多克隆抗體主要從動物免疫血清、恢復(fù)期患者血清或免疫接種人群的血清中獲得。多克隆抗體的優(yōu)勢是:作用全方面,具有中和抗原、免疫調(diào)理、補(bǔ)體依賴的細(xì)胞毒作用(CDC)、ADCC等重要作用,而且來源普遍、制備簡單。其缺點是:特異性不高、易發(fā)生交叉反應(yīng),不易大量制備,因而限制了其應(yīng)用的范圍。單克隆抗體解決多克隆抗體特異性不高的理想方法是制備識別單一表位特異性的抗體。如果能獲得只針對單一表位的漿細(xì)胞克隆,并使其在體外擴(kuò)增分泌抗體,就有可能獲得單一表位特異性的抗體。然而,漿細(xì)胞在體外的壽命較短,難以培養(yǎng)。為克服這一缺點,Kohler和Milstein將可產(chǎn)生特異性抗體但短壽的B細(xì)胞與不產(chǎn)生抗體但長壽的骨髓瘤細(xì)胞融合,獲得了可以產(chǎn)生單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞,從而建立了單克隆抗體制備技術(shù)。重組抗體技術(shù)使得科學(xué)家能夠定制和改良抗體,以應(yīng)對不同的疾病挑戰(zhàn)。江蘇PRR11多克隆抗體試劑
抗體基本結(jié)構(gòu):天然Ig分子含有四條異源性多肽鏈,其中,分子量較大的兩條鏈稱為重鏈(heavy chain,H),而分子量較小的兩條鏈稱為輕鏈(Light chain,L)。同一Ig分子中的兩條H鏈和兩條L鏈的氨基酸組成完全相同。重鏈分子量為50 000~75 000,由450~550個氨基酸殘基組成。重鏈恒定區(qū)的氨基酸組成和排列順序不同,其抗原性也不同。據(jù)此,可將抗體分為5類(class),即IgM、IgD、IgG、IgA和IgE,其相應(yīng)的重鏈分別為μ鏈、δ鏈、γ鏈、α鏈和ε鏈。不同類的Ig具有不同的特征,如鏈內(nèi)和鏈間二硫鍵的數(shù)量和位置、結(jié)構(gòu)域的數(shù)量及鉸鏈區(qū)的長度等均不完全相同。山東IgD抗體費用抗體的結(jié)構(gòu)多樣性使得它們能夠識別和結(jié)合各種形狀和性質(zhì)的分子。
抗體特性和功能:IgG于出生后3個月開始合成,3~5歲接近成人水平。IgG是血清和體液中含量很高的抗體,占血清總Ig的75%~80%。人lgG有4個亞類,根據(jù)其在血清中濃度的高低排序,分別為IgG1、IgG2、IgG3、IgG4。IgG的半衰期為20~23天,是再次免疫應(yīng)答產(chǎn)生的主要抗體,其親和力高,在體內(nèi)分布普遍,具有重要的免疫效應(yīng),是機(jī)體抗傳染的“主力軍”。IgG1、IgG2和IgG3可以穿過胎盤屏障,在新生兒抗傳染免疫中起重要作用。IgG1、lgG2和IgG3能通過經(jīng)典途徑活化補(bǔ)體,并可與巨噬細(xì)胞、NK細(xì)胞表面Fc受體結(jié)合,發(fā)揮調(diào)理作用、ADCC作用等;人IgGl、IgG2和IgG4可通過其Fc段與葡萄球菌蛋白A(SPA)結(jié)合,借此可純化抗體,并用于免疫診斷。某些自身抗體如抗甲狀腺球蛋白抗體、抗核抗體,以及引起Ⅱ、Ⅲ型超敏反應(yīng)的抗體也屬于IgG。
多克隆抗體免疫動物:供免疫用的動物主要是哺乳動物和禽類,常選擇家兔、綿羊、山羊、馬、騾和豚鼠及小鼠等。動物的選擇常根據(jù)抗體的用途和量來決定,也與抗原的性質(zhì)有關(guān)。如要獲得大量的抗體,多采用大動物;如要是獲得直接標(biāo)記診斷的抗體,則直接采用本動物;如要獲得間接的標(biāo)記診斷用抗體,則必須用異源動物制備抗體;如果難以獲得的抗原,且抗體的需要量少,則可以采用純系小鼠制備;一般實驗室采用的抗體,多用兔和羊制備。免疫用的動物建議選擇適齡的健康雄性動物,雌性動物特別是妊娠動物用于制備免疫抗體則非常不合適,有時甚至不產(chǎn)生抗體??贵w檢測可以用于檢測病原體傳染、免疫狀態(tài)和疫苗效果等。
抗原上那部分可以引起機(jī)體產(chǎn)生抗體的分子結(jié)構(gòu),叫做抗原決定簇。一個抗原上可以有好幾個不同的抗原決定簇,因而使機(jī)體產(chǎn)生好幾種不同的抗體,然后產(chǎn)生出抗體是漿細(xì)胞。只針對一個抗原決定簇起作用的漿細(xì)胞群就是一個純系,純系的英文為Clone,音譯就是克隆。由一種克隆產(chǎn)生的特異性抗體叫做單克隆抗體。單克隆抗體能目標(biāo)明確地與單一的特異抗原決定簇結(jié)合,就象導(dǎo)彈精確地命中目標(biāo)一樣。另一方面,即使是同一種抗原決定簇,在機(jī)體內(nèi)也可以由好幾種克隆來產(chǎn)生抗體,形成好幾種單克隆抗體混雜物,稱為多克隆抗體。單克隆抗體是通過基因工程技術(shù)制備的,具有高度特異性和穩(wěn)定性,被普遍應(yīng)用于調(diào)理和診斷領(lǐng)域。武漢新基因PRR11抗體研發(fā)制造
抗體按其反應(yīng)形式分為凝集素、沉降素、抗毒、溶解素、調(diào)理素、中和抗體、補(bǔ)體結(jié)合抗體等。江蘇PRR11多克隆抗體試劑
多克隆抗體免疫動物:抗原的免疫劑量是依照給予動物的種類、免疫周期以及所要求的抗體特性等不同而不同。劑量過低,不能引起足夠強(qiáng)的免疫刺激,免疫劑量過多,有可能引起免疫耐受。在一定的范圍內(nèi),抗體的效價是隨注射劑量的增加而增高。蛋白質(zhì)抗原的免疫劑量比多糖類抗原寬。一般而言,小鼠的初次免疫劑量為 50μg~400μg/次, 大鼠為100μg~1 000μg/次, 兔為 200μg~1 000μg/2次。加強(qiáng)劑量為初次劑量的 1/5~2/5。免疫劑量與注射途徑有關(guān),一般而言,靜脈注射劑量大于皮下注射,而皮下注射又比掌內(nèi)和跖內(nèi)皮下注射劑量大,也可采用淋巴結(jié)內(nèi)注射法。江蘇PRR11多克隆抗體試劑