檢測(cè)試劑盒變質(zhì)的原因:方法學(xué)的影響。測(cè)定模式包括以下幾種:雙抗體夾心法、間接法、雙抗原夾心法、IgM抗體捕捉法、競(jìng)爭(zhēng)抑制法,其中競(jìng)爭(zhēng)抑制法(HBeAb,HBcAb等采用)因受操作時(shí)差所引起的競(jìng)爭(zhēng)等因素的影響,結(jié)果重復(fù)性較差,質(zhì)量較難控制。試劑因素。不同批次的試劑在制作過(guò)程中很難保證質(zhì)量完全一致,即使是通過(guò)批批檢的項(xiàng)目其檢測(cè)結(jié)果也存在差異,因此必須選擇和訂購(gòu)長(zhǎng)批號(hào)的試劑,并保證保存條件。嚴(yán)格執(zhí)行這一標(biāo)準(zhǔn)可以避免因試劑批號(hào)改變而重新建立質(zhì)控體系及重新評(píng)估試劑的復(fù)雜過(guò)程,并且能夠保證結(jié)果的穩(wěn)定性;對(duì)于效期短、使用率低的試劑,應(yīng)當(dāng)小量分裝,每次使用則取分裝部分即可,避免反復(fù)凍融造成試劑的失效。檢測(cè)試劑盒是經(jīng)過(guò)酶聯(lián)免疫吸附反響進(jìn)行實(shí)驗(yàn)來(lái)檢測(cè)特定物質(zhì)的檢測(cè)試劑盒。Tris抗原修復(fù)液(10×,pH10.0)
試劑抗干擾作用的合理性有些液體雙試劑,其實(shí)質(zhì)并不真正具備抗干擾的能力而只是解決了試劑的液體化和穩(wěn)定性問(wèn)題。如,ALT檢測(cè)試劑盒中,NADH在pH7.5~7.8水溶液中極不穩(wěn)定,在pH>8.7時(shí)才能穩(wěn)定保存。因此,為了保證試劑穩(wěn)定性,液體雙試劑的R1需要維持pH>8.7,但此時(shí)LDH活性很大程度下降,就失去消除內(nèi)源性酸的功能,只有加入試劑R2后,反應(yīng)混合液的pH下降至LDH適pH,在經(jīng)過(guò)延遲時(shí)間60 S后,才能消除內(nèi)源性酸的干擾。再如,Tfinder反應(yīng)中抗Vc干擾問(wèn)題:由于維生素c易氧化,樣品中Vc會(huì)競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng)生成的過(guò)氧化氫,而產(chǎn)生負(fù)干擾。因此,在試劑R1中加入抗壞血酸氧化酶,這種方法是有效的,但不一定有很大的意義。固綠染色液(0.5%)一切試劑瓶蓋須蓋緊以避免蒸騰和污染,試劑避免受到微生物的污染。
說(shuō)明?檢測(cè)試劑盒的具體規(guī)則:要確保微量加樣器的準(zhǔn)確性,能夠運(yùn)用蒸餾水和電子天平進(jìn)行確認(rèn)(因?yàn)檎麴s水不含雜質(zhì),溫度環(huán)境為20%左右時(shí),lmL的水能夠看作是lg、200L的水能夠看作是0.2g)每一把微量加樣器都應(yīng)該將其高量程和低量程進(jìn)行確認(rèn)。在運(yùn)用微量加樣器時(shí),汲取不同瓶子中液體后要更換頭,即便汲取規(guī)范品溶液。汲取液體時(shí)速度不易太快,檢測(cè)試劑盒避免發(fā)生氣泡,汲取的量不夠準(zhǔn)確。將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),避免頭和孔內(nèi)液體觸摸,可使頭上的液滴和孑L壁觸摸,液滴會(huì)自然流下去。吸入液體時(shí)的的辦法是吸兩檔打一檔,避免因?yàn)轭^的毛細(xì)效果使得部分液體不能流出而形成的誤差。
微生物的培養(yǎng)特征是指微生物培養(yǎng)在培養(yǎng)基上所表現(xiàn)出的群體形態(tài)和生長(zhǎng)情況。一般可用斜面、液體和半固體培養(yǎng)基來(lái)檢驗(yàn)不同微生物的培養(yǎng)特征。它們培養(yǎng)在斜面培養(yǎng)基上,可以呈絲線狀、刺毛狀、串珠狀、疏展?fàn)?、?shù)枝狀或假根狀(圖Ⅶ-6)。生長(zhǎng)在液體培養(yǎng)基內(nèi),可以呈混濁、絮狀、粘液狀、形成菌膜、上層清晰而底部顯沉淀狀。穿刺培養(yǎng)在半固體培養(yǎng)基中,可以沿接種線向四周蔓延;或只沿線生長(zhǎng);也可上層生長(zhǎng)得好,甚至連成一片,底部很少生長(zhǎng);或底部長(zhǎng)得好,上層甚至不生長(zhǎng)。利用微生物的培養(yǎng)特征,可以作為它們的種類鑒定和識(shí)別純培養(yǎng)是否污染的參考。檢測(cè)試劑盒變質(zhì)的原因:樣本因素。
標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的正確使用:溯源性。溯源性是通過(guò)一條具有規(guī)定不確定度的不間斷的比較鏈,使測(cè)量結(jié)果能夠與規(guī)定的參考標(biāo)準(zhǔn),通常是國(guó)家計(jì)量標(biāo)準(zhǔn)或國(guó)際計(jì)量標(biāo)準(zhǔn)聯(lián)系起來(lái)的特性。食品質(zhì)量分析中,很多分析結(jié)果是靠標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)來(lái)溯源的,實(shí)驗(yàn)室在選購(gòu)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)時(shí)應(yīng)注意其證書(shū)是否能夠證明其對(duì)國(guó)家計(jì)量標(biāo)準(zhǔn)的溯源性。有些標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)由于與待測(cè)樣品的物理化學(xué)特性不同,如塊狀與粒狀、固體與液體、基體不完全匹配等,雖然溯源性能夠達(dá)到要求,但分析結(jié)果的溯源性會(huì)受到影響。檢測(cè)試劑盒將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的催化作用相結(jié)合起來(lái)的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù)。肝素鈉溶液(1%,1250U/ml)
科研實(shí)驗(yàn)中試劑取用應(yīng)注意事項(xiàng):余下部分用膠頭滴管滴加藥液至所需刻度線。Tris抗原修復(fù)液(10×,pH10.0)
hochest染色和DAPI染色有什么區(qū)別:1、每個(gè)染料有自己獨(dú)特的激發(fā)譜線和發(fā)射譜線.這也是以上兩個(gè)染料的主要區(qū)別. 另外Hoechest 33258 是膜透性的,因此在活細(xì)胞時(shí)候能輕松進(jìn)入;DAPI是半透性的,有選擇性的進(jìn)入.因此Hoechest 33258 一般用來(lái)染活細(xì)胞,可以長(zhǎng)驅(qū)直入;DAPI一般是染固定細(xì)胞.2、兩者都可以用紫外看,參見(jiàn)以下的激發(fā)發(fā)射波長(zhǎng)Hoechst 33258的較大激發(fā)波長(zhǎng)為346nm,較大發(fā)射波長(zhǎng)為460nm;Hoechst 33258和雙鏈DNA結(jié)合后,較大激發(fā)波長(zhǎng)為352nm,較大發(fā)射波長(zhǎng)為461nm。DAPI的較大激發(fā)波長(zhǎng)為340nm,較大發(fā)射波長(zhǎng)為488nm;DAPI和雙鏈DNA結(jié)合后,較大激發(fā)波長(zhǎng)為364nm,較大發(fā)射波長(zhǎng)為454nm。Tris抗原修復(fù)液(10×,pH10.0)