SDS-EDTA 染料混合液(2.5×) 簡(jiǎn)介： SDS-EDTA 染料混合液(2.5×)是一種以溴酚藍(lán)為染料的 2.5 倍濃縮的蛋白上樣緩沖液， 主要由 SDS、溴酚藍(lán)、EDTA、蔗糖等組成，可用于蛋白上樣。 組成： 編號(hào) 名稱 PE0010 5ml Storage SDS-EDTA 染料混合液(2.5×) 使用說(shuō)明書(shū) 4℃ 1份 操作步驟(光供參考)： 1、 取適量的蛋白樣品和 SDS-EDTA 染料混合液(2.5×)混合，充分混勻。 2、 直接上樣到 SDS-PAGE 膠加樣孔內(nèi)即可。 3、 通常電泳至藍(lán)色染料到達(dá) PAGE 膠的底部附近即可停止。 注意事項(xiàng)： 1、 SDS-EDTA 染料混合液(2.5×)中不含β-巰基乙醇。 2、 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。 有效期： 12 個(gè)月有效。亦可室溫短期保存。標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)在方法確認(rèn)中的主要作用是評(píng)估方法的正確度（偏差）及其測(cè)量不確定性。亞精胺溶液(1mol/L)

篩選：篩選之前:由于每種細(xì)胞對(duì)G418的敏感性不同，而且不同的廠家生產(chǎn)的相同濃度的G418的活性不盡相同，所以在篩選之前，一定要確定G418的適合篩選濃度。具體如下：將細(xì)胞稀釋到1000個(gè)細(xì)胞/mL，在100ug/mL~1mg/mL的G418濃度范圍內(nèi)進(jìn)行篩選，選擇出在10~14天內(nèi)使細(xì)胞全部死亡的低G418濃度來(lái)進(jìn)行下一步的篩選試驗(yàn)。由于每種細(xì)胞對(duì)G418的敏感性不同，一般變動(dòng)在100ug/ml～1000ug/ml范圍。而且不同的廠家生產(chǎn)的相同濃度的G418的活性不盡相同，所以在篩選之前，一定要確定細(xì)胞對(duì)這一批G418的適合篩選濃度。盡管如此，特性明確的細(xì)胞系G418的適合用量還是穩(wěn)定的?！斗肿涌寺　方o出了幾個(gè)常用細(xì)胞系所需G418的適合用量。溴甲酚綠-甲基橙指示劑固體試劑一般裝在帶膠木塞的廣口瓶中，液體試劑則盛在細(xì)口瓶中。

PH緩沖液：正常人血漿的pH值為7.35～7.45。血漿PH值的相對(duì)恒定性有賴于血液內(nèi)的緩沖物質(zhì)以及正常的肺、腎功能。血漿的緩沖物質(zhì)包括NaHCO3/H2CO3、蛋白質(zhì)鈉鹽/蛋白質(zhì)和Na2HPO4/NaH2PO4三個(gè)主要的緩沖對(duì)，其中以NaHCO3/H2CO3較為重要。紅細(xì)胞內(nèi)還有血紅蛋白鉀鹽/血紅蛋白、氧合血紅蛋白鉀鹽/氧合血紅蛋白、K2HPO4/KH2PO4、KHCO3/H2CO3等緩沖對(duì)參與維持血漿PH值的恒定。當(dāng)酸性或堿性物質(zhì)進(jìn)入血液時(shí)，血漿中的緩沖物質(zhì)可有效的減輕酸或堿性物質(zhì)對(duì)血漿PH值的影響，特別是肺和腎保持正常的排出體內(nèi)過(guò)多的酸或堿的功能的情況下，血漿PH值的波動(dòng)范圍極小。

液體固體試劑正確取用試劑的方法過(guò)程：固體試劑一般裝在帶膠木塞的廣口瓶中，液體試劑則盛在細(xì)口瓶中（或滴瓶中），見(jiàn)光易分解的試劑（如硝酸銀）應(yīng)裝在棕色瓶中，每一種試劑都貼有標(biāo)簽以表明試劑的名稱、濃度、純度。（實(shí)驗(yàn)室分裝時(shí)，固體只標(biāo)明試劑名稱，液體還須注名明濃度）。固體粉末試劑可用潔凈的牛角勺取用。要取一定量的固體時(shí)，可把固體放在紙上或表面皿上在臺(tái)秤上稱量。要準(zhǔn)確稱量時(shí)，則用稱量瓶在天平上進(jìn)行稱量。液體試劑常用量筒量取，量筒的容量為：5mL、10mL、50mL、500mL等數(shù)種，使用時(shí)要把量取的液體注入量筒中，使視線與量筒內(nèi)液體凹面的低處保持水平，然后讀出量筒上的刻度，即得液體的體積?？蒲袑?shí)驗(yàn)中試劑取用應(yīng)注意事項(xiàng)：視線與量筒內(nèi)液體的凹液面的低處保持水平。

外用液體試劑系指藥物與適宜的溶劑或分散介質(zhì)制成的，通過(guò)動(dòng)物體表給藥以產(chǎn)生局部或全身性作用的溶液、混懸液或乳狀液及供臨用前稀釋的高濃度液體試劑，一般有涂劑、澆潑劑、滴劑等。涂劑系指藥物與適宜溶劑、透皮促進(jìn)劑制成的涂于動(dòng)物特定部位，通過(guò)皮膚吸收而達(dá)到治理目的的液體試劑。 二、澆潑劑 系指藥物與適宜溶劑制成的澆潑于動(dòng)物體表的澄清液體試劑。澆潑劑易于在皮膚上分散和吸收，使用量通常在5ml以上，使用時(shí)沿動(dòng)物的背中線進(jìn)行澆潑。pH緩沖溶液有何用途：在一般精度測(cè)量時(shí)檢pH計(jì)是否需要重新標(biāo)定。檸檬酸—檸檬酸鈉緩沖液(1mol/L,pH3.0-6.6)

固體試劑的取用:直接傾倒時(shí)瓶口必須緊挨試管口，試管45度，并且緩緩地倒。亞精胺溶液(1mol/L)

G418又稱遺傳霉素,新霉素,對(duì)細(xì)菌、酵母、高等植物、原生生物、哺乳動(dòng)物細(xì)胞具有氨基苷類毒性,對(duì)真核細(xì)胞進(jìn)行篩選。G418(G418,G 418,G-418,Geneticin)是一種氨基糖苷類 ,這種氨基糖類的結(jié)構(gòu)和新霉素、慶大霉素、卡那霉素相似，在分子遺傳試驗(yàn)中,是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染常用的抗性篩選試劑。它通過(guò)克制轉(zhuǎn)座子Tn601，Tn5的基因,干擾核糖體功能而阻斷蛋白質(zhì)合成,對(duì)原核和真核等細(xì)胞產(chǎn)生東西,包括細(xì)菌、酵母、植物和哺乳動(dòng)物細(xì)胞 ,也包括原生動(dòng)物和蠕蟲(chóng)。當(dāng)neo基因被整合進(jìn)真核細(xì)胞DNA后 ,則能啟動(dòng)neo基因編碼的序列轉(zhuǎn)錄為ｍＲＮＡ ,從而獲得抗性產(chǎn)物氨基糖苷磷酸轉(zhuǎn)移酶的表達(dá) ,使細(xì)胞獲得抗性而能在含有Ｇ418的選擇性培養(yǎng)基中生長(zhǎng)。Ｇ418的這一選擇特性 ,已在基因轉(zhuǎn)移、基因敲除、抗性篩選以及轉(zhuǎn)基因動(dòng)物等方面得以普遍應(yīng)用。亞精胺溶液(1mol/L)