檢測試劑盒實驗經驗分析：洗板時，每次洗液加入后，應靜置1分鐘，使清洗更加徹底。沒有洗板機時，倒去液體后，要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干（報紙就免了吧?。Ｏ匆翰粔驎r，可用蒸餾水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸緩沖液，加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存（洗液先用現(xiàn)配不費多少事的）。底物是光敏感的，要在臨用前現(xiàn)配（同前，避光！）。檢測前，要打開酶標儀，使之穩(wěn)定10分鐘以上。底物有一定的毒性，終止液對皮膚有腐蝕性，應盡量避免接觸（終止液為硫酸，小心毀容）。待檢樣品要澄清，否則會影響結果。溫浴時間應遵守檢測試劑盒規(guī)定。應盡量做雙孔實驗，這樣才能保證數(shù)據(jù)的準確性。檢測試劑盒汲取液體時要選用量程和需求量接近的微量加樣器吸，減少差錯。TTC染色液(0.5%)

如何正確保存和使用pH緩沖溶液：緩沖溶液配制后，應裝在玻璃瓶或聚乙烯瓶中（堿性pH緩沖液，如，pH=9.18、pH=10.01、pH=12.46等，應裝在聚乙烯瓶中）瓶蓋嚴密蓋緊，在冰箱中低溫(5～10℃)保存，一般可使用六個月左右，如發(fā)現(xiàn)有混頻器濁，發(fā)霉或沉淀現(xiàn)象，不能繼續(xù)使用。使用時，應準備幾個50mL的聚乙烯小瓶，將大瓶中的組沖溶液倒入小瓶中，并在環(huán)境溫度下放置1～2個小時，等溫度平衡后再使用。使用后不得再倒入大瓶中，以免污染，瓶中的緩沖溶液在＞10℃的環(huán)境條件下可以使用2～3天，一般pH=7.00、pH=6.86、pH=14.00三種溶液使用時間可以長一些，pH=9.18和pH=10.01溶液由于吸收空氣中的二氧化碳，其pH值比較容易變化。常規(guī)考馬斯亮藍染色洗脫液殺滅曲線的建立：按照20-25%的細胞密度將未轉化的細胞鋪在合適的培養(yǎng)板上。

檢測試劑盒實驗經驗分析：要保證移液的準確性，誤差不能超過2%?？捎盟吞炱?>電子天平進行校正。校正方法自己放狗吧，但有專業(yè)人員進行矯正。要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排各一支（靠，基本是廢話了）。吸取不同的液體后，要更換頭。即使是吸取標準品時（應該是特別是?。?。要在實驗前1小時將檢測試劑盒從冰箱中取出，使各種試劑都恢復到室溫，以使結果更穩(wěn)定（這個是容易忽視的?。?。實驗時，要使底物避光保存。用吸取液體時速度不能太快，以免產生氣泡而使吸取量不準確。

檢測方法的三大特點：穩(wěn)定性好：包被的抗原的穩(wěn)定性可使試劑盒的效期得到確保，早期以合成肽為包被抗原的試劑盒效期只有3-4個月，選用基因工程抗原后效期很大程度延長了。基因工程抗原將特異性抗原決定簇基因融合表達，表達產物包含更多的抗原決定簇，可提高試劑盒的靈敏度，提高檢出率。分子量大：合成肽選用化學辦法制備，因為工藝的限制，合成數(shù)量有限，只能達到數(shù)百個氨基酸。而使用基因工程制備的抗原，分子量更大。用EDTA2K離心搜集在真空血液搜集管中的血液，5,000×g，15分鐘，4℃，分離血漿樣品，然后儲存在零下80℃直到使用。常用熒光顯微鏡觀測,可以透過完整的細胞膜。

G418又稱遺傳霉素,新霉素,對細菌、酵母、高等植物、原生生物、哺乳動物細胞具有氨基苷類毒性,對真核細胞進行篩選。G418(G418,G 418,G-418,Geneticin)是一種氨基糖苷類 ,這種氨基糖類的結構和新霉素、慶大霉素、卡那霉素相似，在分子遺傳試驗中,是穩(wěn)定轉染常用的抗性篩選試劑。它通過克制轉座子Tn601，Tn5的基因,干擾核糖體功能而阻斷蛋白質合成,對原核和真核等細胞產生東西,包括細菌、酵母、植物和哺乳動物細胞 ,也包括原生動物和蠕蟲。當neo基因被整合進真核細胞DNA后 ,則能啟動neo基因編碼的序列轉錄為ｍＲＮＡ ,從而獲得抗性產物氨基糖苷磷酸轉移酶的表達 ,使細胞獲得抗性而能在含有Ｇ418的選擇性培養(yǎng)基中生長。Ｇ418的這一選擇特性 ,已在基因轉移、基因敲除、抗性篩選以及轉基因動物等方面得以普遍應用。丁胺卡那霉素給藥說明：長期用藥可能導致耐藥菌過度生長。Mayer蘇木素染色液

PBS：PBS粉劑每袋加ddH2O定容至1000mL，調pH7.2，高壓滅菌，4℃保存?zhèn)溆?。TTC染色液(0.5%)

標準物質的正確使用:不確定度表示被測量值的分散性，不同的標準物質其特性的不確定度也不同。在選擇標準物質時應當考慮其對考慮其對預期分析結果要求的不確定度水平的影響。除生產者確定的不確定度外，標準樣品的不同處理過程也會影響分析結果的不確定度，例如標準物質與分析樣品基體之間有差異時，或使用與標準物質定值方法不同的分析方法時，可能其不確定度與生產者提供的會有差異。使用標準物質時，其不確定度并不是越小越好，還應當考慮供應狀況、成本、預期使用的化學適用性和物理適用性。TTC染色液(0.5%)