淋巴細(xì)胞亞群及其功能：T淋巴細(xì)胞及其分類主要應(yīng)用抗T細(xì)胞表面抗原McAb.根據(jù)T淋巴細(xì)胞表面分化抗原將成熟T細(xì)胞分為CD4+、CD8-和CD4-、CD8+兩大亞群，T淋巴細(xì)胞的功能與表現(xiàn)型之間的對(duì)應(yīng)關(guān)系是相對(duì)的，其免疫活性可能受“微環(huán)境”的影響，并受MHC抗原的制約，許多研究證明，CD4+T細(xì)胞具有殺傷活性，介導(dǎo)Ι類抗原不相容時(shí)的靶細(xì)胞溶解。TU等研究表明，CD4+的細(xì)胞毒活性存在兩種完全不同的機(jī)理，并證明TH1和TH2的細(xì)胞毒活性不同。前者強(qiáng)，后者弱或無(wú)活性。Dennert等發(fā)現(xiàn)，克隆化的T淋巴細(xì)胞具有輔助，細(xì)胞毒活性和遲發(fā)型超敏反應(yīng)作用，這種功能的多樣性有賴于所采用的分析方法。CD4+細(xì)胞識(shí)別Ι類MHC抗原，其效應(yīng)的發(fā)揮也受Ι類抗原的制約；CD3+細(xì)胞識(shí)別Ι類MHC抗原，發(fā)揮免疫效應(yīng)也受其控制。PBS是磷酸緩沖鹽溶液(phosphate buffer saline)一般作為溶劑。免疫染色一抗稀釋液

淋巴細(xì)胞分離液：淋巴細(xì)胞分離液是一種根據(jù)細(xì)胞密度差異，借助離心產(chǎn)生的重力加速度，進(jìn)行細(xì)胞的分離純化的常用試劑。常用的淋巴細(xì)胞分離液有Ficoll淋巴細(xì)胞分離液、Percoll淋巴細(xì)胞分離液。Ficoll與Percoll分離單個(gè)核細(xì)胞的方法均為密度梯度離心法。分離原理：外周血中單個(gè)核細(xì)胞和單核細(xì)胞,其體積、形態(tài)和密度與其他細(xì)胞不同，淋巴細(xì)胞分離液是一種密度介于1.075~1.090之間而近似于等滲的溶液,用它做密度梯度離心,使一定密度的細(xì)胞按相應(yīng)密度梯度分布，從而將各種血細(xì)胞加以分離。淋巴細(xì)胞分離液Lymphocyte Separation Medium（human, Ficoll-Paque ）是世界范圍內(nèi)用于體外研究分離人淋巴細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)室公認(rèn)的標(biāo)準(zhǔn)。乙酸鹽緩沖液(0.05mol/L,pH5.0)檢測(cè)試劑盒汲取液體時(shí)要選用量程和需要量挨近的微量加樣器吸。

檢測(cè)試劑盒的實(shí)驗(yàn)步驟有哪些呢？檢測(cè)試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排加樣。請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔孔的OD值），請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)*后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。

標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的正確使用:不確定度表示被測(cè)量值的分散性，不同的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)其特性的不確定度也不同。在選擇標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)時(shí)應(yīng)當(dāng)考慮其對(duì)考慮其對(duì)預(yù)期分析結(jié)果要求的不確定度水平的影響。除生產(chǎn)者確定的不確定度外，標(biāo)準(zhǔn)樣品的不同處理過(guò)程也會(huì)影響分析結(jié)果的不確定度，例如標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)與分析樣品基體之間有差異時(shí)，或使用與標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)定值方法不同的分析方法時(shí)，可能其不確定度與生產(chǎn)者提供的會(huì)有差異。使用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)時(shí)，其不確定度并不是越小越好，還應(yīng)當(dāng)考慮供應(yīng)狀況、成本、預(yù)期使用的化學(xué)適用性和物理適用性。在緩沖溶液中加入少量強(qiáng)酸或強(qiáng)堿，其溶液pH值變化不大。

檢測(cè)試劑盒標(biāo)本保存方法：標(biāo)本管中增加物質(zhì)的影響。抗凝劑、酶抑制劑及快速分別血清的分別膠等均對(duì)測(cè)定有必定煩擾作用。標(biāo)本溶血。由于各種人為原因引起的標(biāo)本溶血，均可因紅細(xì)胞破壞溶解時(shí)釋放出很多具有過(guò)氧化物酶活性的血紅蛋白，在以辣根過(guò)氧化物酶為符號(hào)的測(cè)定中，會(huì)導(dǎo)致非特異性顯色，檢測(cè)試劑盒煩擾測(cè)定作用。為打敗上述煩擾作用，標(biāo)本搜集時(shí)有必要留意避免溶血。標(biāo)本保存不妥。 在冰箱中保存過(guò)久的標(biāo)本，血清中IgG可聚組成多聚體、AFP可構(gòu)成二聚體，在間接法測(cè)定中會(huì)導(dǎo)致本底過(guò)深、乃至形成假陽(yáng)性；標(biāo)本放置時(shí)刻過(guò)長(zhǎng)（如一日以上），有時(shí)抗原或抗體免疫活性削弱，亦可出現(xiàn)假陰性。為打敗上述煩擾，測(cè)定的血清標(biāo)本宜為新鮮搜集；如不能立即測(cè)定，5天內(nèi)測(cè)定的血清標(biāo)本可存放于4℃，1周后測(cè)定的血清標(biāo)本應(yīng)低溫凍存；凍存后融解的標(biāo)本，蛋白質(zhì)部分濃縮，分布不均，應(yīng)充沛混合后再測(cè)定，但混勻時(shí)應(yīng)輕柔，不行激烈振蕩。檢測(cè)試劑盒將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的催化作用相結(jié)合起來(lái)的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù)。改良Gomori三色染色液

利福平溶液怎么配制：配制時(shí)每毫升可加入～5滴 10 N NaOH以助溶。免疫染色一抗稀釋液

檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)如何改進(jìn)錯(cuò)誤？查驗(yàn)技術(shù)人員應(yīng)具有試驗(yàn)室操作的基本素質(zhì)和實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)。檢測(cè)技術(shù)人員能夠嫻熟操作試驗(yàn)儀器儀表，具有必定的總結(jié)和剖析問(wèn)題的能力，能及時(shí)、妥善地解決檢測(cè)試劑盒試驗(yàn)中呈現(xiàn)的意外狀況。洗刷要徹底。洗版不徹底，酶偶聯(lián)物的布景色彩為假陽(yáng)性。此外，清潔劑應(yīng)該是新鮮的，能夠隨時(shí)使用。舊的洗刷劑會(huì)添加布景，也可能呈現(xiàn)假陽(yáng)性。嚴(yán)控劑盒試驗(yàn)反應(yīng)時(shí)間。檢測(cè)試劑盒反應(yīng)時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，酶被滅活，反應(yīng)時(shí)間過(guò)短，酶與血清中的微生物抗原和抗體不能徹底結(jié)合，產(chǎn)物結(jié)構(gòu)松散不穩(wěn)定，易清洗，易發(fā)生假陰性。免疫染色一抗稀釋液