格
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