檢測試劑盒變質(zhì)的原因:樣本因素。標本干擾因素包括內(nèi)源性干擾因素和外源性干擾因素,前者包括類風濕因子、補體、異嗜性抗體、自身抗體、溶菌酶等,后者包括標本溶血、標本被細菌污染、標本貯存時間過長、標本凝固不全、冷凍標本的反復凍融等。操作因素。標本干擾因素包括內(nèi)源性干擾因素和外源性干擾因素,前者包括類風濕因子、補體、異嗜性抗體、自身抗體、溶菌酶等,后者包括標本溶血、標本被細菌污染、標本貯存時間過長、標本凝固不全、冷凍標本的反復凍融等。如需少量液體試劑則可用滴管取用,取用時應注意不要將滴管碰到或插入接收容器的壁上或里面。橙黃G指示劑(11.5-14.0)
pH緩沖溶液有何用途:(1)pH測量前標定校準pH計。(2)用以檢定pH計的準確性,例如,用pH=6.86和pH=14.00,標定pH計后,將pH電極插入pH=9.18溶液中,檢查儀器顯示值和標準溶液的pH值是否一致。(3)在一般精度測量時檢pH計是否需要重新標定。pH計標定并使用后也許會產(chǎn)生漂移或變化,因此在測試前將電極插入與被測溶液比較接近的標準緩沖液中,根據(jù)誤差大小確定是否需要重新標定。(4)檢測pH電極的性能。如何配制pH標準緩沖溶液:對于一般pH測量,可使用成套的pH組沖試劑(可配制250mL),配制溶液時,應使用去離子水,并預先煮沸15~30分鐘,以除去溶解的二氧化碳。剪開塑料袋將試劑倒入燒杯中,用適量去離子水使之溶解,并沖洗包裝袋,再倒入250mL容量瓶中,稀釋至刻度,充分搖勻即可。SSC緩沖液(20×,pH7.0,RNase free)檢測試劑盒第二個影響洗刷作用的主要參數(shù)是洗刷循環(huán)的量。
標準物質(zhì)的正確使用:溯源性。溯源性是通過一條具有規(guī)定不確定度的不間斷的比較鏈,使測量結(jié)果能夠與規(guī)定的參考標準,通常是國家計量標準或國際計量標準聯(lián)系起來的特性。食品質(zhì)量分析中,很多分析結(jié)果是靠標準物質(zhì)來溯源的,實驗室在選購標準物質(zhì)時應注意其證書是否能夠證明其對國家計量標準的溯源性。有些標準物質(zhì)由于與待測樣品的物理化學特性不同,如塊狀與粒狀、固體與液體、基體不完全匹配等,雖然溯源性能夠達到要求,但分析結(jié)果的溯源性會受到影響。
嚴控反應時間。反應時間過長,酶失活;反應時間過短,酶結(jié)合物不能與血清中的微生物抗原抗體充分結(jié)合,生成物結(jié)構(gòu)松散不牢固,容易洗掉,都可能造成假陰性。注意檢測試劑盒保存期,過保存期的試劑不能使用。評估試劑的實用性。試劑的穩(wěn)定與否,對準確率的高低到頭重要。在試劑啟用前,應進行陰、陽對照及樣品反復比照試驗,判定試劑符合要求后方可使用。嚴格掌握顯色時間。顯色時間過短,加入終止液反應終止后,底物結(jié)合物的量過少,易出現(xiàn)假陰性。超過顯色要求時間后顯色,應判為假陽性,這可能與試劑本身有關。加顯色劑后立即顯色,不可報陽性,這可能是本底顯色的結(jié)果。為保證溶質(zhì)盡可能全部轉(zhuǎn)移到容量瓶中,應用蒸餾水洗滌燒杯和玻璃棒并將每次洗滌后的溶液都注入到容量瓶中。
測定血清中的某些酶,如CK,離體(采集血液)后很容易失活。失活的原因是酶活性中心的活性基因巰基(一SH)被氧化造成的。只有通過適當?shù)倪€原作用才能重新開始。如CK—NAC檢測試劑盒即含有CK活化劑,名為N一乙酰半胱氨酸。實驗研究證明,NAC對血清中已失活的CK活化過程約需180 S。這就是CK測定為什么要延遲時間較長的理論依據(jù)。在AST,ALT采用IFCC推薦方法測定時需要磷酸吡哆醛預活化。需要強調(diào):含有活化劑的生化試劑,其測定酶活性的結(jié)果要高些。青霉素和鏈霉素的終濃度分別為100 U/mL和100 U/mL,置于4℃冰箱保存。漿膜黏蛋白定性檢測試劑盒(Rivalta反應)
固體試劑一般裝在帶膠木塞的廣口瓶中,液體試劑則盛在細口瓶中。橙黃G指示劑(11.5-14.0)
用pH計測定配制好的鹽溶液的pH值,使其在6.4~7.0之間。一般鹽霧標準中要求試驗過程中的鹽霧收集液pH值在6.5~7.2之間。當pH值不在上述范圍時,應用氫氧化鈉(NaOH)或者冰乙酸(CH3COOH)進行調(diào)節(jié)。氫氧化鈉可以使pH值升高,冰乙酸使pH值降低。通常只需要加入少量的即可調(diào)節(jié)pH值。在氯化鈉溶液中加入少量冰乙酸,攪拌均勻,并用pH計測量溶液的pH值,直至其為3.0-3.1之間,試驗過程中收集液的PH值應在3.1-3.3之間。配制好乙酸鹽霧溶液后,加入氯化銅,其濃度為0.26g/L±0.02g/L(即0.205g/L±0.015g/L無水氯化銅)。調(diào)節(jié)溶液的pH值,直至其為3.0-3.1之間,試驗過程中收集液的PH值應在3.0-3.1之間。橙黃G指示劑(11.5-14.0)