抗體特性和功能:IgA分為兩型:血清型為單體,主要存在于血清中,只占血清Ig總量的10%~15%;分泌型IgA(secretory IgA,SIgA)為二聚體,由J鏈連接,含內(nèi)皮細(xì)胞合成的分泌片,經(jīng)分泌性上皮細(xì)胞分泌至外分泌液中。SIgA合成和分泌的部位在腸道、呼吸道、乳腺、唾液腺和淚腺,因此主要存在于胃腸道和支氣管分泌液、初乳、唾液和淚液。SIgA是外分泌液中主要的抗體類別,參與黏膜局部免疫,通過與相應(yīng)病原微生物結(jié)合,阻止病原體黏附到細(xì)胞表面,在局部抗傳染中發(fā)揮重要作用。SIgA在黏膜表面也有中和有害素的作用。新生兒易患呼吸道、胃腸道傳染可能與IgA合成不足有關(guān)。嬰兒可從母親初乳中獲得SIgA,這是一種重要的自然被動(dòng)免疫過程;單克隆抗體可以用于調(diào)理心血管疾病。湖北正??贵w生產(chǎn)廠家
由雜交瘤單細(xì)胞克隆所產(chǎn)生的單克隆抗體只能特異性地與抗原分子上的一個(gè)抗原決定簇結(jié)合,抗體成分均一,抗體的結(jié)構(gòu)、氨基酸順序、特異性等都是一致的,且在培養(yǎng)過程中只要不發(fā)生變異,不同時(shí)間內(nèi)分泌的抗體都能保持同樣的結(jié)構(gòu)和功能。用這種技術(shù)可按需要生產(chǎn)大量很純的單一抗體,這些是用普通血清學(xué)方法所不能達(dá)到的。單克隆抗體的發(fā)展經(jīng)歷了鼠源性單克隆抗體、嵌合性單克隆抗體、人源化單克隆抗體和全人源單克隆抗體四個(gè)階段。特別是全人源單克隆抗體,其可變區(qū)和恒定區(qū)都是人源的,這類抗體藥物具有高親和力、高特異性、幾乎沒有毒副作用等優(yōu)點(diǎn),克服了動(dòng)物源抗體及嵌合抗體的各種缺點(diǎn),成為調(diào)理性抗體藥物發(fā)展的必然趨勢;南京多克隆抗體費(fèi)用抗體按其反應(yīng)形式分為凝集素、沉降素、抗毒、溶解素、調(diào)理素、中和抗體、補(bǔ)體結(jié)合抗體等。
多克隆抗體乳化作用:根據(jù)抗原的性質(zhì)、免疫原性和動(dòng)物的免疫反應(yīng)性來決定免疫途徑、免疫次數(shù)和間隔時(shí)間等。 免疫途徑包括皮下注射、皮內(nèi)注射、肌肉注射、靜脈注射、腹腔注射以及淋巴結(jié)內(nèi)注射等。抗原量少,則一般多采用加佐劑,淋巴結(jié)內(nèi)或淋巴結(jié)周圍、或足掌、或皮內(nèi)、皮下多點(diǎn)注射,如抗原量多,則可采用皮下、肌肉、以至靜脈注射。 注射間隔時(shí)間 帶佐劑的皮內(nèi)、皮下注射,一般為間隔 2~4 周免疫一次。不帶佐劑的皮下或肌肉注射,一般為 1~2 周間隔時(shí)間;肌肉或靜脈免疫的,可 5 天左右的間隔時(shí)間。 可以把各種注射途徑聯(lián)合起來應(yīng)用,然后以達(dá)到效價(jià)要求為目的。
抗體的結(jié)構(gòu):Porter等對(duì)血清IgG抗體的研究證明:Ig分子的基本結(jié)構(gòu)是由四肽鏈組成的。即:由二條相同的分子量較小的肽鏈(輕鏈)和二條相同的分子量較大的肽鏈(重鏈)組成。輕鏈與重鏈?zhǔn)怯啥蜴I連接形成一個(gè)四肽鏈分子稱為Ig分子的單體;單體是構(gòu)成所有免疫球蛋白分子的基本結(jié)構(gòu);所有抗體的單體都是四條肽鏈的對(duì)稱結(jié)構(gòu),即:兩條糖基化重鏈(H)和兩條非糖基化輕鏈(L);每條重鏈和輕鏈分為氨基端(N端)和羧基端(C端)。輕鏈和重鏈1、輕鏈(light chain,L鏈)由214個(gè)氨基酸殘基組成,通常不含碳水化合物,分子量為24kD,有兩個(gè)由鏈內(nèi)二硫鍵組成的環(huán)肽,L鏈可分為:Kappa(κ)與 lambda(λ)2個(gè)亞型。2、重鏈(heavy chain,H鏈)由450-550個(gè)氨基酸殘基組成,分子量55-75kD,含糖數(shù)量不同,4-5個(gè)鏈內(nèi)二硫鍵,可分為5類,μ、γ、α、δ、ε鏈,不同的H鏈與L鏈(κ或λ)組成完整的Ig分子。分別稱為:IgM,IgG,IgA,IgD和IgE。單克隆抗體的制備要求高精度的實(shí)驗(yàn)操作。
多克隆抗體特異性鑒定:抗體的特異性鑒定 抗體的特異性是指與相應(yīng)抗原或近似抗原物質(zhì)的識(shí)別能力??贵w的特異性高,它的識(shí)別能力就強(qiáng)。衡量特異性通常以交叉反應(yīng)率來表示。交叉反應(yīng)率可用競爭抑制試驗(yàn)測定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競爭抑制曲線,計(jì)算各自的結(jié)合率,求出各自在 IC50時(shí)的濃度,并按下列公式計(jì)算交叉反應(yīng)率。 如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,而一些近似抗原物質(zhì)的IC50濃度幾乎是無窮大時(shí),表示 這一抗血清與其他抗原物質(zhì)的交叉反應(yīng)率近似為 0,即該血清的特異性較好。多克隆抗體可以通過融合細(xì)胞和單克隆化技術(shù)轉(zhuǎn)變?yōu)閱慰寺】贵w。湖北兔抗富含脯氨酸蛋白11多克隆抗體費(fèi)用
多克隆抗體可以用于檢測未知的抗原,因?yàn)槠淠軌蜃R(shí)別多個(gè)不同的表位。湖北正??贵w生產(chǎn)廠家
19世紀(jì)后期,Von Behring及其同事Kitasato研究發(fā)現(xiàn),用白喉或破傷風(fēng)免疫動(dòng)物后可產(chǎn)生具有中和有害素作用的物質(zhì),稱之為antitoxin,隨后引入“抗體”一詞來泛指抗有害素類物質(zhì)??贵w(antibody,Ab)是B細(xì)胞接受抗原刺激后增殖分化為漿細(xì)胞所產(chǎn)生的糖蛋白,主要存在于血清等體液中,是介導(dǎo)體液免疫的重要效應(yīng)分子,能與相應(yīng)抗原特異性結(jié)合,發(fā)揮免疫功能。1937年,Tiselius和Kabat用電泳方法將血清蛋白分為白蛋白、α1、α2、β及γ球蛋白等組分,并發(fā)現(xiàn)抗體主要存在于γ區(qū),因此抗體又被稱為γ球蛋白。湖北正??贵w生產(chǎn)廠家