抗體的功能與其結(jié)構(gòu)密切相關(guān)。同一抗體的V區(qū)和C區(qū)的氨基酸組成和順序的不同,決定了其功能上的差異。不同抗體的V區(qū)和C區(qū)在結(jié)構(gòu)變化上具有一定的規(guī)律,又使得其在功能上存在共性。V區(qū)和C區(qū)的組成和結(jié)構(gòu),決定了抗體的生物學(xué)功能。識(shí)別并特異性結(jié)合抗原是抗體的主要功能,執(zhí)行該功能的結(jié)構(gòu)是抗體的V區(qū),其中CDR部位在識(shí)別和結(jié)合特異性抗原中起決定性作用??贵w有單體、二聚體和五聚體,因此結(jié)合抗原表位的數(shù)目也不相同。抗體結(jié)合抗原表位的個(gè)數(shù)稱為抗原結(jié)合價(jià)。不同的抗體可以針對(duì)不同的病原體,形成免疫記憶以應(yīng)對(duì)未來(lái)的傳染。山東單克隆抗體供應(yīng)商
抗體可變區(qū):重鏈和輕鏈的V區(qū)分別稱為VH和VL。VH和VL中各含有3個(gè)氨基酸組成和排列順序高度可變的區(qū)域,稱為高變區(qū)(hypervariable region,HVR)或互補(bǔ)決定區(qū)(complementarity determining region,CDR), 包括HVR1(CDR1)、HVR2(CDR2)和HVR3(CDR3),其中,HVR3(CDR3)變化程度更高。VH的3個(gè)高變區(qū)分別位于29~31、49~58和95~102位氨基酸,而VL的3個(gè)高變區(qū)分別位于28~35、49~56和91~98位氨基酸。VH和VL的3個(gè)CDR共同組成Ig的抗原結(jié)合部位(antigen-binding site),決定抗體的特異性,是抗體識(shí)別及結(jié)合抗原的部位。在V區(qū)中,CDR之外區(qū)域的氨基酸組成和排列順序相對(duì)保守,稱為骨架區(qū)(framework region,F(xiàn)R)。VH或VL各有四個(gè)骨架區(qū),分別用FR1、FR2、FR3和FR4表示。安徽異種抗體價(jià)格抗體的半衰期較長(zhǎng),可以在體內(nèi)持續(xù)發(fā)揮作用,保持免疫防御的持久性。
抗體規(guī)律:凡能產(chǎn)生抗體的高等動(dòng)物(包括人類),當(dāng)注入胸腺依賴性抗原(TD抗原)進(jìn)行免疫時(shí)都有著相同產(chǎn)生抗體的規(guī)律,即存在初次免疫應(yīng)答(primary immune response)和再次免疫應(yīng)答(secondary immune response)。初次免疫應(yīng)答是指機(jī)體初次接觸某種抗原物質(zhì)引起特異性抗體產(chǎn)生的過(guò)程。其特點(diǎn)是潛伏期長(zhǎng)(一周以上),產(chǎn)生的抗體滴度(效價(jià))低、維持的時(shí)間短,產(chǎn)生的抗體以IgM為主;再次免疫應(yīng)答是指機(jī)體以后再次接觸同樣的抗原后所產(chǎn)生的抗體應(yīng)答過(guò)程。其特點(diǎn)是產(chǎn)生抗體的潛伏期短、抗體滴度高,維持的時(shí)問(wèn)長(zhǎng),產(chǎn)生的抗體以IgG為主。非胸腺依賴性抗原(TI抗原)引起的體液免疫由于不產(chǎn)生記憶細(xì)胞,因此只有初次免疫應(yīng)答,沒(méi)有再次免疫應(yīng)答。
單克隆抗體是由單一B細(xì)胞克隆產(chǎn)生的高度均一、只針對(duì)某一特定抗原表位的抗體。通常采用雜交瘤技術(shù)來(lái)制備,雜交瘤(hybridoma)抗體技術(shù)是在細(xì)胞融合技術(shù)的基礎(chǔ)上,將具有分泌特異性抗體能力的致敏B細(xì)胞和具有無(wú)限繁殖能力的骨髓瘤細(xì)胞融合為B細(xì)胞雜交瘤。用具備這種特性的單個(gè)雜交瘤細(xì)胞培養(yǎng)成細(xì)胞群,可制備針對(duì)一種抗原表位的特異性抗體,即單克隆抗體。單克隆抗體是人工制備的雜交瘤細(xì)胞生產(chǎn)的,雜交瘤細(xì)胞是由一個(gè)經(jīng)抗原啟動(dòng)后的B細(xì)胞與一個(gè)骨髓瘤細(xì)胞融合形成。單克隆抗體優(yōu)點(diǎn):純度高,靈敏度高,特異性強(qiáng),交叉反應(yīng)少,制備的成本低。缺點(diǎn):對(duì)技術(shù)有一定的要求,而且通過(guò)抗原的化學(xué)處理很容易丟失表位。單克隆抗體可用于針對(duì)惡性癥細(xì)胞的免疫調(diào)理。
單克隆抗體的大量制備主要采用動(dòng)物體內(nèi)誘生法和體外培養(yǎng)法。(1)體內(nèi)誘生法取BALB/c小鼠,首先腹腔注射0.5ml液體石蠟或降植烷進(jìn)行預(yù)處理。1-2周后,腹腔內(nèi)接種雜交瘤細(xì)胞。雜交瘤細(xì)胞在小鼠腹腔內(nèi)增殖,并產(chǎn)生和分泌單克隆抗體。約1-2周,可見(jiàn)小鼠腹部膨大。用注射器抽取腹水,即可獲得大量單克隆抗體。(2)體外培養(yǎng)法將雜交瘤細(xì)胞置于培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)。在培養(yǎng)過(guò)程中,雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生并分泌單克隆抗體,收集培養(yǎng)上清液,離心去除細(xì)胞及其碎片,即可獲得所需要的單克隆抗體。但這種方法產(chǎn)生的抗體量有限。各種新型培養(yǎng)技術(shù)和裝置不斷出現(xiàn),極大提高了抗體的生產(chǎn)量。單克隆抗體的研究有助于解決藥物抗性的問(wèn)題。安徽異種抗體價(jià)格
抗體能識(shí)別特定外來(lái)物的一個(gè)獨(dú)特特征,該外來(lái)目標(biāo)被稱為抗原。山東單克隆抗體供應(yīng)商
免疫動(dòng)物是用目的抗原免疫小鼠,使小鼠產(chǎn)生致敏B淋巴細(xì)胞的 過(guò)程。 一般選用6-8周齡雌性BALB/c小鼠,按照預(yù)先制定的免疫方案進(jìn)行免疫注射。 抗原通過(guò)血液循環(huán)或淋巴循環(huán)進(jìn)入外周免疫部位,刺激相應(yīng)B淋巴細(xì)胞克隆,使其活化、增殖,并分化成為致敏B淋巴細(xì)胞。細(xì)胞融合采用二氧化碳?xì)怏w處死小鼠,無(wú)菌操作取出脾臟,在平皿內(nèi)擠壓研磨,制備脾細(xì)胞懸液。 將準(zhǔn)備好的同系骨髓瘤細(xì)胞與小鼠脾細(xì)胞按一定比例混合,并加入促融合劑聚乙二醇。在聚乙二醇作用下,各種淋巴細(xì)胞可與骨髓瘤細(xì)胞發(fā)生融合,形成雜交瘤細(xì)胞。山東單克隆抗體供應(yīng)商