用亞甲基藍(lán)溶液染色后,被染為深藍(lán)色的部分是(細(xì)胞核)亞甲基藍(lán)可以結(jié)合核酸,使細(xì)胞核呈藍(lán)色。 臺(tái)盼藍(lán)能使死細(xì)胞著色機(jī)理:正常的活細(xì)胞,胞膜結(jié)構(gòu)完整,能夠排斥臺(tái)盼藍(lán),使之不能夠進(jìn)入胞內(nèi);而喪失活性或細(xì)胞膜不完整的細(xì)胞,胞膜的通透性增加,可被臺(tái)盼藍(lán)染成藍(lán)色。通常認(rèn)為細(xì)胞膜完整性喪失,即可認(rèn)為細(xì)胞已經(jīng)死亡。因此,借助臺(tái)盼藍(lán)染色可以非常簡(jiǎn)便、快速地區(qū)分活細(xì)胞和死細(xì)胞。臺(tái)盼藍(lán)是組織和細(xì)胞培養(yǎng)中較常用的死細(xì)胞鑒定染色方法之一。一般植物細(xì)胞篩選濃度在 20~200μ g/ml,動(dòng)物細(xì)胞篩選濃度 50~1000μ g/ml。RIPA裂解液(強(qiáng))
使用方法:1, 固定細(xì)胞或組織樣品,經(jīng)過(guò)固定后,適當(dāng)洗滌除去固定劑。如果需要進(jìn)行免疫熒光染色,可先進(jìn)行免疫熒光染色,染完畢后再進(jìn)行染色。如果不需要進(jìn)行其它染色,則直接進(jìn)行染色。 2, 對(duì)于貼壁細(xì)胞或組織切片,加入少量染色液,覆蓋住樣品即可。對(duì)于懸浮細(xì)胞,至少加入待染色樣品體積 3 倍的染色液,混勻。 3, 室溫染色 5-10 分鐘。 4, 吸除染色液,生理鹽水洗滌 2-3 次,每次 3-5 分鐘。 5, 置于熒光顯微鏡下觀察,激發(fā)波長(zhǎng) 360-400nm。 溶液注意事項(xiàng): dapi 被普遍認(rèn)為具有致性,操作時(shí)應(yīng)戴手套,并避免交叉污染。 本產(chǎn)品需避光,并盡量避免反復(fù)凍融。熒光染料都存在淬滅問(wèn)題,建議染色后盡量當(dāng)天完成檢測(cè)。 為減緩熒光淬滅可以使用抗熒光衰減封片劑。草酸水溶液(1%)檢測(cè)試劑盒可在板孔中參加稀釋液,再在其中參加血清標(biāo)本。
檢測(cè)試劑盒辦法的三大特色表現(xiàn):1.穩(wěn)定性好:包被的抗原的穩(wěn)定性可使檢測(cè)試劑盒的效期得到保證,早期以組成肽為包被抗原的檢測(cè)試劑盒效期只有3-4個(gè)月,選用基因工程抗原后效期很大程度延長(zhǎng)了。2.基因工程抗原將特異性抗原決定簇基因融合表達(dá),表達(dá)產(chǎn)品包括更多的抗原決定簇,可進(jìn)步檢測(cè)試劑盒的靈敏度,進(jìn)步檢出率。3.分子量大:組成肽選用化學(xué)辦法制備,由于工藝的限制,組成數(shù)量有限,只能達(dá)到數(shù)百個(gè)氨基酸。而使用基因工程制備的抗原,分子量更大。
校準(zhǔn)液標(biāo)示值往往是按其基質(zhì)偏差修正的,所以標(biāo)示值并非實(shí)際值。校準(zhǔn)液、質(zhì)控血清通常是經(jīng)過(guò)處理的混合人或動(dòng)物血清,這種制備物在特定分析系統(tǒng)中往往與人新鮮血清反應(yīng)性不同而產(chǎn)生基質(zhì)偏差。如總膽固醇測(cè)定基質(zhì)效應(yīng)研究指出:校準(zhǔn)液酶法測(cè)定回收結(jié)果偏低可達(dá)5%~7%。甘油三酯測(cè)定,有人主張選用雙試劑方法消除內(nèi)源性甘油,這個(gè)方法是可行的,但忽視了一個(gè)化學(xué)平衡理論。因?yàn)樗械孽ピ谒芤褐卸疾皇呛?jiǎn)單地以酯的形式存在,而是以水解與酯化相平衡的形式存在。在一個(gè)平衡體系中,如果去除游離甘油,這個(gè)平衡就向生成甘油方向移動(dòng),甘油三酯就會(huì)重新水解,生成新的甘油,達(dá)到新的平衡,因此樣品與R1試劑孵育時(shí)間越長(zhǎng),測(cè)得甘油三酯值就越低。甘油三酯測(cè)定,不只要去除游離甘油,而且還要克服樣本含量真實(shí)性發(fā)生的變化,試劑中必須加入甘油激酶,并且延遲時(shí)間要標(biāo)準(zhǔn)化。所以,一些試驗(yàn)項(xiàng)目在消除內(nèi)源性物質(zhì)干擾的同時(shí),會(huì)帶來(lái)樣品含量真實(shí)性的變化。檢測(cè)試劑盒要留心避免出現(xiàn)嚴(yán)峻溶血。
利福平溶液片有什么作用:【性狀】本品滴丸為暗紅色,緩沖液為無(wú)色澄明溶液。 【作用類別】 【藥理毒理】利福平為半合成廣譜殺菌劑,與依賴于DNA的RNA多聚酶的β亞單位牢固結(jié)合,克制細(xì)菌RNA的合成,防止該酶與DNA連接,從而阻斷RNA轉(zhuǎn)錄過(guò)程。 【藥代動(dòng)力學(xué)】利福平為脂溶性,易于進(jìn)入敏感菌細(xì)胞內(nèi)殺死敏感菌。眼部給藥吸收后可彌散至大部分體液和組織中,本品在肝臟中可被自身誘導(dǎo)微粒體氧化酶作用而迅速去乙?;?,成為具有克菌活性的代謝物,然后經(jīng)水解形成無(wú)活性的代謝物由尿排出。本品主要經(jīng)膽汁和腸道排出,亦可經(jīng)乳汁排出。利福平不能經(jīng)血液透析或腹膜透析除去。浸洗劑是指藥物與適宜的溶劑或分散介質(zhì)制成的對(duì)動(dòng)物進(jìn)行全身浸浴的液體試劑。植物根系活力檢測(cè)液(甲烯藍(lán)比色法)
利福平溶液怎么配制:加入40ml甲醇,振蕩充分混合溶解之后定容50ml,可以渦旋。RIPA裂解液(強(qiáng))
從試劑瓶取用試劑,用左手持量筒(或試管),并用大姆指指示所需體積刻度處。右手持試劑瓶(注意:試劑標(biāo)簽應(yīng)向手心避免試劑沾污標(biāo)簽),慢慢將液體注入量筒到所指刻度。讀取刻度時(shí),視線應(yīng)與液體凹面的低處保持水平。倒完后,應(yīng)將試劑瓶口在容器壁上靠一下,再將瓶子豎直,以免試劑流至瓶的外壁。如果是平頂塞子,取出后應(yīng)倒置桌上,如瓶塞頂不是扁平的,可用食指和中指(或中指和無(wú)名指)醫(yī)學(xué)教育|網(wǎng)搜集整理將瓶塞夾住(或放在潔凈的表面皿上),切不可將它橫置桌上。取用試劑后應(yīng)立即蓋上原來(lái)的瓶塞,把試劑瓶放回原處,并使試劑標(biāo)簽朝外,應(yīng)根據(jù)所需用量取用試劑,不必多取,如不慎取出了過(guò)多的試劑,只能棄去,不得倒回或放回原瓶。以免沾污試劑。RIPA裂解液(強(qiáng))