LISA檢測試劑盒實驗結(jié)果分析的三個小建議:實驗中樣品都要做復(fù)孔或三孔，然后計算每個濃度標(biāo)準(zhǔn)品的平均OD值，復(fù)孔的變異系數(shù)應(yīng)該小于20%。平均OD值減去空白孔的OD值。制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。 以減去本底后的OD值為X軸，標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為Y軸，利用作圖軟件得出一個合適的計算方法。建議使用合適的軟件來作圖，比如CurveExpert 1.4。這款軟件能夠給出很多種方法（比如直線、半對數(shù)、對數(shù)、四參數(shù)方程等）并從中選擇一條合適的方程。要想檢驗?zāi)硹l曲線是否與表中數(shù)據(jù)吻合，可以將標(biāo)準(zhǔn)品的濃度作為未知數(shù)，將對應(yīng)的OD值帶入該方程，計算出標(biāo)準(zhǔn)品的濃度，得到的結(jié)果應(yīng)該與實際濃度很接近（+/-10%）。選擇擬合度高的那條曲線。BMC原代分離步驟：較上面是血漿，血漿層和淋巴細(xì)胞分離液之間是淋巴細(xì)胞層呈白膜狀。磷酸鉀緩沖液

檢測試劑盒運(yùn)用注意事項:在加入底物液A液和底物液B液后，一般顯色時間為15～20min即可。若顏色較淺，可延長反響時間到30min。反之，則減短反響時間。反響停止液為2M硫酸，防止接觸皮膚。不要運(yùn)用過了有用日期的檢測試劑盒；也不要運(yùn)用過了有用期的試劑盒中的任何試劑，摻雜運(yùn)用過了有用期的檢測試劑盒會引起靈敏度的降低；不要交流運(yùn)用不同批號試劑盒中的試劑。試劑盒具有的幾個優(yōu)點：吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相載體；穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性；靈敏、特異的抗體。蔗糖溶液(2mol/L)濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶。

測定血清中的某些酶，如CK，離體(采集血液)后很容易失活。失活的原因是酶活性中心的活性基因巰基(一SH)被氧化造成的。只有通過適當(dāng)?shù)倪€原作用才能重新開始。如CK—NAC檢測試劑盒即含有CK活化劑，名為N一乙酰半胱氨酸。實驗研究證明，NAC對血清中已失活的CK活化過程約需180 S。這就是CK測定為什么要延遲時間較長的理論依據(jù)。在AST，ALT采用IFCC推薦方法測定時需要磷酸吡哆醛預(yù)活化。需要強(qiáng)調(diào)：含有活化劑的生化試劑，其測定酶活性的結(jié)果要高些。

試劑空白吸光度是反映試劑質(zhì)量的指標(biāo)之一。每種試劑都有一定的空白吸光度范圍，試劑空白吸光度的改變往往提示該試劑的變質(zhì);如利用Trinder反應(yīng)為原理的檢測試劑會因含酚類物質(zhì)被氧化為醌而變?yōu)榧t色。堿性磷酸酶、r一谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶、淀粉酶等檢測試劑會因基質(zhì)分解出硝基酚或酚基苯胺而變黃。有些試劑久置后變渾濁。這些情況均可使空白吸光度升高。丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶等負(fù)反應(yīng)，在放置過程中其試劑空白吸光度會因NADH自行氧化為NAD+而下降。原則上，吸光度上升的反應(yīng)，其試劑空白吸光度越低越好，不能超過一個高限;相反，吸光度下降的反應(yīng)，其試劑空白吸光度不能低于一個低限。因此，試劑空白吸光度限值，常作為程序參數(shù)輸入儀器，如經(jīng)核查超限，儀器會自動報警，提示更換試劑。檢測試劑盒安全性：試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。

液體固體試劑正確取用試劑的方法過程：液體試劑的取用方法試劑瓶取用試劑，用左手持量筒（或試管），并用大姆指指示所需體積刻度處。右手持試劑瓶（注意：試劑標(biāo)簽應(yīng)向手心避免試劑沾污標(biāo)簽），慢慢將液體注入量筒到所指刻度。讀取刻度時，視線應(yīng)與液體凹面的低處保持水平倒完后，應(yīng)將試劑瓶口在容器壁上靠一下，再將瓶子豎直醫(yī)學(xué)|教育網(wǎng)搜集整理，以免試劑流至瓶的外壁。如果是平頂塞子，取出后應(yīng)倒置桌上，如瓶塞頂不是扁平的，可用食指和中指（或中指和無名指）將瓶塞夾住（或放在潔凈的表面皿上），切不可將它橫置桌上。檢測試劑盒液體悉數(shù)參加酶標(biāo)孔后，將酶標(biāo)板放在桌子上平行悄悄搖晃30s。淀粉樣物質(zhì)染色液(Puchtler堿性剛果紅法)

檢測試劑盒吸入液體時的的方法是吸兩檔打一檔。磷酸鉀緩沖液

檢測試劑盒實驗注意事項:封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。底物請避光保存。嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。本試劑不同批號組分不得混用。檢測試劑盒實驗為什么要設(shè)置復(fù)孔？計算平均值，確保實驗結(jié)果更準(zhǔn)確；解決實驗中誤操作造成的跳孔現(xiàn)象；計算CV值，對實驗的操作和檢測試劑盒的精密度進(jìn)行評估。加樣要準(zhǔn)確、快速。如果加樣不準(zhǔn)確，酶生成物的量不能確定，檢測試劑盒直接影響顯色結(jié)果。顯色的深淺及A值的測定與加入顯色劑和終止液的量有關(guān)，所以加樣應(yīng)慎重。磷酸鉀緩沖液