檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)分析：洗板時(shí)，每次洗液加入后，應(yīng)靜置1分鐘，使清洗更加徹底。沒(méi)有洗板機(jī)時(shí)，倒去液體后，要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干（報(bào)紙就免了吧?。?。洗液不夠時(shí)，可用蒸餾水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸緩沖液，加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長(zhǎng)期保存（洗液先用現(xiàn)配不費(fèi)多少事的）。底物是光敏感的，要在臨用前現(xiàn)配（同前，避光?。?。檢測(cè)前，要打開(kāi)酶標(biāo)儀，使之穩(wěn)定10分鐘以上。底物有一定的毒性，終止液對(duì)皮膚有腐蝕性，應(yīng)盡量避免接觸（終止液為硫酸，小心毀容）。待檢樣品要澄清，否則會(huì)影響結(jié)果。溫浴時(shí)間應(yīng)遵守檢測(cè)試劑盒規(guī)定。應(yīng)盡量做雙孔實(shí)驗(yàn)，這樣才能保證數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。檢測(cè)試劑盒汲取液體時(shí)要選用量程和需求量接近的微量加樣器吸，減少差錯(cuò)。TTC染色液(0.5%)

如何正確保存和使用pH緩沖溶液：緩沖溶液配制后，應(yīng)裝在玻璃瓶或聚乙烯瓶中（堿性pH緩沖液，如，pH=9.18、pH=10.01、pH=12.46等，應(yīng)裝在聚乙烯瓶中）瓶蓋嚴(yán)密蓋緊，在冰箱中低溫(5～10℃)保存，一般可使用六個(gè)月左右，如發(fā)現(xiàn)有混頻器濁，發(fā)霉或沉淀現(xiàn)象，不能繼續(xù)使用。使用時(shí)，應(yīng)準(zhǔn)備幾個(gè)50mL的聚乙烯小瓶，將大瓶中的組沖溶液倒入小瓶中，并在環(huán)境溫度下放置1～2個(gè)小時(shí)，等溫度平衡后再使用。使用后不得再倒入大瓶中，以免污染，瓶中的緩沖溶液在＞10℃的環(huán)境條件下可以使用2～3天，一般pH=7.00、pH=6.86、pH=14.00三種溶液使用時(shí)間可以長(zhǎng)一些，pH=9.18和pH=10.01溶液由于吸收空氣中的二氧化碳，其pH值比較容易變化。常規(guī)考馬斯亮藍(lán)染色洗脫液殺滅曲線(xiàn)的建立：按照20-25%的細(xì)胞密度將未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞鋪在合適的培養(yǎng)板上。

檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)分析：要保證移液的準(zhǔn)確性，誤差不能超過(guò)2%?？捎盟吞炱?>電子天平進(jìn)行校正。校正方法自己放狗吧，但有專(zhuān)業(yè)人員進(jìn)行矯正。要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排各一支（靠，基本是廢話(huà)了）。吸取不同的液體后，要更換頭。即使是吸取標(biāo)準(zhǔn)品時(shí)（應(yīng)該是特別是！）。要在實(shí)驗(yàn)前1小時(shí)將檢測(cè)試劑盒從冰箱中取出，使各種試劑都恢復(fù)到室溫，以使結(jié)果更穩(wěn)定（這個(gè)是容易忽視的?。?。實(shí)驗(yàn)時(shí)，要使底物避光保存。用吸取液體時(shí)速度不能太快，以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。

檢測(cè)方法的三大特點(diǎn)：穩(wěn)定性好：包被的抗原的穩(wěn)定性可使試劑盒的效期得到確保，早期以合成肽為包被抗原的試劑盒效期只有3-4個(gè)月，選用基因工程抗原后效期很大程度延長(zhǎng)了。基因工程抗原將特異性抗原決定簇基因融合表達(dá)，表達(dá)產(chǎn)物包含更多的抗原決定簇，可提高試劑盒的靈敏度，提高檢出率。分子量大：合成肽選用化學(xué)辦法制備，因?yàn)楣に嚨南拗疲铣蓴?shù)量有限，只能達(dá)到數(shù)百個(gè)氨基酸。而使用基因工程制備的抗原，分子量更大。用EDTA2K離心搜集在真空血液搜集管中的血液，5,000×g，15分鐘，4℃，分離血漿樣品，然后儲(chǔ)存在零下80℃直到使用。常用熒光顯微鏡觀測(cè),可以透過(guò)完整的細(xì)胞膜。

G418又稱(chēng)遺傳霉素,新霉素,對(duì)細(xì)菌、酵母、高等植物、原生生物、哺乳動(dòng)物細(xì)胞具有氨基苷類(lèi)毒性,對(duì)真核細(xì)胞進(jìn)行篩選。G418(G418,G 418,G-418,Geneticin)是一種氨基糖苷類(lèi) ,這種氨基糖類(lèi)的結(jié)構(gòu)和新霉素、慶大霉素、卡那霉素相似，在分子遺傳試驗(yàn)中,是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染常用的抗性篩選試劑。它通過(guò)克制轉(zhuǎn)座子Tn601，Tn5的基因,干擾核糖體功能而阻斷蛋白質(zhì)合成,對(duì)原核和真核等細(xì)胞產(chǎn)生東西,包括細(xì)菌、酵母、植物和哺乳動(dòng)物細(xì)胞 ,也包括原生動(dòng)物和蠕蟲(chóng)。當(dāng)neo基因被整合進(jìn)真核細(xì)胞DNA后 ,則能啟動(dòng)neo基因編碼的序列轉(zhuǎn)錄為ｍＲＮＡ ,從而獲得抗性產(chǎn)物氨基糖苷磷酸轉(zhuǎn)移酶的表達(dá) ,使細(xì)胞獲得抗性而能在含有Ｇ418的選擇性培養(yǎng)基中生長(zhǎng)。Ｇ418的這一選擇特性 ,已在基因轉(zhuǎn)移、基因敲除、抗性篩選以及轉(zhuǎn)基因動(dòng)物等方面得以普遍應(yīng)用。丁胺卡那霉素給藥說(shuō)明：長(zhǎng)期用藥可能導(dǎo)致耐藥菌過(guò)度生長(zhǎng)。Mayer蘇木素染色液

PBS：PBS粉劑每袋加ddH2O定容至1000mL，調(diào)pH7.2，高壓滅菌，4℃保存?zhèn)溆?。TTC染色液(0.5%)

標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的正確使用:不確定度表示被測(cè)量值的分散性，不同的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)其特性的不確定度也不同。在選擇標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)時(shí)應(yīng)當(dāng)考慮其對(duì)考慮其對(duì)預(yù)期分析結(jié)果要求的不確定度水平的影響。除生產(chǎn)者確定的不確定度外，標(biāo)準(zhǔn)樣品的不同處理過(guò)程也會(huì)影響分析結(jié)果的不確定度，例如標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)與分析樣品基體之間有差異時(shí)，或使用與標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)定值方法不同的分析方法時(shí)，可能其不確定度與生產(chǎn)者提供的會(huì)有差異。使用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)時(shí)，其不確定度并不是越小越好，還應(yīng)當(dāng)考慮供應(yīng)狀況、成本、預(yù)期使用的化學(xué)適用性和物理適用性。TTC染色液(0.5%)