多克隆抗體是由異源抗原(大分子抗原、半抗原偶聯(lián)物)刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫反應(yīng),有機(jī)體漿細(xì)胞分泌的一組免疫球蛋白。多克隆抗體由于其可識(shí)別多個(gè)抗原表位、可引起沉淀反應(yīng),制備時(shí)間短,成本低的原因廣泛應(yīng)用于研究和診斷方面??梢宰鳛榭乖奈镔|(zhì)有很多種,一般的科研實(shí)驗(yàn)中,經(jīng)常使用的抗原有:偶聯(lián)多肽、偶聯(lián)的小分子或化合物、天然或重組蛋白等等。對(duì)可溶性抗原而言,為了增強(qiáng)其免疫原性或改變免疫反應(yīng)的類(lèi)型、節(jié)約抗原等目的,常采用加佐劑的方法以刺激機(jī)體產(chǎn)生較強(qiáng)的免疫應(yīng)答??贵w療法是一種利用人工合成的抗體來(lái)調(diào)理疾病的新興療法。湖北IgA抗體研發(fā)制造
多克隆抗體免疫動(dòng)物:供免疫用的動(dòng)物主要是哺乳動(dòng)物和禽類(lèi),常選擇家兔、綿羊、山羊、馬、騾和豚鼠及小鼠等。動(dòng)物的選擇常根據(jù)抗體的用途和量來(lái)決定,也與抗原的性質(zhì)有關(guān)。如要獲得大量的抗體,多采用大動(dòng)物;如要是獲得直接標(biāo)記診斷的抗體,則直接采用本動(dòng)物;如要獲得間接的標(biāo)記診斷用抗體,則必須用異源動(dòng)物制備抗體;如果難以獲得的抗原,且抗體的需要量少,則可以采用純系小鼠制備;一般實(shí)驗(yàn)室采用的抗體,多用兔和羊制備。免疫用的動(dòng)物建議選擇適齡的健康雄性動(dòng)物,雌性動(dòng)物特別是妊娠動(dòng)物用于制備免疫抗體則非常不合適,有時(shí)甚至不產(chǎn)生抗體。廣東異嗜性抗體研發(fā)團(tuán)隊(duì)抗體工程可以通過(guò)改變抗體的結(jié)構(gòu)和特性來(lái)提高其療效和穩(wěn)定性。
隨后,經(jīng)1968年和1972年的世界衛(wèi)生組織和國(guó)際免疫學(xué)會(huì)聯(lián)合會(huì)討論決定,將具有抗體活性或化學(xué)結(jié)構(gòu)與抗體相似的球蛋白統(tǒng)一命名為免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)。Ig可分為分泌型Ig(secreted Ig,SIg)和膜型Ig(membrane Ig,mIg)。SIg主要存在于血液和組織液中,行使抗體的各種功能;mIg主要構(gòu)成B細(xì)胞膜表面的抗原受體?;窘Y(jié)構(gòu):經(jīng)x線晶體衍射結(jié)構(gòu)分析發(fā)現(xiàn),Ig由四條多肽鏈組成,各肽鏈之間由數(shù)量不等的鏈間二硫鍵連接。Ig可形成“Y”字型結(jié)構(gòu),稱(chēng)為Ig單體,是構(gòu)成抗體的基本單位。
多克隆抗體主要從動(dòng)物免疫血清、恢復(fù)期患者血清或免疫接種人群的血清中獲得。多克隆抗體的優(yōu)勢(shì)是:作用全方面,具有中和抗原、免疫調(diào)理、補(bǔ)體依賴(lài)的細(xì)胞毒作用(CDC)、ADCC等重要作用,而且來(lái)源普遍、制備簡(jiǎn)單。其缺點(diǎn)是:特異性不高、易發(fā)生交叉反應(yīng),不易大量制備,因而限制了其應(yīng)用的范圍。單克隆抗體解決多克隆抗體特異性不高的理想方法是制備識(shí)別單一表位特異性的抗體。如果能獲得只針對(duì)單一表位的漿細(xì)胞克隆,并使其在體外擴(kuò)增分泌抗體,就有可能獲得單一表位特異性的抗體。然而,漿細(xì)胞在體外的壽命較短,難以培養(yǎng)。為克服這一缺點(diǎn),Kohler和Milstein將可產(chǎn)生特異性抗體但短壽的B細(xì)胞與不產(chǎn)生抗體但長(zhǎng)壽的骨髓瘤細(xì)胞融合,獲得了可以產(chǎn)生單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞,從而建立了單克隆抗體制備技術(shù)。不同的抗體可以針對(duì)不同的病原體,形成免疫記憶以應(yīng)對(duì)未來(lái)的傳染。
凡能產(chǎn)生抗體的高等動(dòng)物(包括人類(lèi)),當(dāng)注入胸腺依賴(lài)性抗原(TD抗原)進(jìn)行免疫時(shí)都有著相同產(chǎn)生抗體的規(guī)律,即存在初次免疫應(yīng)答(primary immune response)和再次免疫應(yīng)答(secondary immune response)。初次免疫應(yīng)答是指機(jī)體初次接觸某種抗原物質(zhì)引起特異性抗體產(chǎn)生的過(guò)程。其特點(diǎn)是潛伏期長(zhǎng)(一周以上),產(chǎn)生的抗體滴度(效價(jià))低、維持的時(shí)間短,產(chǎn)生的抗體以IgM為主;再次免疫應(yīng)答是指機(jī)體以后再次接觸同樣的抗原后所產(chǎn)生的抗體應(yīng)答過(guò)程。其特點(diǎn)是產(chǎn)生抗體的潛伏期短、抗體滴度高,維持的時(shí)問(wèn)長(zhǎng),產(chǎn)生的抗體以IgG為主。人體可以通過(guò)傳染疾病或接種疫苗來(lái)產(chǎn)生特定的抗體。廣東異嗜性抗體研發(fā)團(tuán)隊(duì)
抗體通過(guò)結(jié)合病原體的特定部位來(lái)阻止其進(jìn)一步傳染人體細(xì)胞。湖北IgA抗體研發(fā)制造
抗體的多樣性:人血清中的抗體多種多樣,B淋巴細(xì)胞可產(chǎn)生的抗體種類(lèi)在108以上,可與眾多不同抗原發(fā)生特異性結(jié)合。每種基因片段是以多拷貝的形式存在,其中編碼重鏈V區(qū)的VH、DH和JH的基因片段數(shù)分別為50、23和6個(gè);編碼K輕鏈V區(qū)的Vx和JK基因片段數(shù)分別為60和5個(gè),編碼入輕鏈V區(qū)的VX和J入基因片段數(shù)分別為30和7個(gè)。這些基因在胚系階段以分隔的形式存在。在B細(xì)胞的分化發(fā)育過(guò)程中,這些基因片段發(fā)生重排和組合,從而產(chǎn)生數(shù)量巨大、能識(shí)別特異性抗原的BCR。每種具有特異性BCR的B細(xì)胞克隆可識(shí)別相應(yīng)的抗原,產(chǎn)生一種特異性抗體。Ig基因重組是B細(xì)胞合成無(wú)數(shù)特異性抗體的主要原因。湖北IgA抗體研發(fā)制造