多克隆抗體免疫動物:抗原的免疫劑量是依照給予動物的種類、免疫周期以及所要求的抗體特性等不同而不同。劑量過低,不能引起足夠強(qiáng)的免疫刺激,免疫劑量過多,有可能引起免疫耐受。在一定的范圍內(nèi),抗體的效價是隨注射劑量的增加而增高。蛋白質(zhì)抗原的免疫劑量比多糖類抗原寬。一般而言,小鼠的初次免疫劑量為 50μg~400μg/次, 大鼠為100μg~1 000μg/次, 兔為 200μg~1 000μg/2次。加強(qiáng)劑量為初次劑量的 1/5~2/5。免疫劑量與注射途徑有關(guān),一般而言,靜脈注射劑量大于皮下注射,而皮下注射又比掌內(nèi)和跖內(nèi)皮下注射劑量大,也可采用淋巴結(jié)內(nèi)注射法。中和抗體是一種能夠中和病毒入侵的抗體,對病毒傳染具有重要意義。廣州自身抗體報價
抗體可變區(qū)和恒定區(qū):可變區(qū) 重鏈和輕鏈的V區(qū)分別稱為VH和VL。VH和VL中各含有3個氨基酸組成和排列順序高度可變的區(qū)域,稱為高變區(qū)(hypervariable region,HVR)或互補(bǔ)決定區(qū)(complementarity determining region,CDR), 包括HVR1(CDR1)、HVR2(CDR2)和HVR3(CDR3),其中,HVR3(CDR3)變化程度更高。VH的3個高變區(qū)分別位于29~31、49~58和95~102位氨基酸,而VL的3個高變區(qū)分別位于28~35、49~56和91~98位氨基酸。VH和VL的3個CDR共同組成Ig的抗原結(jié)合部位(antigen-binding site),決定抗體的特異性,是抗體識別及結(jié)合抗原的部位。在V區(qū)中,CDR之外區(qū)域的氨基酸組成和排列順序相對保守,稱為骨架區(qū)(framework region,F(xiàn)R)。VH或VL各有四個骨架區(qū),分別用FR1、FR2、FR3和FR4表示。安徽多克隆抗體公司排行自然免疫和獲得性免疫都依賴于抗體的產(chǎn)生和作用。
抗體的多樣性:人血清中的抗體多種多樣,B淋巴細(xì)胞可產(chǎn)生的抗體種類在108以上,可與眾多不同抗原發(fā)生特異性結(jié)合。每種基因片段是以多拷貝的形式存在,其中編碼重鏈V區(qū)的VH、DH和JH的基因片段數(shù)分別為50、23和6個;編碼K輕鏈V區(qū)的Vx和JK基因片段數(shù)分別為60和5個,編碼入輕鏈V區(qū)的VX和J入基因片段數(shù)分別為30和7個。這些基因在胚系階段以分隔的形式存在。在B細(xì)胞的分化發(fā)育過程中,這些基因片段發(fā)生重排和組合,從而產(chǎn)生數(shù)量巨大、能識別特異性抗原的BCR。每種具有特異性BCR的B細(xì)胞克隆可識別相應(yīng)的抗原,產(chǎn)生一種特異性抗體。Ig基因重組是B細(xì)胞合成無數(shù)特異性抗體的主要原因。
抗體鉸鏈區(qū):鉸鏈區(qū)(hinge region)位于CH1與CH2之間,富含脯氨酸,易伸展彎曲,從而改變抗原結(jié)合部位之間的距離,有利于抗體結(jié)合位于不同位置的抗原表位。鉸鏈區(qū)易被木瓜蛋白酶、胃蛋白酶等水解,產(chǎn)生不同的水解片段。不同類Ig的鉸鏈區(qū)不盡相同,例如人IgGl、IgG2、IgG4和IgA的鉸鏈區(qū)較短,IgG3和IgD的鉸鏈區(qū)較長,而IgM和IgE無鉸鏈區(qū)。J鏈和分泌片:Ig輕鏈和重鏈除上述基本結(jié)構(gòu)外,某些類別的Ig還含有其他輔助成分,如J鏈和分泌片 ??贵w能識別特定外來物的一個獨特特征,該外來目標(biāo)被稱為抗原。
抗體(antibody)是指機(jī)體由于抗原的刺激而產(chǎn)生的具有保護(hù)作用的蛋白質(zhì)。它(免疫球蛋白不只是抗體)是一種由漿細(xì)胞(效應(yīng)B細(xì)胞)分泌,被免疫系統(tǒng)用來鑒別與中和外來物質(zhì)如細(xì)菌、病毒等的大型Y形蛋白質(zhì),只被發(fā)現(xiàn)存在于脊椎動物的血液等體液中,及其B細(xì)胞的細(xì)胞膜表面??贵w能識別特定外來物的一個獨特特征,該外來目標(biāo)被稱為抗原??贵w是一類能與抗原特異性結(jié)合的免疫球蛋白??贵w按其反應(yīng)形式分為凝集素、沉降素、抗毒、溶解素、調(diào)理素、中和抗體、補(bǔ)體結(jié)合抗體等。抗體調(diào)理在自身免疫性疾病等領(lǐng)域顯示出了巨大的潛力。安徽多克隆抗體公司排行
抗體的親和力決定了其與抗原結(jié)合的強(qiáng)度,高親和力的抗體能更有效地中和病原體。廣州自身抗體報價
抗體特性和功能:IgM占血清Ig總量的5%~10%,血清濃度約為1mg/ml。單體IgM以膜結(jié)合型表達(dá)于B細(xì)胞表面,構(gòu)成B細(xì)胞抗原受體,只表達(dá)mlgM是未成熟B細(xì)胞的標(biāo)志。分泌型IgM為五聚體,是分子量很大的Ig,沉降系數(shù)為19S,稱為巨球蛋白(macroglobulin),一般不能通過血管壁,主要存在于血液中。五聚體IgM含有10個Fab段,具有很強(qiáng)的抗原結(jié)合能力;含有5個Fc段,比IgG更易啟動補(bǔ)體。天然血型抗體為IgM,血型不匹配的輸血,可導(dǎo)致嚴(yán)重的溶血反應(yīng)。IgM是個體發(fā)育過程中很早合成和分泌的抗體,在胚胎發(fā)育晚期的胎兒即能產(chǎn)生IgM,故臍帶血lgM升高提示胎兒有宮內(nèi)傳染(如風(fēng)疹病毒或巨細(xì)胞病毒等傳染)。IgM也是初次體液免疫應(yīng)答中很早出現(xiàn)的抗體,是機(jī)體抗傳染免疫的“先頭”;血清中IgM升高,提示新近發(fā)生傳染,可用于傳染的早期診斷。廣州自身抗體報價