19世紀(jì)后期,Von Behring及其同事Kitasato研究發(fā)現(xiàn),用白喉或破傷風(fēng)免疫動物后可產(chǎn)生具有中和有害素作用的物質(zhì),稱之為antitoxin,隨后引入“抗體”一詞來泛指抗有害素類物質(zhì)??贵w(antibody,Ab)是B細胞接受抗原刺激后增殖分化為漿細胞所產(chǎn)生的糖蛋白,主要存在于血清等體液中,是介導(dǎo)體液免疫的重要效應(yīng)分子,能與相應(yīng)抗原特異性結(jié)合,發(fā)揮免疫功能。1937年,Tiselius和Kabat用電泳方法將血清蛋白分為白蛋白、α1、α2、β及γ球蛋白等組分,并發(fā)現(xiàn)抗體主要存在于γ區(qū),因此抗體又被稱為γ球蛋白。多克隆抗體具有更普遍的抗原特異性,可以同時識別多個不同的抗原分子。四川自身抗體生產(chǎn)廠家
選擇性培養(yǎng)的目的是篩選融合的雜交瘤細胞,一般采用HAT選擇性培養(yǎng)基。在HAT培養(yǎng)基中,未融合的小鼠骨髓瘤細胞中DNA的從頭合成途徑會被阻止;未融合的骨髓瘤細胞又因缺乏次黃嘌呤-鳥嘌呤-磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶(HGPRT),不能利用補救途徑合成DNA;這樣未融合小鼠骨髓瘤細胞的兩個DNA合成途徑都被阻止,骨髓瘤細胞DNA不能復(fù)制而死亡。 未融合的B淋巴細胞雖具有次黃嘌呤-鳥嘌呤-磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶,但其本身不能在體外長期存活也逐漸死亡。 只有融合的雜交瘤細胞由于從B淋巴細胞獲得了次黃嘌呤-鳥嘌呤-磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶,可以通過補救途徑合成DNA,并具有骨髓瘤細胞能無限增殖的特性,因此,雜交瘤細胞能在HAT培養(yǎng)基中存活和增殖。安徽免疫抗體試劑單克隆抗體是通過從單個抗體細胞中獲得的抗體產(chǎn)生的。
單克隆抗體:通過該技術(shù)融合形成的雜交瘤(hybridoma),既具有骨髓瘤細胞大量擴增和永生的特性,又具有免疫B細胞合成和分泌特異性抗體的能力。每個雜交瘤細胞由一個B細胞融合而成,而每個B細胞克隆只識別一種抗原表位,因此經(jīng)篩選和克隆化的雜交瘤細胞只能合成和分泌識別單一抗原表位的特異性抗體,稱為單克隆抗體。其優(yōu)點是結(jié)構(gòu)均一、純度高、特異性強、效價高、血清交叉反應(yīng)少、制備成本低;缺點是鼠源性mAb對人具有較強的免疫原性,反復(fù)免疫人體后可誘導(dǎo)產(chǎn)生人抗鼠抗體,從而削弱了其作用,甚至導(dǎo)致機體組織細胞的免疫病理損傷,因此需要進一步通過抗體工程技術(shù)制備人一鼠嵌合抗體、人源化抗體或人源抗體。
1975年分子生物學(xué)家G.J.F.克勒和C.米爾斯坦在自然雜交技術(shù)的基礎(chǔ)上,創(chuàng)建了雜交瘤技術(shù),他們把可在體外培養(yǎng)和大量增殖的小鼠骨髓瘤細胞與經(jīng)抗原免疫后的純系小鼠B細胞融合,成為雜交細胞系,既具有瘤細胞易于在體外無限增殖的特性,又具有抗體形成細胞的合成和分泌特異性抗體的特點。將這種雜交瘤作單個細胞培養(yǎng),可形成單細胞系,即單克隆。利用培養(yǎng)或小鼠腹腔接種的方法,便能得到大量的、高濃度的、非常均一的抗體,其結(jié)構(gòu)、氨基酸順序、特異性等都是一致的,而且在培養(yǎng)過程中,只要沒有變異,不同時間所分泌的抗體都能保持同樣的結(jié)構(gòu)與機能。這種單克隆抗體是用其他方法所不能得到的。多克隆抗體可以用于區(qū)分同源蛋白質(zhì)在結(jié)構(gòu)和功能上的差異。
IgE主要來源于呼吸道、消化道黏膜下的漿細胞,是一種親細胞性抗體,與反應(yīng)、寄生蟲病與皮膚過敏有關(guān)。另有一種能與某種過敏原特異性結(jié)合的IgE,稱特異性IgE,對過敏性喘癥的診斷,其特異性強、敏感性高,對尋找變應(yīng)原有重要意義。血清免疫球蛋白E(IgE) 正常值為0.1-0.9mg/L??侷gE強陽性,特異性IgE陰性。異常結(jié)果:血清中過敏原特異性IgE水平只能說明個體對已測過敏原的敏感性。但不能只依靠檢測血清中的過敏原特異性IgE水平,而必須結(jié)合臨床病史和其它診斷手段才能確診過敏癥?!⌒枰獧z查的人群:患者屬過敏性體質(zhì),對過敏原特異性檢測項不敏感。特定的抗體可以用于制備特異性的試劑盒,用于檢測特定病原體或標(biāo)志物。南京新基因PRR11抗體供應(yīng)商
重組抗體技術(shù)使得科學(xué)家能夠定制和改良抗體,以應(yīng)對不同的疾病挑戰(zhàn)。四川自身抗體生產(chǎn)廠家
按抗體產(chǎn)生的來源分為正??贵w(天然抗體),如血型ABO型中的抗A和抗B的抗體,和免疫抗體如抗微生物的抗體。按反應(yīng)抗原的來源分為異種抗體,異嗜性抗體,同種抗體和自身抗體。按抗原反應(yīng)的凝集狀態(tài)分為完全抗體IgM和不完全抗體IgG等??贵w在醫(yī)療實踐中應(yīng)用甚為普遍。如用于疾病的預(yù)防、診斷和調(diào)理方面都有一定的作用。臨床上用丙種球蛋白預(yù)防病毒性肝炎、麻疹、風(fēng)疹等,國際上用抗Rh免疫球蛋白預(yù)防因Rh血型不合引起的溶血癥。診斷上如類風(fēng)濕因子用于類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎,抗核抗體(ANA)、抗DNA抗體用于系統(tǒng)性紅斑狼瘡,抗精子抗體用于原發(fā)性不孕癥的診斷等;調(diào)理上如中毒用抗毒調(diào)理以及免疫缺陷性疾病的調(diào)理等。四川自身抗體生產(chǎn)廠家