多克隆抗體主要從動物免疫血清、恢復(fù)期患者血清或免疫接種人群的血清中獲得。多克隆抗體的優(yōu)勢是:作用全方面,具有中和抗原、免疫調(diào)理、補體依賴的細胞毒作用(CDC)、ADCC等重要作用,而且來源普遍、制備簡單。其缺點是:特異性不高、易發(fā)生交叉反應(yīng),不易大量制備,因而限制了其應(yīng)用的范圍。單克隆抗體解決多克隆抗體特異性不高的理想方法是制備識別單一表位特異性的抗體。如果能獲得只針對單一表位的漿細胞克隆,并使其在體外擴增分泌抗體,就有可能獲得單一表位特異性的抗體。然而,漿細胞在體外的壽命較短,難以培養(yǎng)。為克服這一缺點,Kohler和Milstein將可產(chǎn)生特異性抗體但短壽的B細胞與不產(chǎn)生抗體但長壽的骨髓瘤細胞融合,獲得了可以產(chǎn)生單克隆抗體的雜交瘤細胞,從而建立了單克隆抗體制備技術(shù)??贵w工程可以通過改變抗體的結(jié)構(gòu)和特性來提高其療效和穩(wěn)定性。河南IgE抗體研發(fā)制造
抗體(antibody)是指機體由于抗原的刺激而產(chǎn)生的具有保護作用的蛋白質(zhì)。它(免疫球蛋白不只是抗體)是一種由漿細胞(效應(yīng)B細胞)分泌,被免疫系統(tǒng)用來鑒別與中和外來物質(zhì)如細菌、病毒等的大型Y形蛋白質(zhì),只被發(fā)現(xiàn)存在于脊椎動物的血液等體液中,及其B細胞的細胞膜表面。抗體能識別特定外來物的一個獨特特征,該外來目標(biāo)被稱為抗原??贵w是一類能與抗原特異性結(jié)合的免疫球蛋白??贵w按其反應(yīng)形式分為凝集素、沉降素、抗毒、溶解素、調(diào)理素、中和抗體、補體結(jié)合抗體等。杭州IgE抗體費用抗體的生產(chǎn)通常需要利用動物模型或體外細胞培養(yǎng)技術(shù)。
抗體鉸鏈區(qū):鉸鏈區(qū)(hinge region)位于CH1與CH2之間,富含脯氨酸,易伸展彎曲,從而改變抗原結(jié)合部位之間的距離,有利于抗體結(jié)合位于不同位置的抗原表位。鉸鏈區(qū)易被木瓜蛋白酶、胃蛋白酶等水解,產(chǎn)生不同的水解片段。不同類Ig的鉸鏈區(qū)不盡相同,例如人IgGl、IgG2、IgG4和IgA的鉸鏈區(qū)較短,IgG3和IgD的鉸鏈區(qū)較長,而IgM和IgE無鉸鏈區(qū)。J鏈和分泌片:Ig輕鏈和重鏈除上述基本結(jié)構(gòu)外,某些類別的Ig還含有其他輔助成分,如J鏈和分泌片 。
多克隆抗體可以采用以下各種方法之一進行免疫。皮下多點注射法:①家兔兩側(cè)掌(跖內(nèi)各注射含有完全佐劑抗原 0.10ml(IgG 含量5mg/ml) ;②7~10 天后,脊柱兩側(cè)多點(頸、胸、腰椎各兩點、共 6 點)皮下注射含不完全佐劑5的抗原,每點 0.50ml;③7~10 天后,脊柱兩側(cè)重復(fù)注射一次;④7~10 天后試血。不合格者重復(fù)步驟③。多途徑聯(lián)合注射法:①兩側(cè)掌(跖)內(nèi)側(cè)皮下注射含完全佐劑抗原 0.50ml(IgG 量為 5mg/ml) ;②14 天后,多點皮下注射含有不完全佐劑抗原;③7 天后,耳靜脈注射不含佐劑的抗原 2ml;④測定血清抗體效價,不合格者重復(fù)步驟③,并適當(dāng)遞增 IgG 量??贵w是一類能與抗原特異性結(jié)合的免疫球蛋白。
抗體的多樣性:人血清中的抗體多種多樣,B淋巴細胞可產(chǎn)生的抗體種類在108以上,可與眾多不同抗原發(fā)生特異性結(jié)合。每種基因片段是以多拷貝的形式存在,其中編碼重鏈V區(qū)的VH、DH和JH的基因片段數(shù)分別為50、23和6個;編碼K輕鏈V區(qū)的Vx和JK基因片段數(shù)分別為60和5個,編碼入輕鏈V區(qū)的VX和J入基因片段數(shù)分別為30和7個。這些基因在胚系階段以分隔的形式存在。在B細胞的分化發(fā)育過程中,這些基因片段發(fā)生重排和組合,從而產(chǎn)生數(shù)量巨大、能識別特異性抗原的BCR。每種具有特異性BCR的B細胞克隆可識別相應(yīng)的抗原,產(chǎn)生一種特異性抗體。Ig基因重組是B細胞合成無數(shù)特異性抗體的主要原因??贵w在疫苗接種后的產(chǎn)生是一種主動免疫應(yīng)答,提供長期的保護作用。河南IgE抗體研發(fā)制造
抗體也可以通過血液透析、免疫球蛋白輸注等方式進行passively transfer。河南IgE抗體研發(fā)制造
抗體主要功能:啟動補體產(chǎn)生攻膜復(fù)合物使細胞溶解破壞。人IgG1~3和IgM與相應(yīng)抗原結(jié)合后,可因構(gòu)象改變而使其CH2和CH3結(jié)構(gòu)域內(nèi)的補體結(jié)合點暴露,從而通過經(jīng)典途徑啟動補體系統(tǒng),產(chǎn)生多種效應(yīng)功能,其中IgM、IgG1和IgG3啟動補體系統(tǒng)的能力較強,IgG2較弱。IgA、IgE和IgG4本身難以啟動補體,但在形成聚合物后可通過旁路途徑啟動補體系統(tǒng)。通常情況下,lgD不能啟動補體。調(diào)理吞噬和ADCC。IgG可通過其Fc段與表面具有相應(yīng)受體的細胞結(jié)合,產(chǎn)生不同的生物學(xué)作用。河南IgE抗體研發(fā)制造
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