抗體是一種重要的生物分子,在醫(yī)學(xué)和生物學(xué)領(lǐng)域有著普遍的應(yīng)用。以下是抗體的一些主要用途:科學(xué)研究:抗體在科學(xué)研究中也發(fā)揮著重要的作用,如Western Blot、免疫組化、原位雜交等實(shí)驗(yàn)方法中都需要使用抗體??贵w可以用于研究細(xì)胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、基因表達(dá)、蛋白質(zhì)相互作用等問(wèn)題,為揭示生命活動(dòng)的奧秘提供重要的工具。疫苗研發(fā):抗體可以用于疫苗的研發(fā)和生產(chǎn)過(guò)程中。在疫苗研發(fā)中,通過(guò)制備針對(duì)特定病原體或病毒的抗體,可以了解病原體或病毒的結(jié)構(gòu)和功能,為疫苗的設(shè)計(jì)和優(yōu)化提供重要信息。在疫苗生產(chǎn)中,抗體的制備和檢測(cè)也是重要的環(huán)節(jié)之一??贵w的半衰期較長(zhǎng),可以在體內(nèi)持續(xù)發(fā)揮作用,保持免疫防御的持久性。杭州Prestige Antibodies抗體哪家好
單克隆抗體(monoclonal antibody,Mab)技術(shù)是20世紀(jì)免疫學(xué)技術(shù)的一項(xiàng)里程碑式突破。該技術(shù)將免疫小鼠的B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合生成雜交瘤細(xì)胞,這種雜交瘤細(xì)胞核內(nèi)含有雙親細(xì)胞的染色體,繼承了親代細(xì)胞的特征。它既具有瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)中迅速增殖的能力,又具備免疫脾細(xì)胞合成和分泌特異性抗體的特性。隨后用適當(dāng)方法把雜交瘤細(xì)胞分離出來(lái),進(jìn)行單個(gè)細(xì)胞培養(yǎng),使之大量繁殖,在培養(yǎng)液中形成單個(gè)雜交瘤細(xì)胞的克?。ㄒ卜Q細(xì)胞系)。由于每個(gè)B淋巴細(xì)胞只有合成一種抗體的遺傳基因,所以單個(gè)雜交腐細(xì)胞的克隆也只能產(chǎn)生一種專一性抗體,即單克隆抗體。這種制備產(chǎn)生單克隆抗體的技術(shù)被稱為單克隆抗體技術(shù)。杭州IgM抗體供應(yīng)商特定的抗體可以用于制備特異性的試劑盒,用于檢測(cè)特定病原體或標(biāo)志物。
多克隆抗體可以采用以下各種方法之一進(jìn)行免疫。淋巴結(jié)注射法:①在兔的兩后足跖部皮下(或皮內(nèi))注射活卡介苗 50mg(每側(cè)約0.30ml) 。7~10 天后,兔跖及腘肌淋巴結(jié)腫大;②于腫大的兩側(cè)淋巴結(jié)內(nèi)各注射加有完全佐劑的IgG 乳化抗原 0.50ml(含 IgG 5mg/ml、青霉素 1 000U/ml、鏈霉素 1 000μg/ml);③必要時(shí),14 天后,重復(fù)步驟②一次;④再過(guò) 7 天后,于兩側(cè)淋巴結(jié)內(nèi)各注射加有完全佐劑的 IgG 乳化抗原0.50ml(含IgG5mg/ml、青霉素 1 000U/ml、鏈霉素 1 000μg/ml) ;⑤5~7天后,耳靜脈采集血。測(cè)定血清效價(jià)。
多克隆抗體乳化作用:根據(jù)抗原的性質(zhì)、免疫原性和動(dòng)物的免疫反應(yīng)性來(lái)決定免疫途徑、免疫次數(shù)和間隔時(shí)間等。 免疫途徑包括皮下注射、皮內(nèi)注射、肌肉注射、靜脈注射、腹腔注射以及淋巴結(jié)內(nèi)注射等??乖可?,則一般多采用加佐劑,淋巴結(jié)內(nèi)或淋巴結(jié)周圍、或足掌、或皮內(nèi)、皮下多點(diǎn)注射,如抗原量多,則可采用皮下、肌肉、以至靜脈注射。 注射間隔時(shí)間 帶佐劑的皮內(nèi)、皮下注射,一般為間隔 2~4 周免疫一次。不帶佐劑的皮下或肌肉注射,一般為 1~2 周間隔時(shí)間;肌肉或靜脈免疫的,可 5 天左右的間隔時(shí)間。 可以把各種注射途徑聯(lián)合起來(lái)應(yīng)用,然后以達(dá)到效價(jià)要求為目的。抗體的產(chǎn)生主要由B細(xì)胞負(fù)責(zé),它們可以識(shí)別并生成特異性的抗體以應(yīng)對(duì)傳染。
多克隆抗體免疫動(dòng)物:免疫用的動(dòng)物建議選擇適齡的健康雄性動(dòng)物,雌性動(dòng)物特別是妊娠動(dòng)物用于制備免疫抗體則非常不合適,有時(shí)甚至不產(chǎn)生抗體。由于對(duì)免疫應(yīng)答的個(gè)別差異,免疫時(shí)應(yīng)同時(shí)選用數(shù)只動(dòng)物進(jìn)行免疫。 抗原是多種多樣的,而且千差萬(wàn)別。就其化學(xué)成分而言,有蛋白質(zhì)抗原、類脂抗原、多糖類抗原和核酸抗原等。就抗原性而言,有完全抗原和不完全抗原。為了獲得較好的抗血清,建議是選用蛋白質(zhì)抗原,如要制備用于篩選細(xì)菌表達(dá)的 cDNA 文庫(kù)或免疫印跡的抗血清,建議選用可降解的蛋白質(zhì)抗原。不同的抗原,其免疫原性的強(qiáng)弱均不相同,這種免疫原性的強(qiáng)弱取決于抗原的分子量、化學(xué)活性基團(tuán)、立體結(jié)構(gòu)、物理形狀和彌散速度等??贵w介導(dǎo)的細(xì)胞毒性可以直接殺傷傳染的細(xì)胞,起到去除病原體的作用。浙江異種抗體哪家好
抗體在疫苗接種后的產(chǎn)生是一種主動(dòng)免疫應(yīng)答,提供長(zhǎng)期的保護(hù)作用。杭州Prestige Antibodies抗體哪家好
抗體可變區(qū)和恒定區(qū):通過(guò)分析不同Ig重鏈和輕鏈的氨基酸序列發(fā)現(xiàn),重鏈和輕鏈靠近N端的約110個(gè)氨基酸序列變化很大,其他部分氨基酸序列相對(duì)恒定。因此,將Ig輕鏈和重鏈中靠近N端氨基酸序列變化較大的區(qū)域稱為可變區(qū)(variable region,V),分別占重鏈和輕鏈的1/4和1/2;將靠近C端的氨基酸序列相對(duì)穩(wěn)定的區(qū)域,稱為恒定區(qū)(constant region,C),分別占重鏈和輕鏈的3/4和1/2。恒定區(qū) 重鏈和輕鏈的C區(qū)分別稱為CH和CL。不同型(κ或λ)Ig的CL長(zhǎng)度基本一致,但是不同類Ig的CH長(zhǎng)度不同,例如IgG、IgA和IgD包括CH1、CH2和CH3,而IgM和IgE則包括CH1、CH2、CH3和CH4。杭州Prestige Antibodies抗體哪家好