選擇性培養(yǎng)的目的是篩選融合的雜交瘤細(xì)胞,一般采用HAT選擇性培養(yǎng)基。在HAT培養(yǎng)基中,未融合的小鼠骨髓瘤細(xì)胞中DNA的從頭合成途徑會(huì)被阻止;未融合的骨髓瘤細(xì)胞又因缺乏次黃嘌呤-鳥嘌呤-磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶(HGPRT),不能利用補(bǔ)救途徑合成DNA;這樣未融合小鼠骨髓瘤細(xì)胞的兩個(gè)DNA合成途徑都被阻止,骨髓瘤細(xì)胞DNA不能復(fù)制而死亡。 未融合的B淋巴細(xì)胞雖具有次黃嘌呤-鳥嘌呤-磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶,但其本身不能在體外長(zhǎng)期存活也逐漸死亡。 只有融合的雜交瘤細(xì)胞由于從B淋巴細(xì)胞獲得了次黃嘌呤-鳥嘌呤-磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶,可以通過(guò)補(bǔ)救途徑合成DNA,并具有骨髓瘤細(xì)胞能無(wú)限增殖的特性,因此,雜交瘤細(xì)胞能在HAT培養(yǎng)基中存活和增殖。多克隆抗體的希望主要集中于富集特定細(xì)胞亞群,開發(fā)更多臨床應(yīng)用。安徽IgD抗體費(fèi)用
抗體的多樣性:每種基因片段是以多拷貝的形式存在,其中編碼重鏈V區(qū)的VH、DH和JH的基因片段數(shù)分別為50、23和6個(gè);編碼K輕鏈V區(qū)的Vx和JK基因片段數(shù)分別為60和5個(gè),編碼入輕鏈V區(qū)的VX和J入基因片段數(shù)分別為30和7個(gè)。這些基因在胚系階段以分隔的形式存在。在B細(xì)胞的分化發(fā)育過(guò)程中,這些基因片段發(fā)生重排和組合,從而產(chǎn)生數(shù)量巨大、能識(shí)別特異性抗原的BCR。每種具有特異性BCR的B細(xì)胞克隆可識(shí)別相應(yīng)的抗原,產(chǎn)生一種特異性抗體。Ig基因重組是B細(xì)胞合成無(wú)數(shù)特異性抗體的主要原因。合肥PRR11抗體公司排行單克隆抗體可以識(shí)別和分離特定的細(xì)胞類型。
抗體水解片段:在一定條件下,Ig分子肽鏈的某些部分易被蛋白酶水解為不同片段。木瓜蛋白酶(papain)和胃蛋白酶(pepsin)是很常用的兩種Ig蛋白水解酶,并可籍此研究Ig的結(jié)構(gòu)和功能,分離和純化特定的12多肽片段。木瓜蛋白酶水解Ig的部位是在鉸鏈區(qū)二硫鍵連接的兩條重鏈的近N端,可將Ig裂解為兩個(gè)完全相同的Fab段和一個(gè)Fc段。Fab段即抗原結(jié)合片段(fragment antigenbinding,F(xiàn)ab),由一條完整的輕鏈與重鏈的VH和CHl結(jié)構(gòu)域組成。一個(gè)Fab片段為單價(jià),可與抗原結(jié)合但不產(chǎn)生凝集反應(yīng)或沉淀反應(yīng);Fc段即可結(jié)晶片段(fragment crystallizable,F(xiàn)c),由Ig的CH2和CH3結(jié)構(gòu)域組成。Fc段無(wú)抗原結(jié)合活性,是Ig與效應(yīng)分子或細(xì)胞相互作用的部位。
IgE是什么?與過(guò)敏有什么關(guān)系?IgE是如何參與過(guò)敏反應(yīng):IgE我們可以把它看做免疫系統(tǒng)的“守門員”。過(guò)敏體質(zhì)的人在初次接觸外界環(huán)境中的某過(guò)敏原時(shí),免疫系統(tǒng)會(huì)“誤判”把這種過(guò)敏物質(zhì)當(dāng)做外來(lái)“入侵者”,身體就產(chǎn)生能夠識(shí)別此過(guò)敏原的IgE抗體(特異性IgE),就像給過(guò)敏原打上了“壞蛋”標(biāo)簽,使它們下次可以識(shí)別到該過(guò)敏原。IgE的尾巴則和效應(yīng)細(xì)胞(肥大細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞)粘住。上述過(guò)程稱為“致敏”。游離狀態(tài)的IgE抗體半衰期是2-3天,如果長(zhǎng)期不接觸變應(yīng)原,致敏狀態(tài)可逐漸消失。多克隆抗體可以用于檢測(cè)特定蛋白質(zhì)在不同組織和細(xì)胞中的表達(dá)情況。
抗體J鏈和分泌片:Ig輕鏈和重鏈除上述基本結(jié)構(gòu)外,某些類別的Ig還含有其他輔助成分,如J鏈和分泌片。J鏈(joining chain)是一條富含半胱氨酸的多肽鏈,由漿細(xì)胞合成,其主要功能是將多個(gè)Ig單體連接為多聚體。2個(gè)IgA單體由J鏈相互連接形成二聚體,5個(gè)IgM單體由二硫鍵相互連接,并通過(guò)二硫鍵與J鏈連接形成五聚體。IgG、IgD和IgE常為單體,無(wú)J鏈。分泌片(secretory piece,SP)又稱為分泌成分(secretory component,SC),是分泌型IgA分子上的一個(gè)輔助成分,為一種含糖的肽鏈,由黏膜上皮細(xì)胞合成和分泌,以非共價(jià)形式結(jié)合于IgA二聚體上,使其成為分泌型IgA(SIgA),并一起被分泌到黏膜表面。分泌片能保護(hù)SIgA的鉸鏈區(qū)不被蛋白水解酶降解。單克隆抗體的研究有助于發(fā)展更有效的藥物調(diào)理方案。成都免疫抗體補(bǔ)給公司
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抗體的功能與其結(jié)構(gòu)密切相關(guān)。同一抗體的V區(qū)和C區(qū)的氨基酸組成和順序的不同,決定了其功能上的差異。不同抗體的V區(qū)和C區(qū)在結(jié)構(gòu)變化上具有一定的規(guī)律,又使得其在功能上存在共性。V區(qū)和C區(qū)的組成和結(jié)構(gòu),決定了抗體的生物學(xué)功能。識(shí)別并特異性結(jié)合抗原是抗體的主要功能,執(zhí)行該功能的結(jié)構(gòu)是抗體的V區(qū),其中CDR部位在識(shí)別和結(jié)合特異性抗原中起決定性作用??贵w有單體、二聚體和五聚體,因此結(jié)合抗原表位的數(shù)目也不相同??贵w結(jié)合抗原表位的個(gè)數(shù)稱為抗原結(jié)合價(jià)。安徽IgD抗體費(fèi)用