抗體基本結(jié)構(gòu):輕鏈分子量約為25 000,由214個(gè)氨基酸殘基構(gòu)成。輕鏈可分為兩種,分別為kappa(κ)鏈和lambda(λ)鏈。據(jù)此,可將Ig分為兩型(type),即κ型和λ型。一個(gè)Ig分子上兩條輕鏈的型別總是相同的。不同類Ig既存在κ型,也存在λ型。同一個(gè)體內(nèi)可同時(shí)存在κ型和λ型的Ig分子,不同種屬生物體內(nèi)兩型輕鏈的比例不同。正常人血清Ig的κ:λ約為2:1,而在小鼠則為20:1。Ig的κ與λ的比例異??梢苑从趁庖呦到y(tǒng)的異常。根據(jù)λ鏈恒定區(qū)個(gè)別氨基酸的差異,又可將λ鏈分為λ1、λ2、λ3和λ4四個(gè)亞型(subtype) 。抗體也參與到反應(yīng)中,在過(guò)敏性疾病中發(fā)揮重要作用。湖北單克隆抗體研發(fā)團(tuán)隊(duì)
抗體主要功能:?jiǎn)?dòng)補(bǔ)體產(chǎn)生攻膜復(fù)合物使細(xì)胞溶解破壞。人IgG1~3和IgM與相應(yīng)抗原結(jié)合后,可因構(gòu)象改變而使其CH2和CH3結(jié)構(gòu)域內(nèi)的補(bǔ)體結(jié)合點(diǎn)暴露,從而通過(guò)經(jīng)典途徑啟動(dòng)補(bǔ)體系統(tǒng),產(chǎn)生多種效應(yīng)功能,其中IgM、IgG1和IgG3啟動(dòng)補(bǔ)體系統(tǒng)的能力較強(qiáng),IgG2較弱。IgA、IgE和IgG4本身難以啟動(dòng)補(bǔ)體,但在形成聚合物后可通過(guò)旁路途徑啟動(dòng)補(bǔ)體系統(tǒng)。通常情況下,lgD不能啟動(dòng)補(bǔ)體。調(diào)理吞噬和ADCC。IgG可通過(guò)其Fc段與表面具有相應(yīng)受體的細(xì)胞結(jié)合,產(chǎn)生不同的生物學(xué)作用。湖北單克隆抗體研發(fā)團(tuán)隊(duì)中和抗體是一種能夠中和病毒入侵的抗體,對(duì)病毒傳染具有重要意義。
抗體特性和功能:IgA分為兩型:血清型為單體,主要存在于血清中,只占血清Ig總量的10%~15%;分泌型IgA(secretory IgA,SIgA)為二聚體,由J鏈連接,含內(nèi)皮細(xì)胞合成的分泌片,經(jīng)分泌性上皮細(xì)胞分泌至外分泌液中。SIgA合成和分泌的部位在腸道、呼吸道、乳腺、唾液腺和淚腺,因此主要存在于胃腸道和支氣管分泌液、初乳、唾液和淚液。SIgA是外分泌液中主要的抗體類別,參與黏膜局部免疫,通過(guò)與相應(yīng)病原微生物結(jié)合,阻止病原體黏附到細(xì)胞表面,在局部抗傳染中發(fā)揮重要作用。SIgA在黏膜表面也有中和有害素的作用。新生兒易患呼吸道、胃腸道傳染可能與IgA合成不足有關(guān)。嬰兒可從母親初乳中獲得SIgA,這是一種重要的自然被動(dòng)免疫過(guò)程。
多克隆抗體免疫動(dòng)物:免疫劑量與注射途徑有關(guān),一般而言,靜脈注射劑量大于皮下注射,而皮下注射又比掌內(nèi)和跖內(nèi)皮下注射劑量大,也可采用淋巴結(jié)內(nèi)注射法。加佐劑比不加佐劑的注射劑量要小,對(duì)家兔而言,采用弗氏完全佐劑,則需注射 0.5mg~1mg/kg./次,如采用弗氏不完全佐劑則注射劑量應(yīng)大10 倍以上。如要制備高度特異性的抗血清,可選用低劑量抗原短程免疫法。如需要獲得高效價(jià)的抗血清,宜采用大劑量長(zhǎng)程免疫法。免疫周期長(zhǎng)者,可少量多次。免疫周期短者,應(yīng)大量少次。 兩次注射的間隔時(shí)間應(yīng)長(zhǎng)短適宜,太短起不到再次反應(yīng)的效果太長(zhǎng)則失去了前一次激發(fā)的敏感作用。一般間隔時(shí)間應(yīng)為 5~7 天,加佐劑者應(yīng)為 2 周左右。 注射的 Ig 純度高,則一般不易引起過(guò)敏反應(yīng),如注射血清,即使是少量,在再次免疫時(shí),極易引起過(guò)敏反應(yīng),所以一定要采取措施。特異性抗體可以針對(duì)不同的病原體或細(xì)胞表面分子,提供精確的免疫保護(hù)。
多克隆抗體可以采用以下各種方法之一進(jìn)行免疫。淋巴結(jié)注射法:①在兔的兩后足跖部皮下(或皮內(nèi))注射活卡介苗 50mg(每側(cè)約0.30ml) 。7~10 天后,兔跖及腘肌淋巴結(jié)腫大;②于腫大的兩側(cè)淋巴結(jié)內(nèi)各注射加有完全佐劑的IgG 乳化抗原 0.50ml(含 IgG 5mg/ml、青霉素 1 000U/ml、鏈霉素 1 000μg/ml);③必要時(shí),14 天后,重復(fù)步驟②一次;④再過(guò) 7 天后,于兩側(cè)淋巴結(jié)內(nèi)各注射加有完全佐劑的 IgG 乳化抗原0.50ml(含IgG5mg/ml、青霉素 1 000U/ml、鏈霉素 1 000μg/ml) ;⑤5~7天后,耳靜脈采集血。測(cè)定血清效價(jià)??贵w的作用不僅限于中和病原體,還可以啟動(dòng)其他免疫細(xì)胞,如巨噬細(xì)胞和NK細(xì)胞,促進(jìn)病原體的去除。湖北Prestige抗體研發(fā)團(tuán)隊(duì)
抗體的多樣性來(lái)自于基因重排和突變,使其能夠識(shí)別各種不同的抗原。湖北單克隆抗體研發(fā)團(tuán)隊(duì)
抗體J鏈(joining chain)是一條富含半胱氨酸的多肽鏈,由漿細(xì)胞合成,其主要功能是將多個(gè)Ig單體連接為多聚體。2個(gè)IgA單體由J鏈相互連接形成二聚體,5個(gè)IgM單體由二硫鍵相互連接,并通過(guò)二硫鍵與J鏈連接形成五聚體。IgG、IgD和IgE常為單體,無(wú)J鏈。分泌片(secretory piece,SP)又稱為分泌成分(secretory component,SC),是分泌型IgA分子上的一個(gè)輔助成分,為一種含糖的肽鏈,由黏膜上皮細(xì)胞合成和分泌,以非共價(jià)形式結(jié)合于IgA二聚體上,使其成為分泌型IgA(SIgA),并一起被分泌到黏膜表面。分泌片能保護(hù)SIgA的鉸鏈區(qū)不被蛋白水解酶降解。湖北單克隆抗體研發(fā)團(tuán)隊(duì)
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