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單克隆抗體的大量制備主要采用動(dòng)物體內(nèi)誘生法和體外培養(yǎng)法。(1)體內(nèi)誘生法取BALB/c小鼠,首先腹腔注射0.5ml液體石蠟或降植烷進(jìn)行預(yù)處理。1-2周后,腹腔內(nèi)接種雜交瘤細(xì)胞。雜交瘤細(xì)胞在小鼠腹腔內(nèi)增殖,并產(chǎn)生和分泌單克隆抗體。約1-2周,可見(jiàn)小鼠腹部膨大。用注射器抽取腹水,即可獲得大量單克隆抗體。(2)體外培養(yǎng)法將雜交瘤細(xì)胞置于培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)。在培養(yǎng)過(guò)程中,雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生并分泌單克隆抗體,收集培養(yǎng)上清液,離心去除細(xì)胞及其碎片,即可獲得所需要的單克隆抗體。但這種方法產(chǎn)生的抗體量有限。各種新型培養(yǎng)技術(shù)和裝置不斷出現(xiàn),極大提高了抗體的生產(chǎn)量。多克隆抗體通常由多個(gè)不同的B細(xì)胞克隆產(chǎn)生,這些細(xì)胞分別產(chǎn)生針對(duì)不同抗原的抗體。深圳免疫抗體怎么購(gòu)買(mǎi)
抗體基本結(jié)構(gòu):經(jīng)x線晶體衍射結(jié)構(gòu)分析發(fā)現(xiàn),Ig由四條多肽鏈組成,各肽鏈之間由數(shù)量不等的鏈間二硫鍵連接。Ig可形成“Y”字型結(jié)構(gòu),稱(chēng)為Ig單體,是構(gòu)成抗體的基本單位。天然Ig分子含有四條異源性多肽鏈,其中,分子量較大的兩條鏈稱(chēng)為重鏈(heavy chain,H),而分子量較小的兩條鏈稱(chēng)為輕鏈(Light chain,L)。同一Ig分子中的兩條H鏈和兩條L鏈的氨基酸組成完全相同。重鏈分子量為50 000~75 000,由450~550個(gè)氨基酸殘基組成。重鏈恒定區(qū)的氨基酸組成和排列順序不同,其抗原性也不同。廣東自身抗體多克隆抗體可以通過(guò)親和層析或凝集素親和純化方法進(jìn)行純化,以獲得較高純度的抗體。
研究表明,孕婦血型及其血清中免疫抗體效價(jià)與新生兒溶血病的發(fā)生之間存在相關(guān)性。新生兒溶血病是母嬰血型不合而引起的新生兒被動(dòng)免疫性溶血性疾病,以ABO血型系統(tǒng)很常見(jiàn),其次是Rh血型系統(tǒng)。ABO血型抗體是以IgM抗體為主,而此類(lèi)抗體是不能透過(guò)胎盤(pán)的,但血液中還有少量血型抗體以IgM和IgA的形式存在,O型血人的抗-A、抗-B抗體部分以IgG類(lèi)抗體存在,由于IgG抗體能夠透過(guò)胎盤(pán)與胎兒的紅細(xì)胞發(fā)生凝集反應(yīng)導(dǎo)致紅細(xì)胞破壞。病情嚴(yán)重者可導(dǎo)致早產(chǎn)、流產(chǎn)及死胎等。而孕婦產(chǎn)前血清免疫抗體效價(jià)檢測(cè)能夠及早發(fā)現(xiàn)不規(guī)則抗體及異??贵w效價(jià)等,從而可以及時(shí)有效的給予對(duì)癥調(diào)理。
抗體獨(dú)特的生物學(xué)活性使其在疾病的診斷、免疫防治及基礎(chǔ)研究中發(fā)揮作重要作用。早在19世紀(jì)后期,人們就開(kāi)始使用特異性抗原免疫動(dòng)物制備相應(yīng)的抗血清。1975年,Kohler和Milstein建立了單克隆抗體(monoclonai antibody,mAb)技術(shù),使規(guī)模化制備高特異性、均質(zhì)性抗體成為可能。然而,鼠源性mAb在人體反復(fù)免疫后出現(xiàn)的人抗鼠抗體(human anti-mouseantibody,HAMA)很大程度上限制了mAb的臨床應(yīng)用。近年來(lái),隨著分子生物學(xué)的發(fā)展,人們已經(jīng)可以通過(guò)抗體工程技術(shù)制備人一鼠嵌合抗體、人源化抗體或人源抗體。多克隆抗體適用于各種實(shí)驗(yàn)和臨床應(yīng)用,如免疫染色、免疫印跡、流式細(xì)胞術(shù)等。
19世紀(jì)后期,Von Behring及其同事Kitasato研究發(fā)現(xiàn),用白喉或破傷風(fēng)免疫動(dòng)物后可產(chǎn)生具有中和有害素作用的物質(zhì),稱(chēng)之為antitoxin,隨后引入“抗體”一詞來(lái)泛指抗有害素類(lèi)物質(zhì)。抗體(antibody,Ab)是B細(xì)胞接受抗原刺激后增殖分化為漿細(xì)胞所產(chǎn)生的糖蛋白,主要存在于血清等體液中,是介導(dǎo)體液免疫的重要效應(yīng)分子,能與相應(yīng)抗原特異性結(jié)合,發(fā)揮免疫功能。1937年,Tiselius和Kabat用電泳方法將血清蛋白分為白蛋白、α1、α2、β及γ球蛋白等組分,并發(fā)現(xiàn)抗體主要存在于γ區(qū),因此抗體又被稱(chēng)為γ球蛋白。多克隆抗體的結(jié)合位點(diǎn)通常存在多種結(jié)合位點(diǎn),可以有不同的結(jié)合特異性。湖北多克隆抗體供應(yīng)商
單克隆抗體可用于針對(duì)惡性癥細(xì)胞的免疫調(diào)理。深圳免疫抗體怎么購(gòu)買(mǎi)
單克隆抗體:通過(guò)該技術(shù)融合形成的雜交瘤(hybridoma),既具有骨髓瘤細(xì)胞大量擴(kuò)增和永生的特性,又具有免疫B細(xì)胞合成和分泌特異性抗體的能力。每個(gè)雜交瘤細(xì)胞由一個(gè)B細(xì)胞融合而成,而每個(gè)B細(xì)胞克隆只識(shí)別一種抗原表位,因此經(jīng)篩選和克隆化的雜交瘤細(xì)胞只能合成和分泌識(shí)別單一抗原表位的特異性抗體,稱(chēng)為單克隆抗體。其優(yōu)點(diǎn)是結(jié)構(gòu)均一、純度高、特異性強(qiáng)、效價(jià)高、血清交叉反應(yīng)少、制備成本低;缺點(diǎn)是鼠源性mAb對(duì)人具有較強(qiáng)的免疫原性,反復(fù)免疫人體后可誘導(dǎo)產(chǎn)生人抗鼠抗體,從而削弱了其作用,甚至導(dǎo)致機(jī)體組織細(xì)胞的免疫病理?yè)p傷,因此需要進(jìn)一步通過(guò)抗體工程技術(shù)制備人一鼠嵌合抗體、人源化抗體或人源抗體。深圳免疫抗體怎么購(gòu)買(mǎi)