抗體特性和功能:IgM占血清Ig總量的5%~10%,血清濃度約為1mg/ml。單體IgM以膜結(jié)合型表達(dá)于B細(xì)胞表面,構(gòu)成B細(xì)胞抗原受體,只表達(dá)mlgM是未成熟B細(xì)胞的標(biāo)志。分泌型IgM為五聚體,是分子量很大的Ig,沉降系數(shù)為19S,稱為巨球蛋白(macroglobulin),一般不能通過血管壁,主要存在于血液中。五聚體IgM含有10個(gè)Fab段,具有很強(qiáng)的抗原結(jié)合能力;含有5個(gè)Fc段,比IgG更易啟動(dòng)補(bǔ)體。天然血型抗體為IgM,血型不匹配的輸血,可導(dǎo)致嚴(yán)重的溶血反應(yīng)。IgM是個(gè)體發(fā)育過程中很早合成和分泌的抗體,在胚胎發(fā)育晚期的胎兒即能產(chǎn)生IgM,故臍帶血lgM升高提示胎兒有宮內(nèi)傳染(如風(fēng)疹病毒或巨細(xì)胞病毒等傳染)。IgM也是初次體液免疫應(yīng)答中很早出現(xiàn)的抗體,是機(jī)體抗傳染免疫的“先頭”;血清中IgM升高,提示新近發(fā)生傳染,可用于傳染的早期診斷??贵w在嬰兒期主要來自于母體傳遞,隨著年齡的增長,嬰兒自身的抗體產(chǎn)生能力逐漸增強(qiáng)。成都異種抗體研發(fā)制造
多克隆抗體主要從動(dòng)物免疫血清、恢復(fù)期患者血清或免疫接種人群的血清中獲得。多克隆抗體的優(yōu)勢是:作用全方面,具有中和抗原、免疫調(diào)理、補(bǔ)體依賴的細(xì)胞毒作用(CDC)、ADCC等重要作用,而且來源普遍、制備簡單。其缺點(diǎn)是:特異性不高、易發(fā)生交叉反應(yīng),不易大量制備,因而限制了其應(yīng)用的范圍。單克隆抗體解決多克隆抗體特異性不高的理想方法是制備識(shí)別單一表位特異性的抗體。如果能獲得只針對單一表位的漿細(xì)胞克隆,并使其在體外擴(kuò)增分泌抗體,就有可能獲得單一表位特異性的抗體。然而,漿細(xì)胞在體外的壽命較短,難以培養(yǎng)。為克服這一缺點(diǎn),Kohler和Milstein將可產(chǎn)生特異性抗體但短壽的B細(xì)胞與不產(chǎn)生抗體但長壽的骨髓瘤細(xì)胞融合,獲得了可以產(chǎn)生單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞,從而建立了單克隆抗體制備技術(shù)。湖北IgM抗體報(bào)價(jià)抗體通過與細(xì)菌或病毒表面的抗原結(jié)合來阻止它們進(jìn)一步侵襲機(jī)體。
多克隆抗體乳化作用:根據(jù)抗原的性質(zhì)、免疫原性和動(dòng)物的免疫反應(yīng)性來決定免疫途徑、免疫次數(shù)和間隔時(shí)間等。 免疫途徑包括皮下注射、皮內(nèi)注射、肌肉注射、靜脈注射、腹腔注射以及淋巴結(jié)內(nèi)注射等??乖可伲瑒t一般多采用加佐劑,淋巴結(jié)內(nèi)或淋巴結(jié)周圍、或足掌、或皮內(nèi)、皮下多點(diǎn)注射,如抗原量多,則可采用皮下、肌肉、以至靜脈注射。 注射間隔時(shí)間 帶佐劑的皮內(nèi)、皮下注射,一般為間隔 2~4 周免疫一次。不帶佐劑的皮下或肌肉注射,一般為 1~2 周間隔時(shí)間;肌肉或靜脈免疫的,可 5 天左右的間隔時(shí)間。 可以把各種注射途徑聯(lián)合起來應(yīng)用,然后以達(dá)到效價(jià)要求為目的。
抗體主要功能:穿過胎盤屏障和黏膜。在人類,lgG是單獨(dú)能夠通過胎盤的抗體。胎盤母體一側(cè)的滋養(yǎng)層細(xì)胞可表達(dá)一種特異性的IgG輸送蛋白,稱為FcRn。IgG可選擇性地與FcRn結(jié)合,從而轉(zhuǎn)移到滋養(yǎng)層細(xì)胞內(nèi),并主動(dòng)進(jìn)入胎兒的血循環(huán)中。IgG穿過胎盤的作用在于這是一種重要的自然被動(dòng)免疫機(jī)制,對于新生兒抗傳染具有重要意義。另外,sigA可通過呼吸道和消化道的黏膜,在黏膜局部免疫中發(fā)揮重要的免疫防御作用。人血清中的抗體多種多樣,B淋巴細(xì)胞可產(chǎn)生的抗體種類在108以上,可與眾多不同抗原發(fā)生特異性結(jié)合。單克隆抗體是由單一源頭的B細(xì)胞產(chǎn)生的抗體,具有高度特異性。
多克隆抗體免疫動(dòng)物:供免疫用的動(dòng)物主要是哺乳動(dòng)物和禽類,常選擇家兔、綿羊、山羊、馬、騾和豚鼠及小鼠等。動(dòng)物的選擇常根據(jù)抗體的用途和量來決定,也與抗原的性質(zhì)有關(guān)。如要獲得大量的抗體,多采用大動(dòng)物;如要是獲得直接標(biāo)記診斷的抗體,則直接采用本動(dòng)物;如要獲得間接的標(biāo)記診斷用抗體,則必須用異源動(dòng)物制備抗體;如果難以獲得的抗原,且抗體的需要量少,則可以采用純系小鼠制備;一般實(shí)驗(yàn)室采用的抗體,多用兔和羊制備。免疫用的動(dòng)物建議選擇適齡的健康雄性動(dòng)物,雌性動(dòng)物特別是妊娠動(dòng)物用于制備免疫抗體則非常不合適,有時(shí)甚至不產(chǎn)生抗體??贵w的結(jié)構(gòu)多樣性使得它們能夠識(shí)別和結(jié)合各種形狀和性質(zhì)的分子。湖北IgM抗體報(bào)價(jià)
抗體的親和力決定了其與抗原結(jié)合的強(qiáng)度,高親和力的抗體能更有效地中和病原體。成都異種抗體研發(fā)制造
抗體可變區(qū)和恒定區(qū):可變區(qū) 重鏈和輕鏈的V區(qū)分別稱為VH和VL。VH和VL中各含有3個(gè)氨基酸組成和排列順序高度可變的區(qū)域,稱為高變區(qū)(hypervariable region,HVR)或互補(bǔ)決定區(qū)(complementarity determining region,CDR), 包括HVR1(CDR1)、HVR2(CDR2)和HVR3(CDR3),其中,HVR3(CDR3)變化程度更高。VH的3個(gè)高變區(qū)分別位于29~31、49~58和95~102位氨基酸,而VL的3個(gè)高變區(qū)分別位于28~35、49~56和91~98位氨基酸。VH和VL的3個(gè)CDR共同組成Ig的抗原結(jié)合部位(antigen-binding site),決定抗體的特異性,是抗體識(shí)別及結(jié)合抗原的部位。在V區(qū)中,CDR之外區(qū)域的氨基酸組成和排列順序相對保守,稱為骨架區(qū)(framework region,F(xiàn)R)。VH或VL各有四個(gè)骨架區(qū),分別用FR1、FR2、FR3和FR4表示。成都異種抗體研發(fā)制造