液體培養(yǎng)基接種向肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基中接種少量菌體時(shí),其操作步驟基本與斜面接種時(shí)相同,不同之處是挑取菌體的接種環(huán)放入液體培養(yǎng)基后,應(yīng)在液體表面處的管內(nèi)壁上輕輕磨擦,使菌體從環(huán)上脫落,混進(jìn)液體培養(yǎng)基,塞好試管塞后,搖動(dòng)液體,使菌體在液體中分布均勻,或用試管振蕩器混勻。向液體培養(yǎng)基中接種量大或要求定量接種時(shí),可將無(wú)菌水或液體培養(yǎng)基注入菌種試管,用接種環(huán)將菌苔刮下,再將菌種懸液以無(wú)菌吸管定量吸出加入,或直接倒入液體培養(yǎng)基。如果菌種為液體培養(yǎng)物,則可用無(wú)菌吸管定量吸出加入或直接倒入液體培養(yǎng)基。整個(gè)接種過(guò)程都要求無(wú)菌操作。殺滅曲線的建立:每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。DNS試劑(Ghose法)
取用液體試劑時(shí)要注意什么?從滴瓶中取用液體試劑時(shí),要用滴瓶中的滴管,滴管決不能伸入所用的容器中,以免接觸器壁而沾污藥品。如用滴管從試劑瓶中取少量液體試劑時(shí),則需用附于該試劑瓶的專門(mén)滴管取用。裝有藥品的滴管不得橫置或滴管口向上斜放,以免液體流入滴管的橡皮頭中。從細(xì)口瓶中取用液體試劑時(shí),用傾注法。先將瓶塞取下,反放在桌面上,手握住試劑瓶上貼標(biāo)簽的一面,逐漸傾斜瓶子,讓試劑沿著潔凈的試管壁流入試管或沿著潔凈的玻璃棒注入燒杯中。注出所需量后,將試劑瓶口在容器上靠一下,再逐漸豎起瓶子,以免遺留在瓶口的液滴流到瓶的外壁。DNS試劑(Ghose法)科研實(shí)驗(yàn)中試劑取用應(yīng)注意事項(xiàng):取液后的滴管,應(yīng)保持橡膠膠帽在上,不要平放或倒置。
BMC原代分離步驟:1) 抽取人的外周血于肝素抗凝管中,取足5mL新鮮血液,加入PBS按1:1稀釋血液(一般**管2mL+2mL)。2) 取淋巴細(xì)胞分離液5mL于15mL滅菌離心管中待用。3) 吸取稀釋血液,在離分層液上方1cm處,沿試管壁徐徐加入,使稀釋血液重疊于分層液上,并與分離液形成明顯界面。4) 室溫,離心2000rpm,20min。此時(shí)離心管中形成5層:較上面是血漿,血漿層和淋巴細(xì)胞分離液之間是淋巴細(xì)胞層呈白膜狀。5) 小心吸取中間呈白膜狀的單個(gè)核細(xì)胞層,盡量全部吸出單個(gè)核細(xì)胞。加5倍以上體積的PBS洗2次,每次離心1500rpm,10min。
怎樣減少檢測(cè)試劑盒誤差?檢驗(yàn)技師應(yīng)具備從事實(shí)驗(yàn)室操作的基本素質(zhì)和實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)。能熟練操作實(shí)驗(yàn)儀器、器械,具有一定總結(jié)和分析問(wèn)題的能力,對(duì)實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)的意外情況能及時(shí)妥善解決。使用校對(duì)過(guò)的微量移液器,排除自然誤差。移液器準(zhǔn)確與否對(duì)定量檢測(cè)尤為重要。仔細(xì)閱讀說(shuō)明書(shū),嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)要求進(jìn)行規(guī)范化操作。不同批號(hào)的試劑不可混用。值得改進(jìn)的地方,反復(fù)試驗(yàn)確定成立后才能改進(jìn)。洗滌徹底,如若洗板不徹底,酶結(jié)合物本底顯色會(huì)呈現(xiàn)假陽(yáng)性。洗滌液要新鮮,現(xiàn)用現(xiàn)配,陳舊的洗滌液會(huì)出現(xiàn)本底增高現(xiàn)象,也可能出現(xiàn)假陽(yáng)性。檢測(cè)試劑盒要留心避免出現(xiàn)嚴(yán)峻溶血。
PCR檢測(cè)試劑盒簡(jiǎn)介:耐熱聚合酶PCR技術(shù)為綜合了兩項(xiàng)技術(shù)的實(shí)用性極強(qiáng)的DNA體外復(fù)制技術(shù).1、DNA模板與引物間的熱變性與復(fù)性技術(shù);實(shí)現(xiàn)在成千上萬(wàn)的DNA序列中尋找鎖定目標(biāo)片段位置。2、耐熱DNA聚合酶技術(shù);實(shí)現(xiàn)耐受高溫并對(duì)鎖定位置的DNA的快速準(zhǔn)確的聚合。為了滿足教學(xué)和科研的要求,本公司為您提供了可以擴(kuò)增特定大小產(chǎn)物的PCR反應(yīng)檢測(cè)試劑盒。包括500bp~1000bp大小的PCR產(chǎn)物。本檢測(cè)試劑盒含有完成PCR反應(yīng)的全部試劑。提供清晰準(zhǔn)確的PCR擴(kuò)增效果,確保實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行。該反應(yīng)體系中Taq DNA聚合酶的*延伸溫度為70~75℃。Taq酶的延伸速度為1~2 kb/min。ELISA檢測(cè)試劑盒是用于體外定性檢測(cè)人血清或血漿中的抗人類戊型肝炎病毒抗體ELISA檢測(cè)。Heidenhain鐵蘇木素染色液
一般植物細(xì)胞篩選濃度在 20~200μ g/ml,動(dòng)物細(xì)胞篩選濃度 50~1000μ g/ml。DNS試劑(Ghose法)
用液體試劑時(shí)要注意什么?在試管里進(jìn)行某些實(shí)驗(yàn)時(shí),取試劑不需要準(zhǔn)確用量,只要學(xué)會(huì)估計(jì)取用液體的量即可。例如用滴管取用液體,lmL相當(dāng)多少滴,5mL液體占一個(gè)試管容量的幾分之幾等。倒入試管里溶液的量,一般不超過(guò)其容積的1/3。定量取用液體時(shí),用量筒或移液管。量筒用于量度一定體積的液體,可根據(jù)需要選用不同容量的量筒。量取液體后讀數(shù)時(shí),要使視線與量筒內(nèi)液體的彎月面的低處保持水平,偏高或偏低都會(huì)讀不準(zhǔn)而造成較大的誤差。DNS試劑(Ghose法)