緩沖溶液的計(jì)算分為兩大類:(1)已知共軛酸堿的濃度或質(zhì)量,計(jì)算pH值。(2)已知pH值,計(jì)算配制時(shí)要滿足的濃度和質(zhì)量配制緩沖溶液時(shí),有多種組合的方法,常見(jiàn)的有以下幾種(1)兩種溶液混合:如,NH3+NH4Cl溶液,NaOH溶液 +NH4Cl溶液,NH3+HCl溶液。(2)固體試劑+溶液:如,NH3+NH4Cl固體,NaOH固體 +NH4Cl溶液,HAc+NaAc固體。(3)兩種固體試劑溶解混合:如,NaOH固體 +NH4Cl固體,Na2CO3固體+NaHCO3固體。由此可見(jiàn),緩沖溶液的計(jì)算類型是很豐富的。實(shí)驗(yàn)中的配制一般是按共軛酸堿的量來(lái)稱取或量取試劑后,再溶解混合到指定體積。但分析化學(xué)學(xué)習(xí)中的計(jì)算類型則可以演繹出十幾種計(jì)算情況。檢測(cè)試劑盒可在試管中按規(guī)則的稀釋度稀釋后再加樣。JYBL-Ⅱ脫鈣液
淋巴細(xì)胞分離液:淋巴細(xì)胞分離液是一種根據(jù)細(xì)胞密度差異,借助離心產(chǎn)生的重力加速度,進(jìn)行細(xì)胞的分離純化的常用試劑。常用的淋巴細(xì)胞分離液有Ficoll淋巴細(xì)胞分離液、Percoll淋巴細(xì)胞分離液。Ficoll與Percoll分離單個(gè)核細(xì)胞的方法均為密度梯度離心法。分離原理:外周血中單個(gè)核細(xì)胞和單核細(xì)胞,其體積、形態(tài)和密度與其他細(xì)胞不同,淋巴細(xì)胞分離液是一種密度介于1.075~1.090之間而近似于等滲的溶液,用它做密度梯度離心,使一定密度的細(xì)胞按相應(yīng)密度梯度分布,從而將各種血細(xì)胞加以分離。淋巴細(xì)胞分離液Lymphocyte Separation Medium(human, Ficoll-Paque )是世界范圍內(nèi)用于體外研究分離人淋巴細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)室公認(rèn)的標(biāo)準(zhǔn)。活化部分凝血活酶時(shí)間(APTT)檢測(cè)試劑盒(鞣花酸凝固法)注意ELISA檢測(cè)試劑盒保存期,過(guò)保存期的試劑不能使用。
檢測(cè)試劑盒檢測(cè)數(shù)據(jù)的處理步驟:實(shí)驗(yàn)實(shí)在值。從理論上說(shuō),樣品中某一組分的含量必定有一個(gè)客觀存在的實(shí)在數(shù)值,稱之為“實(shí)在值”或“真值”。用“μ”表明。但實(shí)踐上,關(guān)于客觀存在的真值,人們不可能的知道,只能隨著丈量技術(shù)的不斷進(jìn)步而逐步挨近真值。實(shí)踐工作中,往往用“標(biāo)準(zhǔn)值”替代“真值”。標(biāo)準(zhǔn)值。檢測(cè)試劑盒選用多種牢靠的剖析辦法、由具有豐富經(jīng)歷的剖析人員通過(guò)重復(fù)多次測(cè)定得出的成果平均值,是一個(gè)比較準(zhǔn)確的成果。實(shí)踐工作中一般用標(biāo)準(zhǔn)值替代真值。例如原子量、物理化學(xué)常數(shù):阿佛伽得羅常數(shù)為6.02×10 等。與我們實(shí)驗(yàn)相關(guān)的是將純物質(zhì)中元素的理論含量作為實(shí)在值。
如何判斷是否是基質(zhì)效應(yīng)呢?第一種方法是采用線性稀釋,一般來(lái)講,抗原和捕獲抗體、檢測(cè)抗體之間的結(jié)合作用很強(qiáng),樣品濃度被稀釋并不影響它們的結(jié)合,而造成基質(zhì)效應(yīng)的非特異結(jié)合的力要弱很多,如果不斷稀釋樣品,非特異結(jié)合造成的干擾會(huì)逐步減少,測(cè)量值也更接近真實(shí)值。沒(méi)有基質(zhì)效應(yīng)時(shí),無(wú)論如何稀釋,測(cè)量值都和真實(shí)值吻合。而有基質(zhì)效應(yīng)時(shí),稀釋會(huì)造成非特異性結(jié)合比例的減少,測(cè)量值也相應(yīng)地產(chǎn)生很大改變。第二種方法是摻入回收率實(shí)驗(yàn),將低、中和高濃度的分析物摻入到已測(cè)定過(guò)濃度的樣本中,摻入前后實(shí)測(cè)到的濃度增加部分與摻入濃度之比就是回收率,回收率以百分比的形式呈現(xiàn)?;厥章式橛?0-120%,才符合標(biāo)準(zhǔn)。液體試劑易于分劑量,服用方便。
緩沖溶液的配制和應(yīng)用:為了配制一定pH的緩沖溶液,首先選定一個(gè)弱酸,它的pKaφ盡可能接近所需配制的緩沖溶液的pH值,然后計(jì)算酸與堿的濃度比,根據(jù)此濃度比便可配制所需緩沖溶液。以上主要以弱酸及其鹽組成的緩沖溶液為例說(shuō)明它的作用原理、pH計(jì)算和配制方法。對(duì)于弱堿及其鹽組成的緩沖溶液可采用相同的方法。緩沖溶液在物質(zhì)分離和成分分析等方面應(yīng)用普遍,如鑒定Mg2 離子時(shí),可用下面的反應(yīng):白色磷酸銨鎂沉淀溶于酸,故反應(yīng)需在堿性溶液中進(jìn)行,但堿性太強(qiáng),可能生成白色Mg(OH)2沉淀,所以反應(yīng)的pH值需控制在一定范圍內(nèi),因此利用NH3·H2O和NH4Cl組成的緩沖溶液,保持溶液的pH值條件下,進(jìn)行上述反應(yīng)。檢測(cè)試劑盒在生產(chǎn)過(guò)程中,不同批次的試劑的質(zhì)量是確保完全一致非常困難。山梨醇溶液(1mol/L,無(wú)菌)
如果試劑符合基準(zhǔn)物質(zhì)的要求 (組成與化學(xué)式相符、純度高、穩(wěn)定),可以直接配制標(biāo)準(zhǔn)溶液。JYBL-Ⅱ脫鈣液
食品檢測(cè)檢測(cè)試劑盒注意事項(xiàng):檢測(cè)試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間好控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排加樣。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值),請(qǐng)先將樣本稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)后乘以稀釋倍數(shù)(×5×n)。JYBL-Ⅱ脫鈣液