緩沖溶液的配制和應(yīng)用:為了配制一定pH的緩沖溶液,首先選定一個弱酸,它的pKaφ盡可能接近所需配制的緩沖溶液的pH值,然后計算酸與堿的濃度比,根據(jù)此濃度比便可配制所需緩沖溶液。以上主要以弱酸及其鹽組成的緩沖溶液為例說明它的作用原理、pH計算和配制方法。對于弱堿及其鹽組成的緩沖溶液可采用相同的方法。緩沖溶液在物質(zhì)分離和成分分析等方面應(yīng)用普遍,如鑒定Mg2 離子時,可用下面的反應(yīng):白色磷酸銨鎂沉淀溶于酸,故反應(yīng)需在堿性溶液中進行,但堿性太強,可能生成白色Mg(OH)2沉淀,所以反應(yīng)的pH值需控制在一定范圍內(nèi),因此利用NH3·H2O和NH4Cl組成的緩沖溶液,保持溶液的pH值條件下,進行上述反應(yīng)。丁胺卡那霉素給藥說明:燒傷患者中本品的半衰期較短(1—1.5小時)。軟骨染色液(阿利新藍法,pH1.0)
pH緩沖溶液的效能指標:pH緩沖溶液抵抗外加強酸、強堿的能力可以用緩沖容量β來表示,緩沖容量的意義是,使1L緩沖溶液的pH增大1個單位時需加入的強堿(NaOH)的物質(zhì)的量(mol),或減小1個pH單位時時需加入的強酸(HCl)的物質(zhì)的量,顯然β越大,緩沖外加強酸強堿的能力就越大。β與pH、總濃度C及共軛弱酸堿的濃度比有關(guān)。式中的C為弱酸+弱酸鹽(或弱堿+弱堿鹽)的總濃度,顯然,總濃度越大,緩沖能力就越大。式中的兩個δ分別為弱酸HA、弱酸根A-(又稱共軛堿)的分布分數(shù)值,δ定義為其平衡濃度與總濃度之比(我以前在論壇中曾作過介紹),它們也是pH值的函數(shù)。數(shù)據(jù)學(xué)上可以證明:恒定C時,當兩個分布分數(shù)值均等于0.5時,緩沖容量較大,其實用意義是:選擇緩沖溶液體系時,應(yīng)該選弱酸與弱酸鹽的濃度比接近1,而pH值仍能滿足配制要求的體系,對于弱堿及弱堿鹽溶液,也有同樣的要求。標準魯哥氏染色液(Lugol's碘液,1%)科研實驗中試劑取用應(yīng)注意事項:滴瓶上的滴管不能用水沖洗,也不能交叉使用。
檢測試劑盒樣品收集: 細胞培養(yǎng)上清:取細胞培養(yǎng)上清于1000×g離心20分鐘,除去雜質(zhì)及細胞碎片。取上清檢測。其它生物樣品:1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測。樣品應(yīng)清澈透明,懸浮物應(yīng)離心去除。樣品收集后若在1周內(nèi)進行檢測的可保存于4℃,若不能及時檢測,請按一次使用量分裝,凍存于-20℃(1個月內(nèi)檢測),或-80℃(6個月內(nèi)檢測),避免反復(fù)凍融。如果您的樣品中檢測物濃度高于標準品高值,請根據(jù)實際情況,做適當倍數(shù)稀釋(建議先做預(yù)實驗,以確定稀釋倍數(shù))。
校準液標示值往往是按其基質(zhì)偏差修正的,所以標示值并非實際值。校準液、質(zhì)控血清通常是經(jīng)過處理的混合人或動物血清,這種制備物在特定分析系統(tǒng)中往往與人新鮮血清反應(yīng)性不同而產(chǎn)生基質(zhì)偏差。如總膽固醇測定基質(zhì)效應(yīng)研究指出:校準液酶法測定回收結(jié)果偏低可達5%~7%。甘油三酯測定,有人主張選用雙試劑方法消除內(nèi)源性甘油,這個方法是可行的,但忽視了一個化學(xué)平衡理論。因為所有的酯在水溶液中都不是簡單地以酯的形式存在,而是以水解與酯化相平衡的形式存在。在一個平衡體系中,如果去除游離甘油,這個平衡就向生成甘油方向移動,甘油三酯就會重新水解,生成新的甘油,達到新的平衡,因此樣品與R1試劑孵育時間越長,測得甘油三酯值就越低。甘油三酯測定,不只要去除游離甘油,而且還要克服樣本含量真實性發(fā)生的變化,試劑中必須加入甘油激酶,并且延遲時間要標準化。所以,一些試驗項目在消除內(nèi)源性物質(zhì)干擾的同時,會帶來樣品含量真實性的變化。pH緩沖溶液有何用途:pH測量前標定校準pH計。
怎樣減少檢測試劑盒誤差?檢驗技師應(yīng)具備從事實驗室操作的基本素質(zhì)和實踐經(jīng)驗。能熟練操作實驗儀器、器械,具有一定總結(jié)和分析問題的能力,對實驗中出現(xiàn)的意外情況能及時妥善解決。使用校對過的微量移液器,排除自然誤差。移液器準確與否對定量檢測尤為重要。仔細閱讀說明書,嚴格按照說明書要求進行規(guī)范化操作。不同批號的試劑不可混用。值得改進的地方,反復(fù)試驗確定成立后才能改進。洗滌徹底,如若洗板不徹底,酶結(jié)合物本底顯色會呈現(xiàn)假陽性。洗滌液要新鮮,現(xiàn)用現(xiàn)配,陳舊的洗滌液會出現(xiàn)本底增高現(xiàn)象,也可能出現(xiàn)假陽性。液體試劑是指藥物分散在液體分散介質(zhì)中組成的內(nèi)服或外用的液態(tài)制劑。碳酸氫鈉溶液(7.5%)
檢測試劑盒可在板孔中參加稀釋液,再在其中參加血清標本。軟骨染色液(阿利新藍法,pH1.0)
試劑盒特色: 一、、活絡(luò)、特異的抗體;二、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性; 三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體; 四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標本類型;五、節(jié)省試驗經(jīng)費。 檢測試劑盒回收率是反應(yīng)待測物在樣品分析過程中的丟失的程度,丟失越少,回收率越高,如果作標液1PPM,就是1毫克/升,而作出規(guī)范數(shù)據(jù)為0.99毫克/升,就是說你的回收率是99%,這個與真實成分有親近的,說明辦法的準確度。比方水中總無機氯含量測定,樣品水中含有無機氯20mg/L,取100mL被測水樣品,參加0.1mL濃度為10mg/mL的含無機。軟骨染色液(阿利新藍法,pH1.0)