抗體基本結(jié)構(gòu):經(jīng)x線晶體衍射結(jié)構(gòu)分析發(fā)現(xiàn),Ig由四條多肽鏈組成,各肽鏈之間由數(shù)量不等的鏈間二硫鍵連接。Ig可形成“Y”字型結(jié)構(gòu),稱為Ig單體,是構(gòu)成抗體的基本單位。天然Ig分子含有四條異源性多肽鏈,其中,分子量較大的兩條鏈稱為重鏈(heavy chain,H),而分子量較小的兩條鏈稱為輕鏈(Light chain,L)。同一Ig分子中的兩條H鏈和兩條L鏈的氨基酸組成完全相同。重鏈分子量為50 000~75 000,由450~550個氨基酸殘基組成。重鏈恒定區(qū)的氨基酸組成和排列順序不同,其抗原性也不同。單克隆抗體的研究已經(jīng)取得了明顯的進展。杭州異種抗體研發(fā)團隊
抗體,也叫免疫球蛋白 (Ig),是一種能特異性結(jié)合抗原的糖蛋白,而抗原是在易傳染動物體內(nèi)引發(fā)抗體產(chǎn)生的物質(zhì)。在體內(nèi),抗體是由于外 源性分子的侵襲而產(chǎn)生的。抗體以一個或者多個 Y 字形單體存在, 每個 Y 字形單體由 4 條多肽鏈組成,包含兩條相同的重鏈和兩條相同的輕鏈。輕鏈和重鏈是根據(jù)它們的分子量大小來命名的。Y 字形結(jié)構(gòu)的頂端是可變區(qū),為抗原結(jié)合部位。任何一個抗體的輕鏈都可以分為κ或λ型(基于小分子多肽結(jié)構(gòu)上的差異),每一個抗體的重鏈則決定了它的類或型。北京IgM抗體哪家好抗體檢測可以用于檢測病原體傳染、免疫狀態(tài)和疫苗效果等。
抗體水解片段:在一定條件下,Ig分子肽鏈的某些部分易被蛋白酶水解為不同片段。木瓜蛋白酶(papain)和胃蛋白酶(pepsin)是很常用的兩種Ig蛋白水解酶,并可籍此研究Ig的結(jié)構(gòu)和功能,分離和純化特定的12多肽片段。木瓜蛋白酶水解Ig的部位是在鉸鏈區(qū)二硫鍵連接的兩條重鏈的近N端,可將Ig裂解為兩個完全相同的Fab段和一個Fc段。Fab段即抗原結(jié)合片段(fragment antigenbinding,F(xiàn)ab),由一條完整的輕鏈與重鏈的VH和CHl結(jié)構(gòu)域組成。一個Fab片段為單價,可與抗原結(jié)合但不產(chǎn)生凝集反應或沉淀反應;Fc段即可結(jié)晶片段(fragment crystallizable,F(xiàn)c),由Ig的CH2和CH3結(jié)構(gòu)域組成。Fc段無抗原結(jié)合活性,是Ig與效應分子或細胞相互作用的部位。
單克隆抗體的大量制備主要采用動物體內(nèi)誘生法和體外培養(yǎng)法。(1)體內(nèi)誘生法取BALB/c小鼠,首先腹腔注射0.5ml液體石蠟或降植烷進行預處理。1-2周后,腹腔內(nèi)接種雜交瘤細胞。雜交瘤細胞在小鼠腹腔內(nèi)增殖,并產(chǎn)生和分泌單克隆抗體。約1-2周,可見小鼠腹部膨大。用注射器抽取腹水,即可獲得大量單克隆抗體。(2)體外培養(yǎng)法將雜交瘤細胞置于培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)。在培養(yǎng)過程中,雜交瘤細胞產(chǎn)生并分泌單克隆抗體,收集培養(yǎng)上清液,離心去除細胞及其碎片,即可獲得所需要的單克隆抗體。但這種方法產(chǎn)生的抗體量有限。各種新型培養(yǎng)技術(shù)和裝置不斷出現(xiàn),極大提高了抗體的生產(chǎn)量??贵w的作用不僅限于中和病原體,還可以啟動其他免疫細胞,如巨噬細胞和NK細胞,促進病原體的去除。
抗體結(jié)構(gòu)域:輕鏈有VL和CL兩個結(jié)構(gòu)域;IgG、IgA和IgD的重鏈有VH、CH1、CH2和CH3四個結(jié)構(gòu)域;IgM和IgE的重鏈有五個結(jié)構(gòu)域,即多一個CH4結(jié)構(gòu)域。每個結(jié)構(gòu)域由約110個氨基酸組成,氨基酸序列具有相似性,其二級結(jié)構(gòu)是由幾條多肽鏈折疊形成的兩個反向平行的β片層(anti-parallel β sheet)構(gòu)成的,兩個β片層中心的兩個半胱氨酸殘基由一個鏈內(nèi)二硫鍵垂直連接,形成一個“β桶狀(βbarrel)”或“β-三明治 (β sandwich)”結(jié)構(gòu),這種折式稱為免疫球蛋白折疊(immunoglobulin folding)。許多膜型和分泌型的蛋白質(zhì)分子也含有這類獨特折疊的二級結(jié)構(gòu),因此,這類分子被統(tǒng)稱為免疫球蛋白超家族(immunoglobulinsuperfamily,IgSF)??贵w工程可以通過改變抗體的結(jié)構(gòu)和特性來提高其療效和穩(wěn)定性。杭州IgG抗體供應商
抗體還可以通過啟動補體系統(tǒng)引發(fā)炎癥反應,吸引其他免疫細胞前來去除病原體。杭州異種抗體研發(fā)團隊
抗體獨特的生物學活性使其在疾病的診斷、免疫防治及基礎(chǔ)研究中發(fā)揮作重要作用。早在19世紀后期,人們就開始使用特異性抗原免疫動物制備相應的抗血清。1975年,Kohler和Milstein建立了單克隆抗體(monoclonai antibody,mAb)技術(shù),使規(guī)模化制備高特異性、均質(zhì)性抗體成為可能。然而,鼠源性mAb在人體反復免疫后出現(xiàn)的人抗鼠抗體(human anti-mouseantibody,HAMA)很大程度上限制了mAb的臨床應用。近年來,隨著分子生物學的發(fā)展,人們已經(jīng)可以通過抗體工程技術(shù)制備人一鼠嵌合抗體、人源化抗體或人源抗體。杭州異種抗體研發(fā)團隊