抗體是一種重要的生物分子,在醫(yī)學(xué)和生物學(xué)領(lǐng)域有著普遍的應(yīng)用。以下是抗體的一些主要用途:科學(xué)研究:抗體在科學(xué)研究中也發(fā)揮著重要的作用,如Western Blot、免疫組化、原位雜交等實驗方法中都需要使用抗體。抗體可以用于研究細胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、基因表達、蛋白質(zhì)相互作用等問題,為揭示生命活動的奧秘提供重要的工具。疫苗研發(fā):抗體可以用于疫苗的研發(fā)和生產(chǎn)過程中。在疫苗研發(fā)中,通過制備針對特定病原體或病毒的抗體,可以了解病原體或病毒的結(jié)構(gòu)和功能,為疫苗的設(shè)計和優(yōu)化提供重要信息。在疫苗生產(chǎn)中,抗體的制備和檢測也是重要的環(huán)節(jié)之一??贵w可以通過中和病原體、啟動免疫細胞和調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)等方式發(fā)揮作用。江蘇新基因PRR11抗體基因
抗體主要功能:中和有害素和阻止病原體入侵。識別并特異性結(jié)合抗原是抗體的主要功能,執(zhí)行該功能的結(jié)構(gòu)是抗體的V區(qū),其中CDR部位在識別和結(jié)合特異性抗原中起決定性作用??贵w有單體、二聚體和五聚體,因此結(jié)合抗原表位的數(shù)目也不相同??贵w結(jié)合抗原表位的個數(shù)稱為抗原結(jié)合價。Ig單體可結(jié)合2個抗原表位,為雙價。SIgA是二聚體,可結(jié)合4個抗原表位,為4價。IgM是五聚體,理論上可以結(jié)合10個抗原,應(yīng)該是10價,但由于立體構(gòu)象的空間位阻,使IgM一般只能結(jié)合5個抗原表位,故為5價。蘇州IgG抗體費用抗體在嬰兒期主要來自于母體傳遞,隨著年齡的增長,嬰兒自身的抗體產(chǎn)生能力逐漸增強。
抗原通常是由多個抗原決定簇組成的,由一種抗原決定簇刺激機體,由一個B淋巴細胞接受該抗原刺激所產(chǎn)生的抗體稱之為單克隆抗體(MonoclonalAntibody)。由多種抗原決定簇刺激機體,相應(yīng)地就產(chǎn)生各種各樣的單克隆抗體,這些單克隆抗體混雜在一起就是多克隆抗體,機體內(nèi)所產(chǎn)生的抗體就是多克隆抗體;除了抗原決定簇的多樣性以外,同樣一種抗原決定簇,也可刺激機體產(chǎn)生IgG、IgM、IgA、IgE和IgD等五類抗體??乖碳C體,產(chǎn)生免疫學(xué)反應(yīng),由機體的漿細胞合成并分泌的與抗原有特異性結(jié)合能力的一組球蛋白,這就是免疫球蛋白,這種與抗原有特異性結(jié)合能力的免疫球蛋白就是抗體。
多克隆抗體抗血清凍存:抗血清收獲后,加 1/萬硫柳汞或 1/萬的疊氮鈉防腐,或加入等量的中性甘油,分裝小瓶,置-20℃以下的低溫保存,數(shù)月至數(shù)年內(nèi)抗體效價無明顯變化。注意避免反復(fù)凍融。也可將抗血清冷凍干燥后保存。多克隆抗體的制備一般包括以下幾個步驟:1、制備抗原。2、選擇實驗動物。3、動物免疫。4、試取血進行測試,看看是否成功免疫。5、如果成功免疫,殺死實驗動物,采集全部血清。6、純化出抗體。7、鑒定抗體。包括純度以及特異性。具體操作與制備原理參見中國免疫學(xué)實驗網(wǎng)??贵w的作用不僅限于中和病原體,還可以啟動其他免疫細胞,如巨噬細胞和NK細胞,促進病原體的去除。
多克隆抗體佐劑應(yīng)用:1.佐劑的類型 實踐中常應(yīng)用的佐劑有氫氧化鋁膠、明礬、弗氏佐劑、脂質(zhì)體和石蠟油等。也有采用結(jié)合桿菌等分枝桿菌、白喉桿菌以及細小棒狀桿菌等。⑴ 弗氏不完全佐劑(incomplete Freund's adjuvant,IFA)羊毛脂 1 份;石蠟油 5 份;混合,高壓滅菌后保存。用時加熱融化,冷卻至 50℃左右,加抗原進行乳化處理。⑵ 弗氏完全佐劑(complete Freund's adjuvant,CFA);弗氏不完全佐劑 10ml;卡介苗 10mg~200mg 卡介苗可 100℃10min 滅活處理。初次免疫時,建議用弗氏完全佐劑,以刺激機體產(chǎn)生較強的免疫反應(yīng)。再次免疫時,一般不用完全佐劑,而采用弗氏不完全佐劑。但在研究分枝桿菌及相關(guān)抗原時,一般不用弗氏完全佐劑,以免卡介苗的干擾。特定的抗體可以用于診斷某些疾病,如用于檢測乙肝病毒傳染的抗體。深圳異種抗體
抗體工程可以通過改變抗體的結(jié)構(gòu)和特性來提高其療效和穩(wěn)定性。江蘇新基因PRR11抗體基因
多克隆抗體特異性鑒定:抗體的特異性鑒定 抗體的特異性是指與相應(yīng)抗原或近似抗原物質(zhì)的識別能力??贵w的特異性高,它的識別能力就強。衡量特異性通常以交叉反應(yīng)率來表示。交叉反應(yīng)率可用競爭抑制試驗測定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競爭抑制曲線,計算各自的結(jié)合率,求出各自在 IC50時的濃度,并按下列公式計算交叉反應(yīng)率。 如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,而一些近似抗原物質(zhì)的IC50濃度幾乎是無窮大時,表示 這一抗血清與其他抗原物質(zhì)的交叉反應(yīng)率近似為 0,即該血清的特異性較好。江蘇新基因PRR11抗體基因