DC細胞誘導：1) 將收集的PBMC在1640培養(yǎng)基，在37 ℃、5 % CO2條件下在培養(yǎng)板培養(yǎng)4h。2) 輕輕吸取上清，收集貼壁細胞，加入含15%血清，100ng/ml rhGM-CSF、100ng/ml rhIL-4的1640培養(yǎng)基，培養(yǎng)5～7d獲得未成熟DC，用25ng/ml hTNF-α刺激2～3天，獲得成熟DC。3) 用倒置顯微鏡觀察細胞形態(tài)，至細胞毛刺樣突起，有典型DC形態(tài)懸浮細胞。注意事項：細胞較好在細胞貼壁注：分離后細胞較好在貼壁后當天換液（貼壁細胞貼壁能力很弱，潤洗時輕柔），過夜后部分細胞漂浮，細胞得率減少?？蒲袑嶒炛性噭┤∮脩⒁馐马棧阂暰€與量筒內液體的凹液面的低處保持水平。磷脂鐵蘇木素(FeH)染色液

如何正確保存和使用pH緩沖溶液：緩沖溶液配制后，應裝在玻璃瓶或聚乙烯瓶中（堿性pH緩沖液，如，pH=9.18、pH=10.01、pH=12.46等，應裝在聚乙烯瓶中）瓶蓋嚴密蓋緊，在冰箱中低溫(5～10℃)保存，一般可使用六個月左右，如發(fā)現有混頻器濁，發(fā)霉或沉淀現象，不能繼續(xù)使用。使用時，應準備幾個50mL的聚乙烯小瓶，將大瓶中的組沖溶液倒入小瓶中，并在環(huán)境溫度下放置1～2個小時，等溫度平衡后再使用。使用后不得再倒入大瓶中，以免污染，瓶中的緩沖溶液在＞10℃的環(huán)境條件下可以使用2～3天，一般pH=7.00、pH=6.86、pH=14.00三種溶液使用時間可以長一些，pH=9.18和pH=10.01溶液由于吸收空氣中的二氧化碳，其pH值比較容易變化。標準葡萄糖溶液(1mg/ml)pH緩沖溶液有何用途：檢查儀器顯示值和標準溶液的pH值是否一致。

使用方法：1， 固定細胞或組織樣品，經過固定后，適當洗滌除去固定劑。如果需要進行免疫熒光染色，可先進行免疫熒光染色，染完畢后再進行染色。如果不需要進行其它染色，則直接進行染色。 2， 對于貼壁細胞或組織切片，加入少量染色液，覆蓋住樣品即可。對于懸浮細胞，至少加入待染色樣品體積 3 倍的染色液，混勻。 3， 室溫染色 5-10 分鐘。 4， 吸除染色液，生理鹽水洗滌 2-3 次，每次 3-5 分鐘。 5， 置于熒光顯微鏡下觀察，激發(fā)波長 360-400nm。 溶液注意事項： dapi 被普遍認為具有致性，操作時應戴手套，并避免交叉污染。 本產品需避光，并盡量避免反復凍融。熒光染料都存在淬滅問題，建議染色后盡量當天完成檢測。 為減緩熒光淬滅可以使用抗熒光衰減封片劑。

液體固體試劑正確取用試劑的方法過程：液體試劑的取用方法試劑瓶取用試劑，用左手持量筒（或試管），并用大姆指指示所需體積刻度處。右手持試劑瓶（注意：試劑標簽應向手心避免試劑沾污標簽），慢慢將液體注入量筒到所指刻度。讀取刻度時，視線應與液體凹面的低處保持水平倒完后，應將試劑瓶口在容器壁上靠一下，再將瓶子豎直醫(yī)學|教育網搜集整理，以免試劑流至瓶的外壁。如果是平頂塞子，取出后應倒置桌上，如瓶塞頂不是扁平的，可用食指和中指（或中指和無名指）將瓶塞夾?。ɑ蚍旁跐崈舻谋砻婷笊希胁豢蓪⑺鼨M置桌上。試劑的穩(wěn)定性對準確度非常重要。

試劑空白吸光度是反映試劑質量的指標之一。每種試劑都有一定的空白吸光度范圍，試劑空白吸光度的改變往往提示該試劑的變質;如利用Trinder反應為原理的檢測試劑會因含酚類物質被氧化為醌而變?yōu)榧t色。堿性磷酸酶、r一谷氨酰轉肽酶、淀粉酶等檢測試劑會因基質分解出硝基酚或酚基苯胺而變黃。有些試劑久置后變渾濁。這些情況均可使空白吸光度升高。丙氨酸氨基轉移酶、天冬氨酸氨基轉移酶等負反應，在放置過程中其試劑空白吸光度會因NADH自行氧化為NAD+而下降。原則上，吸光度上升的反應，其試劑空白吸光度越低越好，不能超過一個高限;相反，吸光度下降的反應，其試劑空白吸光度不能低于一個低限。因此，試劑空白吸光度限值，常作為程序參數輸入儀器，如經核查超限，儀器會自動報警，提示更換試劑。檢測試劑盒孔底透明度高的固相載體。標準葡萄糖溶液(1mg/ml)

丁胺卡那霉素給藥說明：患者應給予足夠的水分，以減少腎小管損害。磷脂鐵蘇木素(FeH)染色液

科研實驗中試劑取用應注意事項：1. 固體試劑的取用:取用固體藥品時藥匙必須是干凈的.一支藥匙不能同時取用兩種或兩種以上的試劑.藥匙每取完一種試劑后都必須用干凈的紙擦拭干凈,以備下次使用.藥匙的兩端為大小兩匙,取固體量較多時用大匙,較少時用小匙。2. 取用不定量(較多)液體——直接傾倒a. 瓶塞必須倒放在桌面上【防止藥品腐蝕實驗臺或污染藥品】；b. 直接傾倒時瓶口必須緊挨試管口，試管45度，并且緩緩地倒【防止藥液損失】；c. 貼標簽的一面必須朝向手心處【防止藥液灑出腐蝕標簽】；d. 倒完液體后，要立即蓋緊瓶塞，并把瓶子放回原處，標簽朝向外面【防止藥品潮解、變質】。磷脂鐵蘇木素(FeH)染色液