抗體特性和功能:IgM占血清Ig總量的5%~10%,血清濃度約為1mg/ml。單體IgM以膜結合型表達于B細胞表面,構成B細胞抗原受體,只表達mlgM是未成熟B細胞的標志。分泌型IgM為五聚體,是分子量很大的Ig,沉降系數為19S,稱為巨球蛋白(macroglobulin),一般不能通過血管壁,主要存在于血液中。五聚體IgM含有10個Fab段,具有很強的抗原結合能力;含有5個Fc段,比IgG更易啟動補體。天然血型抗體為IgM,血型不匹配的輸血,可導致嚴重的溶血反應。IgM是個體發(fā)育過程中很早合成和分泌的抗體,在胚胎發(fā)育晚期的胎兒即能產生IgM,故臍帶血lgM升高提示胎兒有宮內傳染(如風疹病毒或巨細胞病毒等傳染)。IgM也是初次體液免疫應答中很早出現(xiàn)的抗體,是機體抗傳染免疫的“先頭”;血清中IgM升高,提示新近發(fā)生傳染,可用于傳染的早期診斷??贵w能識別特定外來物的一個獨特特征,該外來目標被稱為抗原。廣東Prestige抗體怎么購買
多克隆抗體免疫動物:抗體的效價鑒定 不管是用于診斷還是用于調理,制備抗體的目的都是要求較高效價。不同的抗原制備的抗體,要求的效價不一。鑒定效價的方法很多,包括有試管凝集反應、瓊脂擴散試驗、酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價,一般就采用瓊脂擴散試驗來鑒定??贵w的特異性鑒定 抗體的特異性是指與相應抗原或近似抗原物質的識別能力??贵w的特異性高,它的識別能力就強。衡量特異性通常以交叉反應率來表示。交叉反應率可用競爭抑制試驗測定。廣東Prestige抗體怎么購買抗體按其反應形式分為凝集素、沉降素、抗毒、溶解素、調理素、中和抗體、補體結合抗體等。
多克隆抗體可以采用以下各種方法之一進行免疫。皮下多點注射法:①家兔兩側掌(跖內各注射含有完全佐劑抗原 0.10ml(IgG 含量5mg/ml) ;②7~10 天后,脊柱兩側多點(頸、胸、腰椎各兩點、共 6 點)皮下注射含不完全佐劑5的抗原,每點 0.50ml;③7~10 天后,脊柱兩側重復注射一次;④7~10 天后試血。不合格者重復步驟③。多途徑聯(lián)合注射法:①兩側掌(跖)內側皮下注射含完全佐劑抗原 0.50ml(IgG 量為 5mg/ml) ;②14 天后,多點皮下注射含有不完全佐劑抗原;③7 天后,耳靜脈注射不含佐劑的抗原 2ml;④測定血清抗體效價,不合格者重復步驟③,并適當遞增 IgG 量。
多克隆抗體乳化作用:根據抗原的性質、免疫原性和動物的免疫反應性來決定免疫途徑、免疫次數和間隔時間等。 免疫途徑包括皮下注射、皮內注射、肌肉注射、靜脈注射、腹腔注射以及淋巴結內注射等??乖可?,則一般多采用加佐劑,淋巴結內或淋巴結周圍、或足掌、或皮內、皮下多點注射,如抗原量多,則可采用皮下、肌肉、以至靜脈注射。 注射間隔時間 帶佐劑的皮內、皮下注射,一般為間隔 2~4 周免疫一次。不帶佐劑的皮下或肌肉注射,一般為 1~2 周間隔時間;肌肉或靜脈免疫的,可 5 天左右的間隔時間。 可以把各種注射途徑聯(lián)合起來應用,然后以達到效價要求為目的??贵w通過與細菌或病毒表面的抗原結合來阻止它們進一步侵襲機體。
多克隆抗體抗血清凍存:抗血清收獲后,加 1/萬硫柳汞或 1/萬的疊氮鈉防腐,或加入等量的中性甘油,分裝小瓶,置-20℃以下的低溫保存,數月至數年內抗體效價無明顯變化。注意避免反復凍融。也可將抗血清冷凍干燥后保存。多克隆抗體的制備一般包括以下幾個步驟:1、制備抗原。2、選擇實驗動物。3、動物免疫。4、試取血進行測試,看看是否成功免疫。5、如果成功免疫,殺死實驗動物,采集全部血清。6、純化出抗體。7、鑒定抗體。包括純度以及特異性。具體操作與制備原理參見中國免疫學實驗**定的抗體可以用于診斷某些疾病,如用于檢測乙肝病毒傳染的抗體。廣東Prestige抗體怎么購買
抗體工程可以通過改變抗體的結構和特性來提高其療效和穩(wěn)定性。廣東Prestige抗體怎么購買
多克隆抗體佐劑應用:1.佐劑的類型 實踐中常應用的佐劑有氫氧化鋁膠、明礬、弗氏佐劑、脂質體和石蠟油等。也有采用結合桿菌等分枝桿菌、白喉桿菌以及細小棒狀桿菌等。⑴ 弗氏不完全佐劑(incomplete Freund's adjuvant,IFA)羊毛脂 1 份;石蠟油 5 份;混合,高壓滅菌后保存。用時加熱融化,冷卻至 50℃左右,加抗原進行乳化處理。⑵ 弗氏完全佐劑(complete Freund's adjuvant,CFA);弗氏不完全佐劑 10ml;卡介苗 10mg~200mg 卡介苗可 100℃10min 滅活處理。初次免疫時,建議用弗氏完全佐劑,以刺激機體產生較強的免疫反應。再次免疫時,一般不用完全佐劑,而采用弗氏不完全佐劑。但在研究分枝桿菌及相關抗原時,一般不用弗氏完全佐劑,以免卡介苗的干擾。廣東Prestige抗體怎么購買