多克隆抗體特異性鑒定:抗體的特異性鑒定 抗體的特異性是指與相應(yīng)抗原或近似抗原物質(zhì)的識別能力??贵w的特異性高,它的識別能力就強(qiáng)。衡量特異性通常以交叉反應(yīng)率來表示。交叉反應(yīng)率可用競爭抑制試驗(yàn)測定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競爭抑制曲線,計(jì)算各自的結(jié)合率,求出各自在 IC50時(shí)的濃度,并按下列公式計(jì)算交叉反應(yīng)率。 如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,而一些近似抗原物質(zhì)的IC50濃度幾乎是無窮大時(shí),表示 這一抗血清與其他抗原物質(zhì)的交叉反應(yīng)率近似為 0,即該血清的特異性較好。抗體可以幫助身體識別和摧毀病毒、細(xì)菌等病原體。上海富含脯氨酸11抗體
抗體可變區(qū)和恒定區(qū):可變區(qū) 重鏈和輕鏈的V區(qū)分別稱為VH和VL。VH和VL中各含有3個(gè)氨基酸組成和排列順序高度可變的區(qū)域,稱為高變區(qū)(hypervariable region,HVR)或互補(bǔ)決定區(qū)(complementarity determining region,CDR), 包括HVR1(CDR1)、HVR2(CDR2)和HVR3(CDR3),其中,HVR3(CDR3)變化程度更高。VH的3個(gè)高變區(qū)分別位于29~31、49~58和95~102位氨基酸,而VL的3個(gè)高變區(qū)分別位于28~35、49~56和91~98位氨基酸。VH和VL的3個(gè)CDR共同組成Ig的抗原結(jié)合部位(antigen-binding site),決定抗體的特異性,是抗體識別及結(jié)合抗原的部位。在V區(qū)中,CDR之外區(qū)域的氨基酸組成和排列順序相對保守,稱為骨架區(qū)(framework region,F(xiàn)R)。VH或VL各有四個(gè)骨架區(qū),分別用FR1、FR2、FR3和FR4表示。江蘇免疫抗體供應(yīng)商特異性抗體可以針對不同的病原體或細(xì)胞表面分子,提供精確的免疫保護(hù)。
抗體特性和功能:IgE。IgE是正常人血清中含量很少的Ig,血清濃度極低,約為5×10-5mg/ml。IgE主要由黏膜下淋巴組織中的漿細(xì)胞分泌。其重要特征為糖含量較高。IgE為親細(xì)胞抗體,其CH2和CH3結(jié)構(gòu)域可與肥大細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞上的IgE高親和力Fc受體結(jié)合,引起I型超敏反應(yīng)。此外,IgE與機(jī)體的抗寄生蟲免疫相關(guān)??贵w獨(dú)特的生物學(xué)活性使其在疾病的診斷、免疫防治及基礎(chǔ)研究中發(fā)揮作重要作用。早在19世紀(jì)后期,人們就開始使用特異性抗原免疫動(dòng)物制備相應(yīng)的抗血清。
抗體的多樣性:人血清中的抗體多種多樣,B淋巴細(xì)胞可產(chǎn)生的抗體種類在108以上,可與眾多不同抗原發(fā)生特異性結(jié)合。每種基因片段是以多拷貝的形式存在,其中編碼重鏈V區(qū)的VH、DH和JH的基因片段數(shù)分別為50、23和6個(gè);編碼K輕鏈V區(qū)的Vx和JK基因片段數(shù)分別為60和5個(gè),編碼入輕鏈V區(qū)的VX和J入基因片段數(shù)分別為30和7個(gè)。這些基因在胚系階段以分隔的形式存在。在B細(xì)胞的分化發(fā)育過程中,這些基因片段發(fā)生重排和組合,從而產(chǎn)生數(shù)量巨大、能識別特異性抗原的BCR。每種具有特異性BCR的B細(xì)胞克隆可識別相應(yīng)的抗原,產(chǎn)生一種特異性抗體。Ig基因重組是B細(xì)胞合成無數(shù)特異性抗體的主要原因??贵w的保護(hù)作用并非完全,某些病原體可能會發(fā)展出逃逸機(jī)制,繞過抗體的防御。
抗體特性和功能:IgG于出生后3個(gè)月開始合成,3~5歲接近成人水平。IgG是血清和體液中含量很高的抗體,占血清總Ig的75%~80%。人lgG有4個(gè)亞類,根據(jù)其在血清中濃度的高低排序,分別為IgG1、IgG2、IgG3、IgG4。IgG的半衰期為20~23天,是再次免疫應(yīng)答產(chǎn)生的主要抗體,其親和力高,在體內(nèi)分布普遍,具有重要的免疫效應(yīng),是機(jī)體抗傳染的“主力軍”。IgG1、IgG2和IgG3可以穿過胎盤屏障,在新生兒抗傳染免疫中起重要作用。IgG1、lgG2和IgG3能通過經(jīng)典途徑活化補(bǔ)體,并可與巨噬細(xì)胞、NK細(xì)胞表面Fc受體結(jié)合,發(fā)揮調(diào)理作用、ADCC作用等;人IgGl、IgG2和IgG4可通過其Fc段與葡萄球菌蛋白A(SPA)結(jié)合,借此可純化抗體,并用于免疫診斷。某些自身抗體如抗甲狀腺球蛋白抗體、抗核抗體,以及引起Ⅱ、Ⅲ型超敏反應(yīng)的抗體也屬于IgG??贵w也參與到反應(yīng)中,在過敏性疾病中發(fā)揮重要作用。廣東同種抗體基因
抗體療法是一種利用人工合成的抗體來調(diào)理疾病的新興療法。上海富含脯氨酸11抗體
抗體特性和功能:IgD正常人血清lgD濃度很低,儀占血清Ig總量的0.2%。IgD可在個(gè)體發(fā)育的任何時(shí)間產(chǎn)生。5類lg中,IgD的鉸鏈區(qū)很長,易被蛋白酶水解,故其半衰期很短(只3天)。lgD分為兩型:血清型IgD的生物學(xué)功能尚不清楚;膜結(jié)合型IgD(mlgD)構(gòu)成BCR,是B細(xì)胞分化發(fā)育成熟的標(biāo)志,未成熟B細(xì)胞只表達(dá)mlgM,成熟B細(xì)胞可同時(shí)表達(dá)mlgM和mIgD,稱為初始B細(xì)胞(naive B cell)?;罨腂細(xì)胞或記憶性B細(xì)胞表面的mlgD會逐漸消失。IgE是正常人血清中含量很少的Ig,血清濃度極低,約為5×10-5mg/ml。上海富含脯氨酸11抗體