Laemmli 加樣緩沖液(2×)是一種以溴酚藍(lán)為染料的 2 倍濃縮的蛋白上樣緩沖液,主要 由 2-ME、SDS、溴酚藍(lán)、Laemmli 分層緩沖液等組成,可用于不連續(xù)蛋白電泳的上樣。 組成: 編號(hào) 名稱 PE0005 5ml Storage Laemmli 加樣緩沖液(2×) 使用說(shuō)明書(shū) 4℃ 1份 操作步驟(光供參考): 1、 取適量的蛋白樣品和 Laemmli 加樣緩沖液(2×)等量混合,充分混勻。 2、 直接上樣到 SDS-PAGE 膠加樣孔內(nèi)即可。 3、 通常電泳至藍(lán)色染料到達(dá) PAGE 膠的底部附近即可停止。 注意事項(xiàng): 1、 Leagene Laemmli 加樣緩沖液(2×)中含少量β-巰基乙醇,有輕微刺激性氣味。 2、 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。 有效期: 12 個(gè)月有效。亦可室溫短期保存。檢測(cè)試劑盒如為有菌操作,則主張冰凍保存。詹納斯綠B染色液(0.5%)
液體固體試劑正確取用試劑的方法過(guò)程:液體試劑的取用方法試劑瓶取用試劑,用左手持量筒(或試管),并用大姆指指示所需體積刻度處。右手持試劑瓶(注意:試劑標(biāo)簽應(yīng)向手心避免試劑沾污標(biāo)簽),慢慢將液體注入量筒到所指刻度。讀取刻度時(shí),視線應(yīng)與液體凹面的低處保持水平倒完后,應(yīng)將試劑瓶口在容器壁上靠一下,再將瓶子豎直醫(yī)學(xué)|教育網(wǎng)搜集整理,以免試劑流至瓶的外壁。如果是平頂塞子,取出后應(yīng)倒置桌上,如瓶塞頂不是扁平的,可用食指和中指(或中指和無(wú)名指)將瓶塞夾?。ɑ蚍旁跐崈舻谋砻婷笊希胁豢蓪⑺鼨M置桌上。甘油三酯(TG)檢測(cè)試劑盒(GPO-***單試劑微板法)固體試劑的取用:取固體量較多時(shí)用大匙,較少時(shí)用小匙。
殺滅曲線的建立:通過(guò)建立殺滅曲線(劑量反應(yīng)曲線),確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的較低濃度,從而篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株。建立殺滅曲線至少選擇5個(gè)濃度。1、按照20-25%的細(xì)胞密度將未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2過(guò)夜培養(yǎng)(需要更高密度,可增加接種量)。2、根據(jù)細(xì)胞類型,設(shè)定合適的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例,可設(shè)定50,100,250,500,750,1000μg/mL。3、第2天換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基,每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。4、接下來(lái)每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。5、按照每2天進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù),來(lái)確定殺滅未轉(zhuǎn)染細(xì)胞的恰當(dāng)濃度。通常7-10天內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的較低濃度為篩選用的工作濃度。
標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)在計(jì)量學(xué)中的作用:標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)所提供特性量值的不確定度必須已知且滿足測(cè)量需求。因此,標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)可以按不確定度等級(jí)(越小越好,但評(píng)定必須合理)和依據(jù)不確定度報(bào)告的可靠性和驗(yàn)證結(jié)果進(jìn)行分級(jí)分類。在物理計(jì)量中,測(cè)量標(biāo)準(zhǔn)一般按層級(jí)水平劃分。測(cè)量基準(zhǔn)的不確定度小且處于計(jì)量溯源層級(jí)的高大上,次級(jí)標(biāo)準(zhǔn)通過(guò)與一個(gè)或多個(gè)基準(zhǔn)直接比較導(dǎo)出或驗(yàn)證,依此類推。這個(gè)層級(jí)體系用來(lái)建立測(cè)量系統(tǒng)的準(zhǔn)確度。這些測(cè)量系統(tǒng)用工作標(biāo)準(zhǔn)校準(zhǔn),而工作標(biāo)準(zhǔn)則用參考標(biāo)準(zhǔn)校準(zhǔn),依此類推。理想情況下,所有這些溯源鏈止于基準(zhǔn)。通過(guò)這個(gè)過(guò)程,就可校正測(cè)量系統(tǒng)的重要偏差,同時(shí),測(cè)量不確定度追溯至基準(zhǔn)的不確定度和相關(guān)比較測(cè)量的不確定度。檢測(cè)試劑盒使液體充沛混合均勻,也使其得到充沛的反應(yīng)。
紅霉素溶液:紅霉素(Erythromycin)是由紅霉素鏈霉菌(Streptomyces erythreus)所產(chǎn)生的大環(huán)內(nèi)酯類克菌素,分子量為733.93。紅霉素對(duì)革蘭陽(yáng)性菌(如綠色鏈球菌、葡萄球菌、炭疽桿菌、化膿性鏈球菌、肺炎鏈球菌、溶血性鏈球菌、梭狀芽孢桿菌等)具有很好的克菌性。另外,紅霉素對(duì)某些革蘭陰性菌也有一定的抑菌作用。紅霉素抑菌作用在于其與細(xì)菌的聚核糖體結(jié)合而克制肽鏈的延伸,對(duì)青霉素產(chǎn)生耐藥性的菌株,對(duì)紅霉素敏感。臨床上,紅霉素常用于耐青霉素的金葡菌傳染及對(duì)青霉素過(guò)敏的金葡菌傳染。Leagene Erythromycin solution主要用于科研領(lǐng)域,不用于臨床診斷或其他用途。檢測(cè)試劑盒將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的催化作用相結(jié)合起來(lái)的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù)。乳酸鈉林格氏液(無(wú)菌)
科研實(shí)驗(yàn)中試劑取用應(yīng)注意事項(xiàng):用過(guò)的試管要立即用清水沖洗干凈。詹納斯綠B染色液(0.5%)
液體固體試劑正確取用試劑的方法過(guò)程:固體試劑一般裝在帶膠木塞的廣口瓶中,液體試劑則盛在細(xì)口瓶中(或滴瓶中),見(jiàn)光易分解的試劑(如硝酸銀)應(yīng)裝在棕色瓶中,每一種試劑都貼有標(biāo)簽以表明試劑的名稱、濃度、純度。(實(shí)驗(yàn)室分裝時(shí),固體只標(biāo)明試劑名稱,液體還須注名明濃度)。固體粉末試劑可用潔凈的牛角勺取用。要取一定量的固體時(shí),可把固體放在紙上或表面皿上在臺(tái)秤上稱量。要準(zhǔn)確稱量時(shí),則用稱量瓶在天平上進(jìn)行稱量。液體試劑常用量筒量取,量筒的容量為:5mL、10mL、50mL、500mL等數(shù)種,使用時(shí)要把量取的液體注入量筒中,使視線與量筒內(nèi)液體凹面的低處保持水平,然后讀出量筒上的刻度,即得液體的體積。詹納斯綠B染色液(0.5%)