殺滅曲線的建立：通過(guò)建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線），確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的較低濃度，從而篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株。建立殺滅曲線至少選擇5個(gè)濃度。1、按照20-25%的細(xì)胞密度將未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2過(guò)夜培養(yǎng)（需要更高密度，可增加接種量）。2、根據(jù)細(xì)胞類型，設(shè)定合適的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。3、第2天換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基，每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。4、接下來(lái)每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。5、按照每2天進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)，來(lái)確定殺滅未轉(zhuǎn)染細(xì)胞的恰當(dāng)濃度。通常7-10天內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的較低濃度為篩選用的工作濃度。檢測(cè)試劑盒準(zhǔn)確度是測(cè)定值與實(shí)在值挨近的程度。Delafield蘇木素染色液

試劑抗干擾作用的合理性有些液體雙試劑，其實(shí)質(zhì)并不真正具備抗干擾的能力而只是解決了試劑的液體化和穩(wěn)定性問(wèn)題。如，ALT檢測(cè)試劑盒中，NADH在pH7.5~7.8水溶液中極不穩(wěn)定，在pH>8.7時(shí)才能穩(wěn)定保存。因此，為了保證試劑穩(wěn)定性，液體雙試劑的R1需要維持pH>8.7，但此時(shí)LDH活性很大程度下降，就失去消除內(nèi)源性酸的功能，只有加入試劑R2后，反應(yīng)混合液的pH下降至LDH適pH，在經(jīng)過(guò)延遲時(shí)間60 S后，才能消除內(nèi)源性酸的干擾。再如，Tfinder反應(yīng)中抗Vc干擾問(wèn)題：由于維生素c易氧化，樣品中Vc會(huì)競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng)生成的過(guò)氧化氫，而產(chǎn)生負(fù)干擾。因此，在試劑R1中加入抗壞血酸氧化酶，這種方法是有效的，但不一定有很大的意義。蘇丹IV酒精飽和溶液實(shí)驗(yàn)室分裝時(shí)，固體只標(biāo)明試劑名稱，液體還須注名明濃度。

液體固體試劑正確取用試劑的方法過(guò)程：液體試劑的取用方法試劑瓶取用試劑，用左手持量筒（或試管），并用大姆指指示所需體積刻度處。右手持試劑瓶（注意：試劑標(biāo)簽應(yīng)向手心避免試劑沾污標(biāo)簽），慢慢將液體注入量筒到所指刻度。讀取刻度時(shí)，視線應(yīng)與液體凹面的低處保持水平倒完后，應(yīng)將試劑瓶口在容器壁上靠一下，再將瓶子豎直醫(yī)學(xué)|教育網(wǎng)搜集整理，以免試劑流至瓶的外壁。如果是平頂塞子，取出后應(yīng)倒置桌上，如瓶塞頂不是扁平的，可用食指和中指（或中指和無(wú)名指）將瓶塞夾?。ɑ蚍旁跐崈舻谋砻婷笊希?，切不可將它橫置桌上。

丁胺卡那霉素溶液(Amikacin,50mg/ml) 產(chǎn)品簡(jiǎn)介： 丁胺卡那霉又稱阿米卡星（Amikacin） ，CAS 號(hào)為 37515-28-5，分子量為 585.603，是 一種氨基糖苷類。阿米卡星克菌原理是與細(xì)菌 30S 亞基結(jié)合，阻斷細(xì)菌蛋白質(zhì)合成 而起到克菌作用。其克菌譜與慶大霉素相似，但對(duì)耐卡那霉素、妥布霉素和慶大霉素的細(xì)菌 包括綠膿桿菌和沙雷氏桿菌仍有效，臨床上可用于治好多種細(xì)菌傳染。 產(chǎn)品組成： 編號(hào) 名稱 丁胺卡那霉素溶液 (Amikacin solution,50mg/ml) 使用說(shuō)明書(shū) 操作步驟（光供參考） ： 1、 根據(jù)實(shí)驗(yàn)具體要求操作。 注意事項(xiàng)： 1、 注意無(wú)菌操作，避免污染。 2、 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。 有效期：12 個(gè)月有效。固體試劑的取用:直接傾倒時(shí)瓶口必須緊挨試管口，試管45度，并且緩緩地倒。

當(dāng)往某些溶液中加入一定量的酸和堿時(shí)，有阻礙溶液pH變化的作用，稱為緩沖作用，這樣的溶液叫做緩沖溶液。弱酸及其鹽的混合溶液(如HOAc與NaOAc)，弱堿及其鹽的混合溶液(如NH3·H2O與NH4Cl)等都是緩沖溶液。由弱酸HA及其鹽NaA所組成的緩沖溶液對(duì)酸的緩沖作用，是由于溶液中存在足夠量的堿A-的緣故。當(dāng)向這種溶液中加入一定量的強(qiáng)酸時(shí)，H+離子基本上被A-離子消耗:所以溶液的pH值幾乎不變;當(dāng)加入一定量強(qiáng)堿時(shí)，溶液中存在的弱酸HA消耗OH-離子而阻礙pH的變化。磷酸緩沖鹽溶液可調(diào)整的適宜pH緩沖作用。Unna堿性美藍(lán)染色液

試劑的穩(wěn)定性對(duì)準(zhǔn)確度非常重要。Delafield蘇木素染色液

DAPI是一種能夠與DNA強(qiáng)力結(jié)合的熒光染料,常用熒光顯微鏡觀測(cè),可以透過(guò)完整的細(xì)胞膜,可用于活細(xì)胞和固定細(xì)胞的染色,其工作濃度一般為0.3mmol/L或0.1ug/ml。顯微鏡下可以看到藍(lán)色熒光的細(xì)胞,熒光顯微鏡觀察細(xì)胞標(biāo)記的效率高 ,且對(duì)活細(xì)胞無(wú)毒副作用。DAPI染色常用于細(xì)胞凋亡檢測(cè),染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細(xì)胞儀檢測(cè)。DAPI也常用于普通的細(xì)胞核染色以及某些特定情況下的雙鏈DNA染色。DAPI的大激發(fā)波長(zhǎng)為340nm,大發(fā)射波長(zhǎng)為488nm, DAPI和雙鏈DNA結(jié)合后,大激發(fā)波長(zhǎng)為360nm,大發(fā)射波長(zhǎng)為460nm。Delafield蘇木素染色液