免疫動物是用目的抗原免疫小鼠,使小鼠產(chǎn)生致敏B淋巴細(xì)胞的 過程。 一般選用6-8周齡雌性BALB/c小鼠,按照預(yù)先制定的免疫方案進行免疫注射。 抗原通過血液循環(huán)或淋巴循環(huán)進入外周免疫部位,刺激相應(yīng)B淋巴細(xì)胞克隆,使其活化、增殖,并分化成為致敏B淋巴細(xì)胞。細(xì)胞融合采用二氧化碳?xì)怏w處死小鼠,無菌操作取出脾臟,在平皿內(nèi)擠壓研磨,制備脾細(xì)胞懸液。 將準(zhǔn)備好的同系骨髓瘤細(xì)胞與小鼠脾細(xì)胞按一定比例混合,并加入促融合劑聚乙二醇。在聚乙二醇作用下,各種淋巴細(xì)胞可與骨髓瘤細(xì)胞發(fā)生融合,形成雜交瘤細(xì)胞。人體可以通過傳染疾病或接種疫苗來產(chǎn)生特定的抗體。廣州同種抗體
抗體主要功能:啟動補體產(chǎn)生攻膜復(fù)合物使細(xì)胞溶解破壞。人IgG1~3和IgM與相應(yīng)抗原結(jié)合后,可因構(gòu)象改變而使其CH2和CH3結(jié)構(gòu)域內(nèi)的補體結(jié)合點暴露,從而通過經(jīng)典途徑啟動補體系統(tǒng),產(chǎn)生多種效應(yīng)功能,其中IgM、IgG1和IgG3啟動補體系統(tǒng)的能力較強,IgG2較弱。IgA、IgE和IgG4本身難以啟動補體,但在形成聚合物后可通過旁路途徑啟動補體系統(tǒng)。通常情況下,lgD不能啟動補體。調(diào)理吞噬和ADCC:IgG可通過其Fc段與表面具有相應(yīng)受體的細(xì)胞結(jié)合,產(chǎn)生不同的生物學(xué)作用。浙江單克隆抗體費用單克隆抗體藥物已經(jīng)在臨床上取得了明顯的調(diào)理效果。
抗體(antibody,Ab):是由抗原進入機體刺激B細(xì)胞分化增殖為漿細(xì)胞而合成并分泌的一類能與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合并產(chǎn)生免疫效應(yīng)的含有糖基的球蛋白??贵w分布于體液(血液、組織液及粘膜的外分泌液)中,主要存在于血清內(nèi)。1964年世界衛(wèi)生組織召開會議,將具有抗體活性及化學(xué)結(jié)構(gòu)與抗體相似的球蛋白統(tǒng)稱為免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)。免疫球蛋白除分布于體液中之外,還可存在于B細(xì)胞膜上?,F(xiàn)代免疫學(xué)認(rèn)為,抗體與免疫球蛋白是等同的概念;只是抗體側(cè)重于其生物學(xué)活性的描述,而免疫球蛋白側(cè)重強調(diào)其化學(xué)結(jié)構(gòu)。
抗體介導(dǎo)I型超敏反應(yīng)。IgE為親細(xì)胞抗體,可通過其Fc段與肥大細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞表面的IgE高親和力Fc受體結(jié)合,使其致敏。當(dāng)相同的變應(yīng)原再次進入機體時,可以直接與致敏靶細(xì)胞表面的特異性IgE結(jié)合,促使這些細(xì)胞合成和釋放生物活性物質(zhì),引起I型超敏反應(yīng)。在人類,lgG是能夠通過胎盤的抗體。胎盤母體一側(cè)的滋養(yǎng)層細(xì)胞可表達一種特異性的IgG輸送蛋白,稱為FcRn。IgG可選擇性地與FcRn結(jié)合,從而轉(zhuǎn)移到滋養(yǎng)層細(xì)胞內(nèi),并主動進入胎兒的血循環(huán)中。IgG穿過胎盤的作用在于這是一種重要的自然被動免疫機制,對于新生兒抗傳染具有重要意義。另外,sigA可通過呼吸道和消化道的黏膜,在黏膜局部免疫中發(fā)揮重要的免疫防御作用。單克隆抗體可以識別和分離特定的細(xì)胞類型。
血型抗體一般分為二類:天然抗體和免疫抗體,一般天然抗體是IgM,免疫抗體是IgG。①IgM類抗體在鹽水介質(zhì)中能夠凝集具有相應(yīng)抗原的紅細(xì)胞,這類抗體主要是ABO以及P、MN、Lewis抗體,常為天然抗體。能啟動補體,發(fā)生血管內(nèi)溶血。此類抗體不能透過胎盤,且其合理反應(yīng)溫度為4℃ 所以又叫冷抗體。②IgG類抗體多數(shù)情況下在鹽水介質(zhì)中與具有相應(yīng)抗原的紅細(xì)胞不發(fā)生凝集,只有在膠體介質(zhì)、酶或抗球蛋白、凝聚胺介質(zhì)中才發(fā)生凝集,這類抗體主要是Rh、Kidd、Duffy等血型抗體。通常情況通過免疫(輸血、妊娠、部位移植)產(chǎn)生抗體,又稱免疫抗體。多發(fā)生血管外溶血。此類抗體合理反應(yīng)溫度37℃所以又叫溫抗體。單克隆抗體可以用于研究生物學(xué)過程和藥物開發(fā)。南京IgM抗體供應(yīng)商
單克隆抗體的制備要求高精度的實驗操作。廣州同種抗體
抗體特性和功能:IgA分為兩型:血清型為單體,主要存在于血清中,只占血清Ig總量的10%~15%;分泌型IgA(secretory IgA,SIgA)為二聚體,由J鏈連接,含內(nèi)皮細(xì)胞合成的分泌片,經(jīng)分泌性上皮細(xì)胞分泌至外分泌液中。SIgA合成和分泌的部位在腸道、呼吸道、乳腺、唾液腺和淚腺,因此主要存在于胃腸道和支氣管分泌液、初乳、唾液和淚液。SIgA是外分泌液中主要的抗體類別,參與黏膜局部免疫,通過與相應(yīng)病原微生物結(jié)合,阻止病原體黏附到細(xì)胞表面,在局部抗傳染中發(fā)揮重要作用。SIgA在黏膜表面也有中和有害素的作用。新生兒易患呼吸道、胃腸道傳染可能與IgA合成不足有關(guān)。嬰兒可從母親初乳中獲得SIgA,這是一種重要的自然被動免疫過程;廣州同種抗體