19世紀(jì)后期,Von Behring及其同事Kitasato研究發(fā)現(xiàn),用白喉或破傷風(fēng)免疫動(dòng)物后可產(chǎn)生具有中和有害素作用的物質(zhì),稱之為antitoxin,隨后引入“抗體”一詞來泛指抗有害素類物質(zhì)??贵w(antibody,Ab)是B細(xì)胞接受抗原刺激后增殖分化為漿細(xì)胞所產(chǎn)生的糖蛋白,主要存在于血清等體液中,是介導(dǎo)體液免疫的重要效應(yīng)分子,能與相應(yīng)抗原特異性結(jié)合,發(fā)揮免疫功能。1937年,Tiselius和Kabat用電泳方法將血清蛋白分為白蛋白、α1、α2、β及γ球蛋白等組分,并發(fā)現(xiàn)抗體主要存在于γ區(qū),因此抗體又被稱為γ球蛋白。單克隆抗體可以識(shí)別和分離特定的細(xì)胞類型。上海Prestige抗體生產(chǎn)廠家
1937年,Tiselius和Kabat用電泳方法將血清蛋白分為白蛋白、α1、α2、β及γ球蛋白等組分,并發(fā)現(xiàn)抗體主要存在于γ區(qū),因此抗體又被稱為γ球蛋白。隨后,經(jīng)1968年和1972年的世界衛(wèi)生組織和國(guó)際免疫學(xué)會(huì)聯(lián)合會(huì)討論決定,將具有抗體活性或化學(xué)結(jié)構(gòu)與抗體相似的球蛋白統(tǒng)一命名為免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)。Ig可分為分泌型Ig(secreted Ig,SIg)和膜型Ig(membrane Ig,mIg)。SIg主要存在于血液和組織液中,行使抗體的各種功能;mIg主要構(gòu)成B細(xì)胞膜表面的抗原受體。上海Prestige抗體生產(chǎn)廠家多克隆抗體可以用于區(qū)分同源蛋白質(zhì)在結(jié)構(gòu)和功能上的差異。
血型抗體一般分為二類:天然抗體和免疫抗體,一般天然抗體是IgM,免疫抗體是IgG。①IgM類抗體在鹽水介質(zhì)中能夠凝集具有相應(yīng)抗原的紅細(xì)胞,這類抗體主要是ABO以及P、MN、Lewis抗體,常為天然抗體。能啟動(dòng)補(bǔ)體,發(fā)生血管內(nèi)溶血。此類抗體不能透過胎盤,且其合理反應(yīng)溫度為4℃ 所以又叫冷抗體。②IgG類抗體多數(shù)情況下在鹽水介質(zhì)中與具有相應(yīng)抗原的紅細(xì)胞不發(fā)生凝集,只有在膠體介質(zhì)、酶或抗球蛋白、凝聚胺介質(zhì)中才發(fā)生凝集,這類抗體主要是Rh、Kidd、Duffy等血型抗體。通常情況通過免疫(輸血、妊娠、部位移植)產(chǎn)生抗體,又稱免疫抗體。多發(fā)生血管外溶血。此類抗體合理反應(yīng)溫度37℃所以又叫溫抗體。
IgE是什么?與過敏有什么關(guān)系?說IgE之前,我們先來了解一下抗體,它的本質(zhì)是蛋白質(zhì),確切地說,它是一種具有免疫功能的球蛋白,存在于血清、體液、外分泌液和一些細(xì)胞膜上,因此也叫做免疫球蛋白(Immunoglobulin,Ig)。人體至少有5種免疫球蛋白,各自具有不同的免疫學(xué)功能,包括IgM,IgG,IgA,IgD和IgE。其中與過敏關(guān)系密切的是IgE抗體。IgE是Ⅰ型超敏反應(yīng)機(jī)制中重要的免疫分子,自1967年IgE純化以來,血清學(xué)檢測(cè)已成為診斷超敏反應(yīng)疾病常用的檢測(cè)方法。多克隆抗體是一種通過小鼠或其他動(dòng)物產(chǎn)生的抗體,可以與多個(gè)不同的抗原結(jié)合。
選擇性培養(yǎng)的目的是篩選融合的雜交瘤細(xì)胞,一般采用HAT選擇性培養(yǎng)基。在HAT培養(yǎng)基中,未融合的小鼠骨髓瘤細(xì)胞中DNA的從頭合成途徑會(huì)被阻止;未融合的骨髓瘤細(xì)胞又因缺乏次黃嘌呤-鳥嘌呤-磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶(HGPRT),不能利用補(bǔ)救途徑合成DNA;這樣未融合小鼠骨髓瘤細(xì)胞的兩個(gè)DNA合成途徑都被阻止,骨髓瘤細(xì)胞DNA不能復(fù)制而死亡。 未融合的B淋巴細(xì)胞雖具有次黃嘌呤-鳥嘌呤-磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶,但其本身不能在體外長(zhǎng)期存活也逐漸死亡。 只有融合的雜交瘤細(xì)胞由于從B淋巴細(xì)胞獲得了次黃嘌呤-鳥嘌呤-磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶,可以通過補(bǔ)救途徑合成DNA,并具有骨髓瘤細(xì)胞能無限增殖的特性,因此,雜交瘤細(xì)胞能在HAT培養(yǎng)基中存活和增殖。單克隆抗體在惡性癥調(diào)理中具有潛在的應(yīng)用價(jià)值。上海Prestige抗體生產(chǎn)廠家
多克隆抗體可以通過親和層析或凝集素親和純化方法進(jìn)行純化,以獲得較高純度的抗體。上海Prestige抗體生產(chǎn)廠家
抗體J鏈和分泌片:Ig輕鏈和重鏈除上述基本結(jié)構(gòu)外,某些類別的Ig還含有其他輔助成分,如J鏈和分泌片。J鏈(joining chain)是一條富含半胱氨酸的多肽鏈,由漿細(xì)胞合成,其主要功能是將多個(gè)Ig單體連接為多聚體。2個(gè)IgA單體由J鏈相互連接形成二聚體,5個(gè)IgM單體由二硫鍵相互連接,并通過二硫鍵與J鏈連接形成五聚體。IgG、IgD和IgE常為單體,無J鏈。分泌片(secretory piece,SP)又稱為分泌成分(secretory component,SC),是分泌型IgA分子上的一個(gè)輔助成分,為一種含糖的肽鏈,由黏膜上皮細(xì)胞合成和分泌,以非共價(jià)形式結(jié)合于IgA二聚體上,使其成為分泌型IgA(SIgA),并一起被分泌到黏膜表面。分泌片能保護(hù)SIgA的鉸鏈區(qū)不被蛋白水解酶降解。上海Prestige抗體生產(chǎn)廠家