試劑抗干擾作用的合理性有些液體雙試劑,其實質(zhì)并不真正具備抗干擾的能力而只是解決了試劑的液體化和穩(wěn)定性問題。如,ALT檢測試劑盒中,NADH在pH7.5~7.8水溶液中極不穩(wěn)定,在pH>8.7時才能穩(wěn)定保存。因此,為了保證試劑穩(wěn)定性,液體雙試劑的R1需要維持pH>8.7,但此時LDH活性很大程度下降,就失去消除內(nèi)源性酸的功能,只有加入試劑R2后,反應(yīng)混合液的pH下降至LDH適pH,在經(jīng)過延遲時間60 S后,才能消除內(nèi)源性酸的干擾。再如,Tfinder反應(yīng)中抗Vc干擾問題:由于維生素c易氧化,樣品中Vc會競爭反應(yīng)生成的過氧化氫,而產(chǎn)生負(fù)干擾。因此,在試劑R1中加入抗壞血酸氧化酶,這種方法是有效的,但不一定有很大的意義。檢測試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用。pH標(biāo)準(zhǔn)緩沖粉劑(pH=7.41)
兩性霉素B溶液(10mg/ml):注意事項:兩性霉素B作用原理在于其與菌類細(xì)胞膜上的Ergosterol結(jié)合導(dǎo)致細(xì)胞膜通透性發(fā)生變化,使菌類細(xì)胞內(nèi)鉀離子、氨基酸通透到到膜外,破壞菌類正常代謝,進而使菌類細(xì)胞死亡。儲存條件:4℃,避光,12個月。兩性霉素B又稱廬山霉素,是從鏈霉菌(Streptomycesnodosus)的培養(yǎng)液中分離而得的一種多烯類克菌類,其抑菌機制是能與菌類細(xì)胞膜上的麥角甾醇結(jié)合,導(dǎo)致細(xì)胞膜受損,通透性提高,細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)外漏,破壞正常代謝而起抑菌作用。細(xì)菌因其細(xì)胞膜上不含麥角甾醇成分,故無效。兩性霉素B克菌類譜廣,幾乎對絕大部分菌類均有效,耐藥菌株少見,高濃度時呈殺菌作用。兩性霉素B溶液在室溫不穩(wěn)定,易被光、熱和酸破壞,在pH6.0~7.5下克菌作用很好。鹽酸強力霉素溶液(Doxycycline,50mg/ml)外用液體試劑系指藥物與適宜的溶劑或分散介質(zhì)制成的。
SDS-EDTA 染料混合液(2.5×) 簡介: SDS-EDTA 染料混合液(2.5×)是一種以溴酚藍為染料的 2.5 倍濃縮的蛋白上樣緩沖液, 主要由 SDS、溴酚藍、EDTA、蔗糖等組成,可用于蛋白上樣。 組成: 編號 名稱 PE0010 5ml Storage SDS-EDTA 染料混合液(2.5×) 使用說明書 4℃ 1份 操作步驟(光供參考): 1、 取適量的蛋白樣品和 SDS-EDTA 染料混合液(2.5×)混合,充分混勻。 2、 直接上樣到 SDS-PAGE 膠加樣孔內(nèi)即可。 3、 通常電泳至藍色染料到達 PAGE 膠的底部附近即可停止。 注意事項: 1、 SDS-EDTA 染料混合液(2.5×)中不含β-巰基乙醇。 2、 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。 有效期: 12 個月有效。亦可室溫短期保存。
氨芐青霉素為白色晶體或粉末,分子式是C16H19N3O4S,分子量為349.41。溶于稀酸和稀堿,微溶于水和甲醇,幾乎不溶于氯仿、96%乙醇、、乙酸乙酯和固定油。無臭,味苦??垢锾m氏陽性及陰性菌,用于分子生物學(xué)和組織培養(yǎng)(防止微生物污染和抗性篩選)。氨芐青霉素時常被用于分子生物學(xué)上,作為細(xì)菌(如大腸桿菌)吸收基因(如質(zhì)粒)的測試。測試會將一組基因,連同已編碼抗氨芐青霉素的基因插入細(xì)菌中。該細(xì)菌會被放于充滿氨芐青霉素的環(huán)境下培育,直至成功制造卞所需的基因。檢測試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡20分鐘。
測定血清中的某些酶,如CK,離體(采集血液)后很容易失活。失活的原因是酶活性中心的活性基因巰基(一SH)被氧化造成的。只有通過適當(dāng)?shù)倪€原作用才能重新開始。如CK—NAC檢測試劑盒即含有CK活化劑,名為N一乙酰半胱氨酸。實驗研究證明,NAC對血清中已失活的CK活化過程約需180 S。這就是CK測定為什么要延遲時間較長的理論依據(jù)。在AST,ALT采用IFCC推薦方法測定時需要磷酸吡哆醛預(yù)活化。需要強調(diào):含有活化劑的生化試劑,其測定酶活性的結(jié)果要高些。ELISA檢測試劑盒是用于體外定性檢測人血清或血漿中的抗人類戊型肝炎病毒抗體ELISA檢測。pH標(biāo)準(zhǔn)緩沖粉劑(pH=7.41)
科研實驗中試劑取用應(yīng)注意事項:滴瓶上的滴管不能用水沖洗,也不能交叉使用。pH標(biāo)準(zhǔn)緩沖粉劑(pH=7.41)
嚴(yán)控反應(yīng)時間。反應(yīng)時間過長,酶失活;反應(yīng)時間過短,酶結(jié)合物不能與血清中的微生物抗原抗體充分結(jié)合,生成物結(jié)構(gòu)松散不牢固,容易洗掉,都可能造成假陰性。注意檢測試劑盒保存期,過保存期的試劑不能使用。評估試劑的實用性。試劑的穩(wěn)定與否,對準(zhǔn)確率的高低到頭重要。在試劑啟用前,應(yīng)進行陰、陽對照及樣品反復(fù)比照試驗,判定試劑符合要求后方可使用。嚴(yán)格掌握顯色時間。顯色時間過短,加入終止液反應(yīng)終止后,底物結(jié)合物的量過少,易出現(xiàn)假陰性。超過顯色要求時間后顯色,應(yīng)判為假陽性,這可能與試劑本身有關(guān)。加顯色劑后立即顯色,不可報陽性,這可能是本底顯色的結(jié)果。pH標(biāo)準(zhǔn)緩沖粉劑(pH=7.41)
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