試劑空白吸光度是反映試劑質(zhì)量的指標(biāo)之一,但不能反映試劑質(zhì)量的全部。試劑成份、純度、用量及穩(wěn)定性,才是保證試劑質(zhì)量的關(guān)鍵所在。目前市售的一些試劑具有抗干擾作用,主要是通過加入抗干擾物質(zhì)或使用新的色素原以避免內(nèi)源性物質(zhì)的干擾。但值得注意的是:一些試驗(yàn)項(xiàng)目在消除內(nèi)源性物質(zhì)干擾的同時(shí),會帶來樣品含量真實(shí)性的變化。 線性范圍變窄 現(xiàn)象:高值測不高。原因:生產(chǎn)試劑時(shí)有效成分投料量不足;試劑成份穩(wěn)定性較差。靈敏度變低現(xiàn)象:酶促反應(yīng)速度曲線斜率下降,測定結(jié)果有嚴(yán)重系統(tǒng)誤差。原因:試劑底物濃度不足。液體試劑分散度大,吸收快。Tris-Maleate緩沖液(0.1mol/L,pH5.08-8.45)
檢測試劑盒的實(shí)驗(yàn)步驟有哪些呢?檢測試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排加樣。請每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計(jì)算時(shí)請*后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。ER培養(yǎng)基檢測試劑盒掃除各種影響因素的干擾和正確操作是保證檢測成果準(zhǔn)確牢靠的必要條件。
如何正確保存和使用pH緩沖溶液:緩沖溶液配制后,應(yīng)裝在玻璃瓶或聚乙烯瓶中(堿性pH緩沖液,如,pH=9.18、pH=10.01、pH=12.46等,應(yīng)裝在聚乙烯瓶中)瓶蓋嚴(yán)密蓋緊,在冰箱中低溫(5~10℃)保存,一般可使用六個(gè)月左右,如發(fā)現(xiàn)有混頻器濁,發(fā)霉或沉淀現(xiàn)象,不能繼續(xù)使用。使用時(shí),應(yīng)準(zhǔn)備幾個(gè)50mL的聚乙烯小瓶,將大瓶中的組沖溶液倒入小瓶中,并在環(huán)境溫度下放置1~2個(gè)小時(shí),等溫度平衡后再使用。使用后不得再倒入大瓶中,以免污染,瓶中的緩沖溶液在>10℃的環(huán)境條件下可以使用2~3天,一般pH=7.00、pH=6.86、pH=14.00三種溶液使用時(shí)間可以長一些,pH=9.18和pH=10.01溶液由于吸收空氣中的二氧化碳,其pH值比較容易變化。
檢測試劑盒檢測數(shù)據(jù)的處理步驟:實(shí)驗(yàn)實(shí)在值。從理論上說,樣品中某一組分的含量必定有一個(gè)客觀存在的實(shí)在數(shù)值,稱之為“實(shí)在值”或“真值”。用“μ”表明。但實(shí)踐上,關(guān)于客觀存在的真值,人們不可能的知道,只能隨著丈量技術(shù)的不斷進(jìn)步而逐步挨近真值。實(shí)踐工作中,往往用“標(biāo)準(zhǔn)值”替代“真值”。標(biāo)準(zhǔn)值。檢測試劑盒選用多種牢靠的剖析辦法、由具有豐富經(jīng)歷的剖析人員通過重復(fù)多次測定得出的成果平均值,是一個(gè)比較準(zhǔn)確的成果。實(shí)踐工作中一般用標(biāo)準(zhǔn)值替代真值。例如原子量、物理化學(xué)常數(shù):阿佛伽得羅常數(shù)為6.02×10 等。與我們實(shí)驗(yàn)相關(guān)的是將純物質(zhì)中元素的理論含量作為實(shí)在值。檢測試劑盒可在板孔中參加稀釋液,再在其中參加血清標(biāo)本。
液體固體試劑正確取用試劑的方法過程:液體試劑的取用方法試劑瓶取用試劑,用左手持量筒(或試管),并用大姆指指示所需體積刻度處。右手持試劑瓶(注意:試劑標(biāo)簽應(yīng)向手心避免試劑沾污標(biāo)簽),慢慢將液體注入量筒到所指刻度。讀取刻度時(shí),視線應(yīng)與液體凹面的低處保持水平倒完后,應(yīng)將試劑瓶口在容器壁上靠一下,再將瓶子豎直醫(yī)學(xué)|教育網(wǎng)搜集整理,以免試劑流至瓶的外壁。如果是平頂塞子,取出后應(yīng)倒置桌上,如瓶塞頂不是扁平的,可用食指和中指(或中指和無名指)將瓶塞夾?。ɑ蚍旁跐崈舻谋砻婷笊希?,切不可將它橫置桌上。如需少量液體試劑則可用滴管取用,取用時(shí)應(yīng)注意不要將滴管碰到或插入接收容器的壁上或里面。枸櫞酸鈉抗凝劑(3.2%,無菌)
浸洗劑是指藥物與適宜的溶劑或分散介質(zhì)制成的對動物進(jìn)行全身浸浴的液體試劑。Tris-Maleate緩沖液(0.1mol/L,pH5.08-8.45)
DAPI是一種能夠與DNA強(qiáng)力結(jié)合的熒光染料,常用熒光顯微鏡觀測,可以透過完整的細(xì)胞膜,可用于活細(xì)胞和固定細(xì)胞的染色,其工作濃度一般為0.3mmol/L或0.1ug/ml。顯微鏡下可以看到藍(lán)色熒光的細(xì)胞,熒光顯微鏡觀察細(xì)胞標(biāo)記的效率高 ,且對活細(xì)胞無毒副作用。DAPI染色常用于細(xì)胞凋亡檢測,染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細(xì)胞儀檢測。DAPI也常用于普通的細(xì)胞核染色以及某些特定情況下的雙鏈DNA染色。DAPI的大激發(fā)波長為340nm,大發(fā)射波長為488nm, DAPI和雙鏈DNA結(jié)合后,大激發(fā)波長為360nm,大發(fā)射波長為460nm。Tris-Maleate緩沖液(0.1mol/L,pH5.08-8.45)