檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)分析:吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的去吸,減少誤差。將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),避免頭和孔內(nèi)液體接觸,可使頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會(huì)自然流下去(應(yīng)該是加樣的時(shí)候,板上稀釋不算的吧)。液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功能(注意是平行晃動(dòng),即上下or左右)。溫浴時(shí),要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā)(老辦法是放入濕盒內(nèi),紗布加點(diǎn)無(wú)菌水即可)。pH緩沖溶液有何用途:pH測(cè)量前標(biāo)定校準(zhǔn)pH計(jì)。Miller培養(yǎng)基
pH緩沖溶液有何用途:(1)pH測(cè)量前標(biāo)定校準(zhǔn)pH計(jì)。(2)用以檢定pH計(jì)的準(zhǔn)確性,例如,用pH=6.86和pH=14.00,標(biāo)定pH計(jì)后,將pH電極插入pH=9.18溶液中,檢查儀器顯示值和標(biāo)準(zhǔn)溶液的pH值是否一致。(3)在一般精度測(cè)量時(shí)檢pH計(jì)是否需要重新標(biāo)定。pH計(jì)標(biāo)定并使用后也許會(huì)產(chǎn)生漂移或變化,因此在測(cè)試前將電極插入與被測(cè)溶液比較接近的標(biāo)準(zhǔn)緩沖液中,根據(jù)誤差大小確定是否需要重新標(biāo)定。(4)檢測(cè)pH電極的性能。如何配制pH標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液:對(duì)于一般pH測(cè)量,可使用成套的pH組沖試劑(可配制250mL),配制溶液時(shí),應(yīng)使用去離子水,并預(yù)先煮沸15~30分鐘,以除去溶解的二氧化碳。剪開(kāi)塑料袋將試劑倒入燒杯中,用適量去離子水使之溶解,并沖洗包裝袋,再倒入250mL容量瓶中,稀釋至刻度,充分搖勻即可。HT Media Supplement(50×)檢測(cè)試劑盒洗刷次數(shù)越多,布景越低。
潮霉素 B使用方法:一、 儲(chǔ)存液的配制(50mg/ml)稱(chēng)取1 g 潮霉素B(CH6362)用PBS(0.01 M)溶液或去離子水溶解,定容20ml。0.22μm濾器過(guò)濾除菌,分裝于無(wú)菌凍存管,2-8℃冷藏,1年內(nèi)穩(wěn)定。或直接選購(gòu)潮霉素B溶液(50mg/ml,CH6361)二、 工作濃度的篩選:潮霉素B用來(lái)篩選的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型,培養(yǎng)基,生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于開(kāi)始次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過(guò)建立殺滅曲線(xiàn)(kill curve),即劑量反應(yīng)性曲線(xiàn),來(lái)確定較佳篩選濃度。一般而言,哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL;細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL;菌類(lèi)300-1000μg/mL。
標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)應(yīng)在規(guī)定的貯存或使用條件下,定期地進(jìn)行待定特性量值的穩(wěn)定性檢驗(yàn)。穩(wěn)定性檢驗(yàn)的時(shí)間間隔可以按先密后疏的原則安排。在有效期間內(nèi)應(yīng)有多個(gè)時(shí)間間隔的監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)。當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)有多個(gè)待定特性量值時(shí),應(yīng)選擇那些易變的和有代表性的特性量值進(jìn)行穩(wěn)定性檢驗(yàn)。選擇不低于定值方法精密度和具有足夠靈敏度的測(cè)量方法進(jìn)行穩(wěn)定性檢驗(yàn),并注意操作及實(shí)驗(yàn)條件的一致??疾旆€(wěn)定性所用樣品應(yīng)從分裝成小包裝單元的樣品中隨機(jī)抽取,抽取的樣品數(shù)對(duì)于總體樣品有足夠的代表性。PH電極的保護(hù)液,即 3mol/L的KCL溶液。
緩沖溶液的緩沖能力:在緩沖溶液中加入少量強(qiáng)酸或強(qiáng)堿,其溶液pH值變化不大,但若加入酸,堿的量多時(shí),緩沖溶液就失去了它的緩沖作用。這說(shuō)明它的緩沖能力是有一定限度的。緩沖溶液的緩沖能力與組成緩沖溶液的組分濃度有關(guān)。0.1mol·L-1HAc和0.1mol· L-1NaAc組成的緩沖溶液,比0.01mol·L-1HAc和0.01mol·L-1NaAc的緩沖溶液緩沖能力大。關(guān)于這一點(diǎn)通過(guò)計(jì)算便可證實(shí)。但緩沖溶液組分的濃度不能太大,否則,不能忽視離子間的作用。組成緩沖溶液的兩組分的比值不為1∶1時(shí),緩沖作用減小,緩沖能力降低,當(dāng)c(鹽)/c(酸)為1∶1時(shí)△pH較小,緩沖能力大。不論對(duì)于酸或堿都有較大的緩沖作用。緩沖溶液的pH值可用下式計(jì)算:此時(shí)緩沖能力大。緩沖組分的比值離1∶1愈遠(yuǎn),緩沖能力愈小,甚至不能起緩沖作用。對(duì)于任何緩沖體系,存在有效緩沖范圍,這個(gè)范圍大致在pKaφ(或pKbφ)兩側(cè)各一個(gè)pH單位之內(nèi)。pH緩沖溶液有何用途:在一般精度測(cè)量時(shí)檢pH計(jì)是否需要重新標(biāo)定。乙酸鈉緩沖液(2mol/L,pH3.6-5.0)
固體試劑一般裝在帶膠木塞的廣口瓶中,液體試劑則盛在細(xì)口瓶中。Miller培養(yǎng)基
BCA蛋白檢測(cè)試劑盒是進(jìn)行蛋白質(zhì)濃度測(cè)定的常見(jiàn)的方法之一。BCA蛋白定量的主要原理是:蛋白質(zhì)在堿性條件下,可以將二價(jià)Cu2+離子還原成一價(jià)Cu+離子。產(chǎn)生的一價(jià)Cu+離子可以與BCA(Bicinchoninicacid)試劑結(jié)合,終生成紫色的復(fù)合物。該復(fù)合物在562nm處有很強(qiáng)的吸收峰。復(fù)合物的多少與蛋白質(zhì)的濃度呈接近的線(xiàn)性關(guān)系。BCA蛋白檢測(cè)試劑盒有許多優(yōu)點(diǎn):檢測(cè)的靈敏度高,檢測(cè)的蛋白質(zhì)濃度下限可達(dá)20μg/mL。線(xiàn)性范圍廣,在20-2000μg/mL的范圍內(nèi),呈接近的線(xiàn)性關(guān)系。兼容性良好,產(chǎn)品可以兼容的化學(xué)物質(zhì)非常普遍。Miller培養(yǎng)基