抗體的多樣性:人血清中的抗體多種多樣,B淋巴細(xì)胞可產(chǎn)生的抗體種類(lèi)在108以上,可與眾多不同抗原發(fā)生特異性結(jié)合。每種基因片段是以多拷貝的形式存在,其中編碼重鏈V區(qū)的VH、DH和JH的基因片段數(shù)分別為50、23和6個(gè);編碼K輕鏈V區(qū)的Vx和JK基因片段數(shù)分別為60和5個(gè),編碼入輕鏈V區(qū)的VX和J入基因片段數(shù)分別為30和7個(gè)。這些基因在胚系階段以分隔的形式存在。在B細(xì)胞的分化發(fā)育過(guò)程中,這些基因片段發(fā)生重排和組合,從而產(chǎn)生數(shù)量巨大、能識(shí)別特異性抗原的BCR。每種具有特異性BCR的B細(xì)胞克隆可識(shí)別相應(yīng)的抗原,產(chǎn)生一種特異性抗體。Ig基因重組是B細(xì)胞合成無(wú)數(shù)特異性抗體的主要原因??贵w調(diào)理在自身免疫性疾病等領(lǐng)域顯示出了巨大的潛力。廣州異嗜性抗體生產(chǎn)廠(chǎng)家
由雜交瘤單細(xì)胞克隆所產(chǎn)生的單克隆抗體只能特異性地與抗原分子上的一個(gè)抗原決定簇結(jié)合,抗體成分均一,抗體的結(jié)構(gòu)、氨基酸順序、特異性等都是一致的,且在培養(yǎng)過(guò)程中只要不發(fā)生變異,不同時(shí)間內(nèi)分泌的抗體都能保持同樣的結(jié)構(gòu)和功能。用這種技術(shù)可按需要生產(chǎn)大量很純的單一抗體,這些是用普通血清學(xué)方法所不能達(dá)到的。單克隆抗體的發(fā)展經(jīng)歷了鼠源性單克隆抗體、嵌合性單克隆抗體、人源化單克隆抗體和全人源單克隆抗體四個(gè)階段。特別是全人源單克隆抗體,其可變區(qū)和恒定區(qū)都是人源的,這類(lèi)抗體藥物具有高親和力、高特異性、幾乎沒(méi)有毒副作用等優(yōu)點(diǎn),克服了動(dòng)物源抗體及嵌合抗體的各種缺點(diǎn),成為調(diào)理性抗體藥物發(fā)展的必然趨勢(shì)。蘇州專(zhuān)業(yè)抗體報(bào)價(jià)抗體的多樣性來(lái)自于基因重排和突變,使其能夠識(shí)別各種不同的抗原。
抗體基本結(jié)構(gòu):天然Ig分子含有四條異源性多肽鏈,其中,分子量較大的兩條鏈稱(chēng)為重鏈(heavy chain,H),而分子量較小的兩條鏈稱(chēng)為輕鏈(Light chain,L)。同一Ig分子中的兩條H鏈和兩條L鏈的氨基酸組成完全相同。重鏈分子量為50 000~75 000,由450~550個(gè)氨基酸殘基組成。重鏈恒定區(qū)的氨基酸組成和排列順序不同,其抗原性也不同。據(jù)此,可將抗體分為5類(lèi)(class),即IgM、IgD、IgG、IgA和IgE,其相應(yīng)的重鏈分別為μ鏈、δ鏈、γ鏈、α鏈和ε鏈。不同類(lèi)的Ig具有不同的特征,如鏈內(nèi)和鏈間二硫鍵的數(shù)量和位置、結(jié)構(gòu)域的數(shù)量及鉸鏈區(qū)的長(zhǎng)度等均不完全相同。
多克隆抗體免疫動(dòng)物:免疫劑量與注射途徑有關(guān),一般而言,靜脈注射劑量大于皮下注射,而皮下注射又比掌內(nèi)和跖內(nèi)皮下注射劑量大,也可采用淋巴結(jié)內(nèi)注射法。加佐劑比不加佐劑的注射劑量要小,對(duì)家兔而言,采用弗氏完全佐劑,則需注射 0.5mg~1mg/kg./次,如采用弗氏不完全佐劑則注射劑量應(yīng)大10 倍以上。如要制備高度特異性的抗血清,可選用低劑量抗原短程免疫法。如需要獲得高效價(jià)的抗血清,宜采用大劑量長(zhǎng)程免疫法。免疫周期長(zhǎng)者,可少量多次。免疫周期短者,應(yīng)大量少次。 兩次注射的間隔時(shí)間應(yīng)長(zhǎng)短適宜,太短起不到再次反應(yīng)的效果太長(zhǎng)則失去了前一次激發(fā)的敏感作用。一般間隔時(shí)間應(yīng)為 5~7 天,加佐劑者應(yīng)為 2 周左右。 注射的 Ig 純度高,則一般不易引起過(guò)敏反應(yīng),如注射血清,即使是少量,在再次免疫時(shí),極易引起過(guò)敏反應(yīng),所以一定要采取措施。抗體還可以通過(guò)啟動(dòng)補(bǔ)體系統(tǒng)引發(fā)炎癥反應(yīng),吸引其他免疫細(xì)胞前來(lái)去除病原體。
多克隆抗體主要從動(dòng)物免疫血清、恢復(fù)期患者血清或免疫接種人群的血清中獲得。多克隆抗體的優(yōu)勢(shì)是:作用全方面,具有中和抗原、免疫調(diào)理、補(bǔ)體依賴(lài)的細(xì)胞毒作用(CDC)、ADCC等重要作用,而且來(lái)源普遍、制備簡(jiǎn)單。其缺點(diǎn)是:特異性不高、易發(fā)生交叉反應(yīng),不易大量制備,因而限制了其應(yīng)用的范圍。單克隆抗體解決多克隆抗體特異性不高的理想方法是制備識(shí)別單一表位特異性的抗體。如果能獲得只針對(duì)單一表位的漿細(xì)胞克隆,并使其在體外擴(kuò)增分泌抗體,就有可能獲得單一表位特異性的抗體。然而,漿細(xì)胞在體外的壽命較短,難以培養(yǎng)。為克服這一缺點(diǎn),Kohler和Milstein將可產(chǎn)生特異性抗體但短壽的B細(xì)胞與不產(chǎn)生抗體但長(zhǎng)壽的骨髓瘤細(xì)胞融合,獲得了可以產(chǎn)生單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞,從而建立了單克隆抗體制備技術(shù)??贵w的半衰期較長(zhǎng),可以在體內(nèi)持續(xù)發(fā)揮作用,保持免疫防御的持久性。蘇州專(zhuān)業(yè)抗體報(bào)價(jià)
抗體介導(dǎo)的細(xì)胞毒性可以直接殺傷傳染的細(xì)胞,起到去除病原體的作用。廣州異嗜性抗體生產(chǎn)廠(chǎng)家
單克隆抗體(monoclonal antibody,Mab)技術(shù)是20世紀(jì)免疫學(xué)技術(shù)的一項(xiàng)里程碑式突破。該技術(shù)將免疫小鼠的B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合生成雜交瘤細(xì)胞,這種雜交瘤細(xì)胞核內(nèi)含有雙親細(xì)胞的染色體,繼承了親代細(xì)胞的特征。它既具有瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)中迅速增殖的能力,又具備免疫脾細(xì)胞合成和分泌特異性抗體的特性。隨后用適當(dāng)方法把雜交瘤細(xì)胞分離出來(lái),進(jìn)行單個(gè)細(xì)胞培養(yǎng),使之大量繁殖,在培養(yǎng)液中形成單個(gè)雜交瘤細(xì)胞的克?。ㄒ卜Q(chēng)細(xì)胞系)。由于每個(gè)B淋巴細(xì)胞只有合成一種抗體的遺傳基因,所以單個(gè)雜交腐細(xì)胞的克隆也只能產(chǎn)生一種專(zhuān)一性抗體,即單克隆抗體。這種制備產(chǎn)生單克隆抗體的技術(shù)被稱(chēng)為單克隆抗體技術(shù)。廣州異嗜性抗體生產(chǎn)廠(chǎng)家