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抗體胃蛋白酶作用于鉸鏈區(qū)二硫鍵所連接的兩條重鏈的近c端,水解Ig后可獲得一個F(ab’)2片段和一些小片段pFc’。F(ab’)2是由兩個Fab段及鉸鏈區(qū)組成,由于Ig分子的兩個臂仍由二硫鍵連接,因此F(ab’)2片段為雙價,可同時結(jié)合兩個抗原表位,與抗原結(jié)合可發(fā)生凝集反應(yīng)和沉淀反應(yīng)。由于F(ab’)2片段既保留了結(jié)合相應(yīng)抗原的生物學(xué)活性,又避免了Fc段免疫原性可能引起的副作用,因而被普遍用于制備生物制品,如白喉抗有害素、破傷風(fēng)抗有害素均是經(jīng)胃蛋白酶消化后精制提純的生物制品。胃蛋白酶水解Ig后所產(chǎn)生的pFc 7然后被降解,無生物學(xué)作用 。多克隆抗體的制備過程需要嚴(yán)格的動物倫理管理,確保動物的福利。上海異嗜性抗體
抗體的多樣性:每種基因片段是以多拷貝的形式存在,其中編碼重鏈V區(qū)的VH、DH和JH的基因片段數(shù)分別為50、23和6個;編碼K輕鏈V區(qū)的Vx和JK基因片段數(shù)分別為60和5個,編碼入輕鏈V區(qū)的VX和J入基因片段數(shù)分別為30和7個。這些基因在胚系階段以分隔的形式存在。在B細(xì)胞的分化發(fā)育過程中,這些基因片段發(fā)生重排和組合,從而產(chǎn)生數(shù)量巨大、能識別特異性抗原的BCR。每種具有特異性BCR的B細(xì)胞克隆可識別相應(yīng)的抗原,產(chǎn)生一種特異性抗體。Ig基因重組是B細(xì)胞合成無數(shù)特異性抗體的主要原因。上海異嗜性抗體單克隆抗體可以用于研究疾病的發(fā)病機(jī)制。
抗體介導(dǎo)I型超敏反應(yīng)。IgE為親細(xì)胞抗體,可通過其Fc段與肥大細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞表面的IgE高親和力Fc受體結(jié)合,使其致敏。當(dāng)相同的變應(yīng)原再次進(jìn)入機(jī)體時,可以直接與致敏靶細(xì)胞表面的特異性IgE結(jié)合,促使這些細(xì)胞合成和釋放生物活性物質(zhì),引起I型超敏反應(yīng)。在人類,lgG是能夠通過胎盤的抗體。胎盤母體一側(cè)的滋養(yǎng)層細(xì)胞可表達(dá)一種特異性的IgG輸送蛋白,稱為FcRn。IgG可選擇性地與FcRn結(jié)合,從而轉(zhuǎn)移到滋養(yǎng)層細(xì)胞內(nèi),并主動進(jìn)入胎兒的血循環(huán)中。IgG穿過胎盤的作用在于這是一種重要的自然被動免疫機(jī)制,對于新生兒抗傳染具有重要意義。另外,sigA可通過呼吸道和消化道的黏膜,在黏膜局部免疫中發(fā)揮重要的免疫防御作用。
由雜交瘤單細(xì)胞克隆所產(chǎn)生的單克隆抗體只能特異性地與抗原分子上的一個抗原決定簇結(jié)合,抗體成分均一,抗體的結(jié)構(gòu)、氨基酸順序、特異性等都是一致的,且在培養(yǎng)過程中只要不發(fā)生變異,不同時間內(nèi)分泌的抗體都能保持同樣的結(jié)構(gòu)和功能。用這種技術(shù)可按需要生產(chǎn)大量很純的單一抗體,這些是用普通血清學(xué)方法所不能達(dá)到的。單克隆抗體的發(fā)展經(jīng)歷了鼠源性單克隆抗體、嵌合性單克隆抗體、人源化單克隆抗體和全人源單克隆抗體四個階段。特別是全人源單克隆抗體,其可變區(qū)和恒定區(qū)都是人源的,這類抗體藥物具有高親和力、高特異性、幾乎沒有毒副作用等優(yōu)點,克服了動物源抗體及嵌合抗體的各種缺點,成為調(diào)理性抗體藥物發(fā)展的必然趨勢;多克隆抗體可以用于區(qū)分同源蛋白質(zhì)在結(jié)構(gòu)和功能上的差異。
1937年,Tiselius和Kabat用電泳方法將血清蛋白分為白蛋白、α1、α2、β及γ球蛋白等組分,并發(fā)現(xiàn)抗體主要存在于γ區(qū),因此抗體又被稱為γ球蛋白。隨后,經(jīng)1968年和1972年的世界衛(wèi)生組織和國際免疫學(xué)會聯(lián)合會討論決定,將具有抗體活性或化學(xué)結(jié)構(gòu)與抗體相似的球蛋白統(tǒng)一命名為免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)。Ig可分為分泌型Ig(secreted Ig,SIg)和膜型Ig(membrane Ig,mIg)。SIg主要存在于血液和組織液中,行使抗體的各種功能;mIg主要構(gòu)成B細(xì)胞膜表面的抗原受體。單克隆抗體可以用于診斷和調(diào)理多種疾病。成都多克隆抗體試劑
多克隆抗體適用于各種實驗和臨床應(yīng)用,如免疫染色、免疫印跡、流式細(xì)胞術(shù)等。上海異嗜性抗體
抗體規(guī)律:凡能產(chǎn)生抗體的高等動物(包括人類),當(dāng)注入胸腺依賴性抗原(TD抗原)進(jìn)行免疫時都有著相同產(chǎn)生抗體的規(guī)律,即存在初次免疫應(yīng)答(primary immune response)和再次免疫應(yīng)答(secondary immune response)。初次免疫應(yīng)答是指機(jī)體初次接觸某種抗原物質(zhì)引起特異性抗體產(chǎn)生的過程。其特點是潛伏期長(一周以上),產(chǎn)生的抗體滴度(效價)低、維持的時間短,產(chǎn)生的抗體以IgM為主;再次免疫應(yīng)答是指機(jī)體以后再次接觸同樣的抗原后所產(chǎn)生的抗體應(yīng)答過程。其特點是產(chǎn)生抗體的潛伏期短、抗體滴度高,維持的時問長,產(chǎn)生的抗體以IgG為主。非胸腺依賴性抗原(TI抗原)引起的體液免疫由于不產(chǎn)生記憶細(xì)胞,因此只有初次免疫應(yīng)答,沒有再次免疫應(yīng)答。上海異嗜性抗體