多克隆抗體乳化作用:根據(jù)抗原的性質(zhì)、免疫原性和動(dòng)物的免疫反應(yīng)性來決定免疫途徑、免疫次數(shù)和間隔時(shí)間等。 免疫途徑包括皮下注射、皮內(nèi)注射、肌肉注射、靜脈注射、腹腔注射以及淋巴結(jié)內(nèi)注射等。抗原量少,則一般多采用加佐劑,淋巴結(jié)內(nèi)或淋巴結(jié)周圍、或足掌、或皮內(nèi)、皮下多點(diǎn)注射,如抗原量多,則可采用皮下、肌肉、以至靜脈注射。 注射間隔時(shí)間 帶佐劑的皮內(nèi)、皮下注射,一般為間隔 2~4 周免疫一次。不帶佐劑的皮下或肌肉注射,一般為 1~2 周間隔時(shí)間;肌肉或靜脈免疫的,可 5 天左右的間隔時(shí)間。 可以把各種注射途徑聯(lián)合起來應(yīng)用,然后以達(dá)到效價(jià)要求為目的??贵w的結(jié)構(gòu)包括兩個(gè)重鏈和兩個(gè)輕鏈,形成Y形分子,每一個(gè)Y形分子具有兩個(gè)抗原結(jié)合位點(diǎn)。浙江PRR11多克隆抗體公司排行
抗體基本結(jié)構(gòu):輕鏈分子量約為25 000,由214個(gè)氨基酸殘基構(gòu)成。輕鏈可分為兩種,分別為kappa(κ)鏈和lambda(λ)鏈。據(jù)此,可將Ig分為兩型(type),即κ型和λ型。一個(gè)Ig分子上兩條輕鏈的型別總是相同的。不同類Ig既存在κ型,也存在λ型。同一個(gè)體內(nèi)可同時(shí)存在κ型和λ型的Ig分子,不同種屬生物體內(nèi)兩型輕鏈的比例不同。正常人血清Ig的κ:λ約為2:1,而在小鼠則為20:1。Ig的κ與λ的比例異??梢苑从趁庖呦到y(tǒng)的異常。根據(jù)λ鏈恒定區(qū)個(gè)別氨基酸的差異,又可將λ鏈分為λ1、λ2、λ3和λ4四個(gè)亞型(subtype) 。蘇州Prestige Antibodies抗體供應(yīng)商抗體介導(dǎo)的細(xì)胞毒性可以直接殺傷傳染的細(xì)胞,起到去除病原體的作用。
多克隆抗體抗血清凍存:抗血清收獲后,加 1/萬硫柳汞或 1/萬的疊氮鈉防腐,或加入等量的中性甘油,分裝小瓶,置-20℃以下的低溫保存,數(shù)月至數(shù)年內(nèi)抗體效價(jià)無明顯變化。注意避免反復(fù)凍融。也可將抗血清冷凍干燥后保存。多克隆抗體的制備一般包括以下幾個(gè)步驟:1、制備抗原。2、選擇實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。3、動(dòng)物免疫。4、試取血進(jìn)行測試,看看是否成功免疫。5、如果成功免疫,殺死實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,采集全部血清。6、純化出抗體。7、鑒定抗體。包括純度以及特異性。具體操作與制備原理參見中國免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)網(wǎng)。
抗體基本結(jié)構(gòu):天然Ig分子含有四條異源性多肽鏈,其中,分子量較大的兩條鏈稱為重鏈(heavy chain,H),而分子量較小的兩條鏈稱為輕鏈(Light chain,L)。同一Ig分子中的兩條H鏈和兩條L鏈的氨基酸組成完全相同。重鏈分子量為50 000~75 000,由450~550個(gè)氨基酸殘基組成。重鏈恒定區(qū)的氨基酸組成和排列順序不同,其抗原性也不同。據(jù)此,可將抗體分為5類(class),即IgM、IgD、IgG、IgA和IgE,其相應(yīng)的重鏈分別為μ鏈、δ鏈、γ鏈、α鏈和ε鏈。不同類的Ig具有不同的特征,如鏈內(nèi)和鏈間二硫鍵的數(shù)量和位置、結(jié)構(gòu)域的數(shù)量及鉸鏈區(qū)的長度等均不完全相同??贵w可以區(qū)分自身抗原和外來抗原,避免免疫系統(tǒng)攻擊自身組織。
抗體主要功能:中和有害素和阻止病原體入侵。識(shí)別并特異性結(jié)合抗原是抗體的主要功能,執(zhí)行該功能的結(jié)構(gòu)是抗體的V區(qū),其中CDR部位在識(shí)別和結(jié)合特異性抗原中起決定性作用??贵w有單體、二聚體和五聚體,因此結(jié)合抗原表位的數(shù)目也不相同??贵w結(jié)合抗原表位的個(gè)數(shù)稱為抗原結(jié)合價(jià)。Ig單體可結(jié)合2個(gè)抗原表位,為雙價(jià)。SIgA是二聚體,可結(jié)合4個(gè)抗原表位,為4價(jià)。IgM是五聚體,理論上可以結(jié)合10個(gè)抗原,應(yīng)該是10價(jià),但由于立體構(gòu)象的空間位阻,使IgM一般只能結(jié)合5個(gè)抗原表位,故為5價(jià)??贵w(antibody)是指機(jī)體由于抗原的刺激而產(chǎn)生的具有保護(hù)作用的蛋白質(zhì)。蘇州Prestige Antibodies抗體供應(yīng)商
單克隆抗體是由單一源頭的B細(xì)胞產(chǎn)生的抗體,具有高度特異性。浙江PRR11多克隆抗體公司排行
1975年,Kohler和Milstein建立了單克隆抗體(monoclonai antibody,mAb)技術(shù),使規(guī)?;苽涓咛禺愋?、均質(zhì)性抗體成為可能。然而,鼠源性mAb在人體反復(fù)免疫后出現(xiàn)的人抗鼠抗體(human anti-mouseantibody,HAMA)很大程度上限制了mAb的臨床應(yīng)用。近年來,隨著分子生物學(xué)的發(fā)展,人們已經(jīng)可以通過抗體工程技術(shù)制備人一鼠嵌合抗體、人源化抗體或人源抗體。天然的抗原分子中常含有多種不同的抗原表位,以該抗原刺激機(jī)體的免疫系統(tǒng)可同時(shí)啟動(dòng)多種B細(xì)胞克隆,產(chǎn)生的抗體中會(huì)含有多種針對不同抗原表位的抗體,因此稱之為多克隆抗體。浙江PRR11多克隆抗體公司排行